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試劑盒檢測原理

來源:上海博耀生物科技有限公司   2014年11月17日 17:11  

   ELISA檢測試劑盒是用于體外定性檢測人血清或血漿中的抗人類戊型肝炎(HEV)病毒 IgM 抗體ELISA檢測。

試劑盒檢測原理:

    ELISA檢測試劑盒應用定性夾心免疫檢測技術,,用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板條,,這些多肽是中國型HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很強的肽段,分別來自于該毒株的開放閱讀框2和開放閱讀框3,。將樣品或標準品加入孔中并孵育,,如果其中存在HEV IgM抗體,這些抗體就會與HEV 的多肽抗原結(jié)合,,并固定在上面,,洗板除去其它非特異性抗體和樣品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP(辣根過氧化物酶)酶結(jié)合物,,經(jīng)第二次孵育后,,酶結(jié)合物就會與*次孵育結(jié)合上的HEV IgM抗體相結(jié)合,,洗板除去未結(jié)合的酶結(jié)合物,,加入TMB底物溶液,在第三次孵育時會發(fā)生酶-底物反應,,只有那些含有HEV IgM抗體和酶結(jié)合物所形成的復合物的孔才會發(fā)生顏色變化,,加入硫酸溶液終止酶和底物間的反應,,并在波長: 450nm處測量O.D.值,按照本HEV IgM抗體elisa試劑盒的測試標準, O.D.值大于或等于Cut-Off值的樣品被認為是初試陽性。

試劑盒試驗原理

    試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知濃度的標準品,、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測,。先將生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,,加入親和素標記過的HRP,。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,,然后加入底物A,、B,和酶結(jié)合物同時作用,。產(chǎn)生顏色,。顏色的深淺和樣品中的濃度呈比例關系。

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