哈靈實驗室教大家凝膠制備中有哪些方法
凝膠制備中有哪些方法
凝膠制備:
1.玻璃板對齊后放入夾中,,垂直卡緊,,加滿水檢漏。
2.配10%分離膠,,APS和TEMED作用為促凝,,后灌膠前加。若板不漏水,,則將水倒出,,并用吸水紙洗凈后灌膠,灌至大約3/4處,,上面加滿水壓平,。
3.配濃縮膠,同樣地,,APS和TEMED后加,,分離膠灌入約30min后觀察小燒杯中剩余分離膠是否已凝,同時仔細觀察可見玻板水和膠間有一條折線,,說明膠已凝固,。
4.將上面的水倒去,吸水紙洗凈,,灌入濃縮膠,,灌滿,注意一定不要有氣泡,,然后將梳子插入,,注意保持水平,,約30min后凝固可用。
5.拔梳子在電泳緩沖液中拔,,加樣孔用小針筒沖洗干凈再上樣,,注意上樣時勿使樣品逸至鄰孔,樣品混勻時要輕,,不要產生氣泡,,否則加樣時易導致逸出而使結果不準確。
上海哈靈生物科技有公司以*產品為標準,,自主研究開發(fā)了一系列應用于分子生物學,、蛋白質學、免疫學研究的相關產品,,并代理了國外 gibco/ elisa/Amresco/Sigma/Pharmacia等品牌的生物試劑,,力爭成為生物技術的產品供應商。
酶譜法的基本過程是先將樣品進行SDS-聚丙烯酰胺(SDS-PAGE,,含0.1%明膠)電泳分離,,然后在有二價金屬離子存在的緩沖系統(tǒng)中使樣品中的MMP-2和MMP-9恢復活性,在各自的遷移位置水解凝膠里的明膠,,后用考馬斯亮藍將凝膠染色,,再脫色,在藍色背景下可出現(xiàn)白色條帶,,條帶的強弱與MMP-2和MMP-9活性成正比,。歡迎新老客戶詳細信息。
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