血液中乙醇濃度的氣相色譜分析

過量飲酒已經(jīng)成為世界公共衛(wèi)生的主要問題，目前我國對(duì)飲酒量檢測(cè)主要通過檢測(cè)血液中的乙醇濃度,。

血液中乙醇濃度的測(cè)定有化學(xué)法,、傳感器法、酶法和氣相色譜法等,，其中氣相色譜法是目前使用較普遍的方法,。本文利用乙醇的易揮發(fā)性，以叔丁醇為內(nèi)標(biāo),，用頂空自動(dòng)進(jìn)樣氣相色譜,，火焰離子化檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)，建立的方法樣品用量少,，操作簡便,，準(zhǔn)確度高，能對(duì)血液中的乙醇進(jìn)行可靠分析,。

１設(shè)備

氣相色譜儀：天津蘭博GC6500氣相色譜儀,，配FID檢測(cè)器，頂空自動(dòng)進(jìn)樣器,。

2 試劑

乙醇,，叔丁醇均為色譜純。

3 分析步驟

3.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

　用移液槍分別取0.10 ml配制成不同濃度的乙醇標(biāo)準(zhǔn)溶液（0.10 mg/ml,、0.20 mg/ml,、0.50 mg/ml、1.00 mg/ml,、2.00 mg/ml,、3.00 mg/ml)加入預(yù)先加有0.50 ml叔丁醇內(nèi)標(biāo)工作液（濃度為0.04 mg/ml)的頂空自動(dòng)進(jìn)樣器樣品瓶內(nèi)，用封蓋器蓋上帶有硅橡膠墊的頂空鉗口蓋,，混勻,，置于頂空自動(dòng)進(jìn)樣器中加熱后測(cè)定,。以乙醇濃度為橫坐標(biāo)，乙醇對(duì)叔丁醇的峰面積比為縱坐標(biāo),，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,。

3.2 樣品分析

用移液槍移取0.10 mL待測(cè)血液樣品于預(yù)先加有0.50 ml叔丁醇內(nèi)標(biāo)工作液（濃度為 0.04 mg/ml)的頂空自動(dòng)進(jìn)樣器樣品瓶內(nèi)，用封蓋器蓋上帶有硅橡膠墊的頂空鉗口蓋,，混勻,，置于頂空自動(dòng)進(jìn)樣器中加熱后測(cè)定。

3.3色譜條件

色譜柱：GDX-102（60目～80目）填充色譜柱(2 m × 3 mm),；

載氣：高純氮?dú)?，流?0.0 ml/min；

氫氣：30 ml/min,；空氣：300 ml/min,；尾吹氣：28 ml/min；

進(jìn)樣器溫度：150℃,；檢測(cè)器溫度：250℃,；

柱溫：70℃；

進(jìn)樣量：1.0 ml,，分流比：5:1,；

頂空條件：樣品瓶溫度70℃，平衡時(shí)間15 min,，進(jìn)樣閥溫度：105℃,，管路溫度110℃。

3.4結(jié)果與討論

在規(guī)定的色譜條件下進(jìn)樣,，以乙醇濃度為橫坐標(biāo),，對(duì)應(yīng)的峰面積為縱坐標(biāo)，繪制工作曲線,。建立的標(biāo)準(zhǔn)曲線為y=1.7092x+0.0468,，r＝0.998。標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖如圖1所示,。

圖1 乙醇和叔丁醇色譜圖

空白血中分別加入不同量的乙醇后制成不同濃度的三份樣品,，以上面的條件每份樣品重復(fù)測(cè)定6次，平均回收率在97.8% ～104.3%之間,，RSD在2.0%以下,，結(jié)果見表1。

表1 回收率與精密度試驗(yàn)結(jié)果（n=6）

4結(jié)論

　　本文建立的自動(dòng)頂空氣相色譜法測(cè)定血液中的乙醇方法,，操作簡便,，準(zhǔn)確度高，能滿足血液中乙醇含量的檢驗(yàn)要求，自動(dòng)化程度高,，分析時(shí)間短,，適合批量樣品檢驗(yàn)需求。