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哈靈實(shí)驗(yàn)室教大家凝膠制備中有哪些方法

來(lái)源:上海哈靈生物科技有限公司   2015年06月12日 13:35  

哈靈實(shí)驗(yàn)室教大家凝膠制備中有哪些方法

凝膠制備中有哪些方法

凝膠制備:

1.玻璃板對(duì)齊后放入夾中,垂直卡緊,,加滿(mǎn)水檢漏。

2.配10%分離膠,,APS和TEMED作用為促凝,后灌膠前加,。若板不漏水,,則將水倒出,并用吸水紙洗凈后灌膠,,灌至大約3/4處,,上面加滿(mǎn)水壓平。

3.配濃縮膠,,同樣地,,APS和TEMED后加,分離膠灌入約30min后觀察小燒杯中剩余分離膠是否已凝,,同時(shí)仔細(xì)觀察可見(jiàn)玻板水和膠間有一條折線,,說(shuō)明膠已凝固。

4.將上面的水倒去,,吸水紙洗凈,,灌入濃縮膠,,灌滿(mǎn),,注意一定不要有氣泡,然后將梳子插入,,注意保持水平,,約30min后凝固可用。

5.拔梳子在電泳緩沖液中拔,,加樣孔用小針筒沖洗干凈再上樣,,注意上樣時(shí)勿使樣品逸至鄰孔,,樣品混勻時(shí)要輕,不要產(chǎn)生氣泡,,否則加樣時(shí)易導(dǎo)致逸出而使結(jié)果不準(zhǔn)確,。

上海哈靈生物科技有公司以*產(chǎn)品為標(biāo)準(zhǔn),自主研究開(kāi)發(fā)了一系列應(yīng)用于分子生物學(xué),、蛋白質(zhì)學(xué),、免疫學(xué)研究的相關(guān)產(chǎn)品,并代理了國(guó)外 gibco/ elisa/Amresco/Sigma/Pharmacia等品牌的生物試劑,,力爭(zhēng)成為生物技術(shù)的產(chǎn)品供應(yīng)商,。   

 酶譜法的基本過(guò)程是先將樣品進(jìn)行SDS-聚丙烯酰胺(SDS-PAGE,含0.1%明膠)電泳分離,,然后在有二價(jià)金屬離子存在的緩沖系統(tǒng)中使樣品中的MMP-2和MMP-9恢復(fù)活性,,在各自的遷移位置水解凝膠里的明膠,后用考馬斯亮藍(lán)將凝膠染色,,再脫色,,在藍(lán)色背景下可出現(xiàn)白色條帶,條帶的強(qiáng)弱與MMP-2和MMP-9活性成正比,。歡迎新老客戶(hù)詳細(xì)信息,。

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