1.

農(nóng)殘?jiān)噭┡渲?/p>

緩沖溶液：

取一包緩沖劑，

加入

500ml

蒸餾水,，

溶解攪拌均勻,，

密閉、

避光,、

陰涼處保存,。

顯色劑：取顯色劑一瓶，加入

15ml

緩沖溶液溶解,，

4

℃冰箱中保存,。

底物：取底物一瓶，加入

15ml

蒸餾水溶解,，

4

℃冰箱中保存,。

乙酰膽堿酯酶：

取乙酰膽堿酯酶一瓶,，

用

3ml

緩沖溶液溶解，

 4

℃冰箱中保

存,。

2.

樣品處理

選取有代表性的蔬菜樣品,，

擦掉樣品表面泥土，

剪成

1cm

見方碎片,，

取樣品

1g

,，放入燒杯或提取瓶中，加入

5ml

緩沖溶液,，振蕩

1min

～

2min

,，倒出提取液，

靜置

3min

～

5min

,，待用,。

注意：

樣品不可用水沖洗，

應(yīng)擦去表面泥土等雜物后取樣,。

為了保證取樣具有代

表性,，

葉菜一般取來自不同植株葉片的葉尖部樣本，

果菜從不同個(gè)體的表皮處取

樣,。

3.

對(duì)照溶液測(cè)試

在提取瓶中加入

2.5ml

緩沖溶液,，再加入

100ul

酶液、

100ul

顯色劑,，搖勻

后于

37℃放置

15

分鐘

(

每批樣品的控制時(shí)間必須一致

)

,。

15

分鐘后再加入

100

μ

L

底物搖勻

,

此時(shí)檢液開始顯色反應(yīng)

,

應(yīng)立即倒入

1cm

比色皿，放入儀器比色池中,，

將儀器調(diào)到測(cè)量界面

,

按操作指示面板按鍵區(qū)的

“對(duì)照”

按鈕,，

儀器開始做對(duì)照。

3

分鐘后儀器自動(dòng)對(duì)照完成,，對(duì)照完成后將對(duì)照樣取出,，保持儀器界面不變。

注意：對(duì)照測(cè)試必須在*通道進(jìn)行,，對(duì)照測(cè)試△

A

應(yīng)＞

0.3

,，若對(duì)照測(cè)試

的結(jié)果小于以上數(shù)值時(shí)，儀器會(huì)自動(dòng)提示“對(duì)照錯(cuò)誤”

,，須重新做對(duì)照,，以保證

測(cè)量結(jié)果的準(zhǔn)確性。

(

對(duì)照測(cè)試△

A<0.3

的原因：一是酶的活性不夠,，二是反應(yīng)

溫度太低,。

)

4.

樣品溶液測(cè)試

另取干凈的提取瓶，放入

2.5ml

樣品提取液,，加入

100ul

酶液,、

100ul

顯色

劑,，搖勻后于

37℃放置

15

分鐘

(

放置的時(shí)間與對(duì)照液放置的時(shí)間必須一致

)

。

15

分鐘后再加入

100

μ

L

底物搖勻

,

此時(shí)檢液開始顯色反應(yīng)

,

應(yīng)立即倒入

1cm

比色皿,，

放入儀器比色池中,，按操作指示面板按鍵區(qū)的“測(cè)量”按鈕開始測(cè)量，

3

分鐘后

儀器測(cè)量完成,，顯示測(cè)量結(jié)果,。結(jié)果以酶被抑制的程度（抑制率）表示,，當(dāng)蔬菜

樣品提取液對(duì)酶的抑制率≥

50%

時(shí),，表示蔬菜中有高劑量有機(jī)磷或氨基甲酸酯類

農(nóng)藥存在，樣品為陽性結(jié)果,，陽性結(jié)果的樣品需要重復(fù)檢驗(yàn)

2

次以上,。

對(duì)陽性結(jié)果的樣品，可用其它方法進(jìn)一步確定具體農(nóng)藥品種和含量,。

5.

說明

蔥,、蒜、蘿卜,、韭菜,、芹菜、香菜,、茭白,、蘑菇及番茄汁液中，含有對(duì)酶有

影響的植物次生物質(zhì),，容易產(chǎn)生假陽性,。處理這類樣品時(shí)，可采取整株（體）蔬

菜浸提,。對(duì)一些含葉綠素較高的蔬菜,，也可采取整株（體）蔬菜浸提的方法，減

少色素的干擾,。