人ELISA試劑盒操作步驟

1,、將1個(gè)McAb與固相載體連接，形成固相McAb,。人ELISA試劑盒洗滌除去未結(jié)合物,。

2、同時(shí)加入待檢標(biāo)本和酶標(biāo)McAb,，溫育,，是待檢抗原和固相McAb及酶標(biāo)McAb反應(yīng)形成雙抗體夾心復(fù)合物。洗滌除去未結(jié)合物,。

3,、加底物顯色。

適用于雙抗體夾心法的人ELISA試劑盒,，有些也可用雙位點(diǎn)一步法檢測(cè),。如HBsAg同樣可用此法進(jìn)行檢測(cè)，其原理為：將純化的抗HBs吸附于固相載體表面,，加入待檢血清(或血漿),，同時(shí)加入辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的另一個(gè)抗HBs(酶結(jié)合物)，如血清或血漿中含有HBsAg,，則通過(guò)溫育形成固相McAb-HBsAg-酶標(biāo)McAb復(fù)合物,，加入底物，通過(guò)顯色反應(yīng)進(jìn)行測(cè)定,。若血清或血漿中不含HBsAg,，通過(guò)洗滌除去未結(jié)合物，

加底物后就不顯色,。

1.吸取液體時(shí)速度不易太快,，以免產(chǎn)生氣泡,，吸取的量不夠準(zhǔn)確,。
2.液體全部加入酶標(biāo)孔后，將酶標(biāo)板放在桌子上平行輕輕搖晃30s,，使液體充分混合均勻,，也使其得到充分的反應(yīng)。
3.孵育時(shí)要使蓋板膜封好酶標(biāo)板,，防止水分蒸發(fā),，以防曲線不成線性。
4.由于底物顯色劑對(duì)光及其敏感,，因此要避光保存,。
5.手工洗板時(shí)每次加入洗滌液后。人ELISA試劑盒應(yīng)靜置15～30s,，不要將一個(gè)酶標(biāo)孑L中的洗滌液濺入另一酶標(biāo)孔中,，防止交叉污染,。甩去洗滌液后將酶標(biāo)板放在毛巾或吸水紙上拍干。