用旋光法測(cè)量粗淀粉的含量
一,、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/span>
1.掌握旋光儀的操作使用。
2.了解旋光法測(cè)粗淀粉的基本原理。
二,、實(shí)驗(yàn)原理
在加熱及稀鹽酸的作用下,淀粉水解并轉(zhuǎn)入鹽酸溶液中,。在一定的水解條件下,,不同谷物淀粉的比旋光度是不同的,。其[α]D20在171~195之間,因此可用旋光法測(cè)定粗淀粉的含量,。
三,、實(shí)驗(yàn)儀器、試劑
1.1%鹽酸溶液:將23.3mL比重為1.19的鹽酸用蒸餾水稀釋至1000mL,,標(biāo)定后的濃度為0.274±0.001mol/L。
2.30%硫酸鋅溶液,。
3.15%亞鐵氰hua鉀溶液,。
4.旋光儀、水浴鍋,、容量瓶(100mL)、錐形瓶(100mL),、分析天平(感重0.01g),、燒杯。
四,、實(shí)驗(yàn)步驟
1.稱取粉碎過40目篩的樣品2.50g(至0.01g)放入200mL燒杯中,沿器壁緩慢加入50mL 1%鹽酸溶液,,并輕輕搖動(dòng)使全部樣品濕潤(rùn),,然后將燒杯放入沸水浴中。在3分鐘內(nèi)使其沸騰,,準(zhǔn)確沸騰15分鐘,立即取出,,迅速冷卻至室溫,。
2.先加入1mL 30%硫酸鋅溶液,,充分混勻后,,再加入1mL亞鐵氰hua鉀溶液,搖勻,,并全部轉(zhuǎn)移至100mL容量瓶中,用少量蒸餾水將錐形瓶沖洗幾次,。若泡沫過多,,加幾滴無水乙醇消泡,用蒸餾水定容至刻度,?;靹蚝筮^濾,,棄取初始濾液15mL,收集其余濾液充分混勻后進(jìn)行旋光測(cè)定,。
五,、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
淀粉含量(%)= | α×100 | ×100 |
[α] D20·L·W |
式中: α——測(cè)得的旋光度。
[α] D20 :淀粉的比旋光度(見表4-1),。
L:旋光管長(zhǎng)度(dm)。
W:樣品重量(g),。
表1 不同糧食淀粉的比旋光度
品 種 | [α] D20 | 品 種 | [α] D20 |
小 麥 | 182.7 | 馬鈴薯 | 195.4 |
黑 麥 | 184.0 | 小 米 | 171.4 |
大 麥 | 181.5 | 蕎 麥 | 179.5 |
水 稻 | 185.9 | 燕 麥 | 181.3 |
玉 米 | 184.6 |
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表2 實(shí)驗(yàn)測(cè)得的旋光度值α
| *次 | 第二次 | 第三次 | 平均值 |
旋光度值α | 8.155 | 8.160 | 8.160 | 8.158 |
[α] D20 =182.7
L=2dm
W=2.5008g
所以
淀粉含量(%)= | 8.158×100 | ×100=89.28% |
182.7×2×2.5008 |
六、實(shí)驗(yàn)說明
1.實(shí)驗(yàn)中,,沸水浴要準(zhǔn)備足量的水,。用定時(shí)鐘準(zhǔn)確記時(shí)。
2.提前打開旋光儀,,使其進(jìn)入穩(wěn)定工作狀態(tài)。
七,、實(shí)驗(yàn)討論
(一)實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析
經(jīng)查資料可知小麥中淀粉含量一般為53%~70%,,而經(jīng)計(jì)算我們組測(cè)得的值為89.28%,結(jié)果偏高,,可能原因有:
(二)實(shí)驗(yàn)方法
1.本實(shí)驗(yàn)采用旋光法測(cè)定淀粉含量,本法適用于不同來源的淀粉,。
(1)優(yōu)點(diǎn):重現(xiàn)性好,、操作簡(jiǎn)便,、快速,由于淀粉的比旋光度大,,直鏈淀粉和支鏈淀粉的比旋光度又很接近,,因此本法對(duì)于可溶性糖類含量不高的谷物樣品具有較高的準(zhǔn)確度,;
(2)缺點(diǎn):蛋白質(zhì)含量較高的樣品,還有一些未知或性質(zhì)不清楚的樣品及淀粉已經(jīng)受熱或變性的樣品,,如高蛋白營(yíng)養(yǎng)米粉,,用旋光法測(cè)定時(shí)誤差較大。
2.淀粉含量測(cè)定的其他方法有:
(1)物理法:[1]相對(duì)密度法
[2]折光法
[3]旋光法
(2)化學(xué)法:[1]還原糖法
[2]碘量法(簡(jiǎn)便快速,、靈敏,、準(zhǔn)確度高)
[3]比色法
注:食品中還原糖,、蔗糖、淀粉和果膠物質(zhì)等的測(cè)定多采用化學(xué)分析法,,但所測(cè)得的多是糖類物質(zhì)的總量,,不能確定糖的組分及每種糖含量。
(3)色譜法,、電泳法:可對(duì)各種糖分進(jìn)行分離和定量,。
(4)酶法:靈敏度高、干擾少,。可測(cè)定葡萄糖,、蔗糖和淀粉等,。
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