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酶學(xué)檢測和ELISA支原體常用檢測方法

來源:上海一研生物科技有限公司   2015年05月15日 10:50  

DNA檢測
 
DNA檢測需要將可疑樣品與指示細(xì)胞共同培養(yǎng),,ELISA試劑盒因此一般需要幾天時間。DNA檢測所用的指示細(xì)胞通常是細(xì)胞質(zhì)區(qū)域較大的Vero細(xì)胞,,如果原樣本中含有支原體,,那么當(dāng)細(xì)胞DNA被熒光染料(如Hoechst染料)染色時,就可以在指示細(xì)胞的核周圍觀察到熒光斑點(diǎn)或熒光顆粒,。分離培養(yǎng)法用來檢測支原體M. hyorhinis菌株并不可靠,,而DNA法可以準(zhǔn)確的將其檢測出來。
 
PCR法
 
PCR法也可以檢測M. hyorhinis菌株,,PCR法檢測支原體只需幾個小時,,是zui快但也是zui不靈敏的支原體檢測方法。該方法采用針對支原體DNA的引物用PCR檢測可疑樣本,,其中PCR引物通常針對支原體的16S rRNA基因,。在凝膠電泳過程中,支原體DNA會顯示為特異性條帶,,以此指示支原體的存在,。PCR法可以檢測大多數(shù)支原體,但謹(jǐn)慎起見同時使用另一種檢測方法來進(jìn)行驗(yàn)證,。
 
酶學(xué)檢測和ELISA試劑盒
 
此外,,也還存在一些其他支原體檢測方法。例如酶學(xué)檢測是將可疑樣本添加到特定底物中,,在這一體系內(nèi)支原體的酶可以將ADP轉(zhuǎn)化為ATP,,隨后能利用ATP發(fā)光的luciferase酶就可以指示支原體的存在。ELISA也能用于支原體檢測,,以ELISA法為基礎(chǔ)的支原體檢測一般使用針對支原體16S rRNA基因的帶標(biāo)記探針或抗體,,來檢測培養(yǎng)物中是否含有支原體。
 
定期檢測
 
支原體感染會使培養(yǎng)細(xì)胞慢慢枯萎,,因此對培養(yǎng)細(xì)胞定期進(jìn)行支原體檢測非常重要,。一般來說每1至3個月就應(yīng)該進(jìn)行一次支原體檢測。將定期支原體檢測常規(guī)化堅持下去,,是細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)對支原體感染的關(guān)鍵,。

110892-200403 積雪草苷 對照品 鑒別 20mg
110893-200201 羥基積雪草苷 對照品 鑒別 20mg
110894-200503 甜菜堿 對照品 含量測定 50mg
110895-200404 雪上一枝蒿甲素 對照品 供比色法含量測定用 20mg
110896-200202 琥珀酸 對照品 鑒別 20mg
110897-200001 α-蒎烯 對照品 含量測定 0.5ml
110898-200202 γ-亞麻酸甲酯 對照品 含量測定 0.2ml
110899-200302 二十八烷醇 對照品 含量測定 10mg
ELISA試劑盒110900-200405 祖師麻甲素 (曾用名:瑞香素) 對照品 含量測定 20mg
111501-200001 尿囊素 對照品 含量測定 50mg
111502-200402 大豆苷元 對照品 鑒別 20mg
111503-200001 芳樟醇 對照品 鑒別 50mg
111504-200001 D-果糖 對照品 鑒別 30mg

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