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ELISA檢測(cè)試劑盒檢測(cè)原理

來源:上海市力敏實(shí)業(yè)有限公司   2014年12月31日 14:31  

   臨床測(cè)定技術(shù)的發(fā)展主要在于方法學(xué)的發(fā)展,,而方法學(xué)的發(fā)展依托于試劑生產(chǎn)技術(shù)不斷進(jìn)步更新和型標(biāo)記物的應(yīng)用,。目前,,分子生物學(xué)正在并zui終肯定會(huì)讓我們對(duì)整個(gè)生命科學(xué)有一個(gè)全面而*的認(rèn)識(shí),,其對(duì)免疫測(cè)定技術(shù)發(fā)展的影響也是直接而又有效的,它使我們對(duì)以前一些難以檢測(cè)的生物活性物質(zhì)的測(cè)定變得輕而易舉,,并且大大提高了檢測(cè)的靈敏度和特異性,。

ELISA檢測(cè)試劑盒檢測(cè)原理:

ELISA檢測(cè)試劑盒應(yīng)用定性夾心免疫檢測(cè)技術(shù),用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板條,,這些多肽是中國(guó)型HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很強(qiáng)的肽段,,分別來自于該毒株的開放閱讀框2和開放閱讀框3,。將樣品或標(biāo)準(zhǔn)品加入孔中并孵育,如果其中存在HEV IgM抗體,,這些抗體就會(huì)與HEV 的多肽抗原結(jié)合,,并固定在上面,洗板除去其它非特異性抗體和樣品中的其它成份,。然后加入羊抗人IgM-HRP(辣根過氧化物酶)酶結(jié)合物,,經(jīng)第二次孵育后,酶結(jié)合物就會(huì)與*次孵育結(jié)合上的HEV IgM抗體相結(jié)合,,洗板除去未結(jié)合的酶結(jié)合物,,加入TMB底物溶液,在第三次孵育時(shí)會(huì)發(fā)生酶-底物反應(yīng),,只有那些含有HEV IgM抗體和酶結(jié)合物所形成的復(fù)合物的孔才會(huì)發(fā)生顏色變化,,加入硫酸溶液終止酶和底物間的反應(yīng),并在波長(zhǎng): 450nm處測(cè)量O.D.值,按照本HEV IgM抗體elisa試劑盒的測(cè)試標(biāo)準(zhǔn), O.D.值大于或等于Cut-Off值的樣品被認(rèn)為是初試陽性,。

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