哈靈實(shí)驗(yàn)室教大家凝膠制備中有哪些方法
凝膠制備中有哪些方法
凝膠制備:
1.玻璃板對(duì)齊后放入夾中,垂直卡緊,,加滿水檢漏,。
2.配10%分離膠,APS和TEMED作用為促凝,,后灌膠前加,。若板不漏水,則將水倒出,,并用吸水紙洗凈后灌膠,,灌至大約3/4處,上面加滿水壓平,。
3.配濃縮膠,,同樣地,APS和TEMED后加,,分離膠灌入約30min后觀察小燒杯中剩余分離膠是否已凝,,同時(shí)仔細(xì)觀察可見玻板水和膠間有一條折線,說明膠已凝固,。
4.將上面的水倒去,,吸水紙洗凈,灌入濃縮膠,,灌滿,,注意一定不要有氣泡,然后將梳子插入,,注意保持水平,,約30min后凝固可用。
5.拔梳子在電泳緩沖液中拔,,加樣孔用小針筒沖洗干凈再上樣,,注意上樣時(shí)勿使樣品逸至鄰孔,樣品混勻時(shí)要輕,,不要產(chǎn)生氣泡,,否則加樣時(shí)易導(dǎo)致逸出而使結(jié)果不準(zhǔn)確。
上海哈靈生物科技有公司以*產(chǎn)品為標(biāo)準(zhǔn),,自主研究開發(fā)了一系列應(yīng)用于分子生物學(xué),、蛋白質(zhì)學(xué)、免疫學(xué)研究的相關(guān)產(chǎn)品,,并代理了國(guó)外 gibco/ elisa/Amresco/Sigma/Pharmacia等品牌的生物試劑,,力爭(zhēng)成為生物技術(shù)的產(chǎn)品供應(yīng)商。
酶譜法的基本過程是先將樣品進(jìn)行SDS-聚丙烯酰胺(SDS-PAGE,,含0.1%明膠)電泳分離,,然后在有二價(jià)金屬離子存在的緩沖系統(tǒng)中使樣品中的MMP-2和MMP-9恢復(fù)活性,在各自的遷移位置水解凝膠里的明膠,,后用考馬斯亮藍(lán)將凝膠染色,,再脫色,在藍(lán)色背景下可出現(xiàn)白色條帶,,條帶的強(qiáng)弱與MMP-2和MMP-9活性成正比,。歡迎新老客戶詳細(xì)信息。
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