正確選擇透析膜
透析成功進(jìn)行的關(guān)鍵是在適當(dāng)?shù)臈l件下選用合適的膜.選擇時可參照下列6步:
◆根據(jù)目的選擇膜的等級(生物技術(shù)或標(biāo)準(zhǔn))
◆根據(jù)溶液的化學(xué)特性選擇膜材質(zhì)(CE,RC)-參見化學(xué)相容性表格
◆根據(jù)使用方法選擇產(chǎn)品類型(管狀,即用性)
◆根據(jù)溶質(zhì)分子量在18種MWCO中選擇
◆根據(jù)處理量在多種尺寸(即用型透析裝置)或多種寬度(管狀)中選擇
◆根據(jù)目的選擇膜預(yù)處理方式
關(guān)鍵的選擇
◆正確選擇合適的截留分子量
截留分子量的選擇是以預(yù)留在膜內(nèi)的大分子的分子量和將要被除去的小分子污染物的分子量為基礎(chǔ)的,。使用Spectra/Por 膜時,為達(dá)到合理有效的分離,需分離的兩種物質(zhì)分子量的比率至少為25.
選擇截留分子量的經(jīng)驗法則:選擇截留分子量約為要保留的大分子分子量的一半,以獲得至少90%的保留率.
◆膜的化學(xué)相容性表格
化學(xué)相容性表格主要用作使用指導(dǎo),不作為化學(xué)相容性的保證.溫度,濃度,長時間曝光等因素的改變可能影響產(chǎn)品的使用.建議您自設(shè)條件進(jìn)行測試.
◆正確選擇扁平寬度
透析管扁平寬度的選擇取決于樣品的體積和透析容量.較小的透析管更快;較大的透析管因擴(kuò)散距離較長透析較慢.為易于使用,建議使用總長(包括閉合夾和頂部空間)為大約10-15厘米的膜管.
膜的使用:
下述透析程序是一個普通的基礎(chǔ)透析過程.在開始透析之前應(yīng)考慮到許多變數(shù).透析樣品溶劑\膜的化學(xué)相容性,、膜的截留分子量,,透析溶劑、透析體積,、溫度等變量都會影響透析速率,,因此,一些應(yīng)用中下述過程可能需要適當(dāng)變化,。
1,、把適量的透析液(緩沖液)加入Spectra/Por透析裝置。透析液的體積應(yīng)為樣品體積量的100倍,。(例如:在一升液中透析10毫升的樣品)
2,、裁剪適當(dāng)長度的透析管。預(yù)留一段額外長度(約占總樣品體積量的20%)作為頭部空間,。
3,、釋放安全鎖打開閉合夾。把透析管插入打開的閉合夾,,在約超出閉合夾3-5毫米的位置再夾住,。不要折疊纖維素酯(CE)膜。
4,、由透析管開口端將樣品裝入,。調(diào)整一下頂部空間的長度,夾緊閉合器。
5,、把透析樣品放在合適的透析緩沖液中,。
6、往透析裝置中放入一個干凈的磁性攪拌子,。要確保磁子足夠大能夠攪動整個透析液,但不能大到無法自由旋轉(zhuǎn),。把透析裝置放置在攪拌器上,,調(diào)整到不把樣品拉下旋渦的大速度。
7,、透析要求根據(jù)具體的應(yīng)用要求,。通常情況,允許透析,。在持續(xù)透析的過程中,,至少要進(jìn)行3次全部更換透析液。建議在(透析后)2-4小時,,6-8小時和10-14小時(第2天早晨)更換透析液,。在后一次透析液的更換后要至少繼續(xù)進(jìn)行2小時的透析。
注:對于高濃度污染物,,樣品可能需要較長的時間透析,,透析液需要更頻繁的更換。
8,、抓住超出閉合夾部分的透析管,,打開閉合夾。慢慢倒出透析樣品或用吸管,,注射器把樣品移走,。非常小的樣品也可用24號注射針刺穿透析管吸取樣品。
透析溫度主要取決于樣品,。溫度限制主要取決于膜的類型,。CE可以承受的溫度高達(dá)37℃,RC可以承受的溫度高達(dá)60℃,。
膜的貯存和保質(zhì)期:
干燥的膜要在室溫或4℃儲存在聚乙烯袋中,。未開封的濕膜4℃儲存。一旦變濕,,膜應(yīng)浸泡在下列之一的溶液總:0.05%*,,1%的苯甲酸鈉或1%甲醛。(備注:一旦變潮濕,,不要讓膜干燥,。不斷干燥會造成孔隙借口不可恢復(fù)的倒塌。)
在適當(dāng)?shù)膬Υ鏃l件下,保質(zhì)期為兩年,。為保證濕膜的長保質(zhì)期,,防腐劑溶液應(yīng)當(dāng)定期更換。
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