引言 
抗氧化劑即為防止或延緩飼料中某些活性成分發(fā)生氧化
變質(zhì)而添加于飼料中的制劑,。主要用于含有高脂肪的飼
料，以防止脂肪氧化酸敗變質(zhì),，也常用于含維生素的預(yù)
混料中,，它可防止維生素的氧化失效。我國(guó)《食品添加
劑使用衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》（GB2760—1996）中規(guī)定：丁基羥基茴
香醚可用于食用油脂,、油炸食品,、干魚(yú)制品、餅干,、方
便面,、速煮米、果仁罐頭、腌臘肉制品,、早餐谷類(lèi)食品,，
其zui大使用量為 0.2g/kg。丁基羥基茴香醚與二丁基羥基
甲苯,、沒(méi)食子酸丙酯混合使用時(shí),，其中丁基羥基茴香醚
與二丁基羥基甲苯總量不得超過(guò) 0.1 g/kg，沒(méi)食子酸丙酯
不得超過(guò) 0.05 g/kg（使用量均以脂肪計(jì)）,。此外也可用
于膠姆糖配料,。目前飼料中的抗氧化劑的測(cè)定方法主要有液相色譜
法 [1]、氣相色譜法 [2] 等,。相關(guān)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)方法為 GB/T 17814-
2011 飼料中丁基羥基茴香醚（BHA）,、二丁基羥基甲苯
（BHT）、乙氧喹 (EQ) 和沒(méi)食子酸丙酯（PG）的測(cè)定,。由
于沒(méi)食子酸丙酯的化學(xué)性質(zhì)決定了該物質(zhì)不適用于氣相
色譜法測(cè)定,，故該標(biāo)準(zhǔn)中未將 PG 列入氣相色譜法的檢測(cè)
項(xiàng)目中。本方法依據(jù)該標(biāo)準(zhǔn)方法,，開(kāi)發(fā)了飼料中的三種
抗氧化劑的同時(shí)測(cè)定的方法，對(duì)前處理方法做了少許改
動(dòng),，以增強(qiáng)該方法的適用性,。

儀器
Trace1310氣相色譜儀，配FID檢測(cè)器（Thermo Scientific）,；
AS1310 自動(dòng)進(jìn)樣器（Thermo Scientific）
離心機(jī),、天平、漩渦混合器（Thermo Scientific）
耗材
色譜柱：TG-5MS（30 m×0.25 mm×0.25 μm）（Thermo 
Scientific, PN 26098-1420）
C18 吸附劑：40-60 µm,。（Thermo Scientific）
試劑與標(biāo)準(zhǔn)品
丁基羥基茴香醚,、二丁基羥基甲苯、乙氧喹標(biāo)準(zhǔn)品：含
量≥ 99%,；
乙腈,、正己烷：色譜純 (Thermofisher)；氯化鈉,，分析純
標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備
儲(chǔ)備液：準(zhǔn)確稱(chēng)取 10.0mg 丁基羥基茴香醚,、二丁基羥基
甲苯、乙氧喹標(biāo)準(zhǔn)品,，分別用正己烷溶解稀釋并定容至
10mL,，得到 1000mg/L 標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，儲(chǔ)存在冰箱中備用,。

標(biāo)準(zhǔn)中間液：上述儲(chǔ)備液分別移取 1mL,，用正己烷稀釋
定容至 100mL，得濃度為 10mg/L 的混合標(biāo)準(zhǔn)中間液。
樣品前處理
準(zhǔn)確稱(chēng)取粉碎后的飼料樣品 1.0g,，加 7mL 水浸泡,，再加
10mL 乙腈和 1.0gNaCl，振蕩提取 3min,，然后以 10000rpm
的速度冷凍離心,，離心后取上清液 2mL 加 C18 吸附劑和
無(wú)水硫酸鎂各100mg，振蕩后過(guò)0.22µm濾膜后上機(jī)分析,。
實(shí)驗(yàn)條件
色譜柱：TG-5MS（30 m×0.25 mm×0.25 μm）,；
柱溫：50℃（1 min），20℃ /min 到 250℃（5 min）,；
進(jìn)樣模式：分流進(jìn)樣,，分流比：20:1，進(jìn)樣量：1 µL,；進(jìn)樣口溫度：250℃,；
載氣：高純氮?dú)猓?9.999%），恒流模式,，1.2 mL/min,；
檢測(cè)器溫度：250℃，氫氣 35mL/min,，空氣 350mL/min,，尾
吹氣氮?dú)?40mL/min。
結(jié)果與討論
色譜柱的選擇：分別用極性不同的 TG-WAX（30 m
×0.25 mm×0.25 μm）和 TG-5（30 m×0.25 mm×0.25 μm）
兩根色譜柱對(duì)所測(cè)三種物質(zhì)進(jìn)行分離,，結(jié)果表明 TG-WAX
柱對(duì) BHA 和 EQ 的分離效果較差,，不能達(dá)到基線分離，而
TG-5 色譜柱對(duì)三種物質(zhì)能夠達(dá)到有效分離（見(jiàn)圖 1）,。所
以選用TG-5色譜柱作為本實(shí)驗(yàn)中使用的色譜柱,。

提取溶劑的選擇：分別用極性溶劑（乙腈）和非極性溶
劑（正己烷）來(lái)提取飼料中的抗氧化劑，比較提取的效率,。
結(jié)果表明,，乙腈對(duì)這三種抗氧化劑的提取效率要高于正
己烷的提取，提取液進(jìn)樣用氣相色譜儀分析（圖 2）,，可
看出,，正己烷提取液含雜質(zhì)也較多，對(duì)分析物的測(cè)定有
一定干擾,，而乙腈提取液相對(duì)潔凈,。因此在本實(shí)驗(yàn)中選
取乙腈為提取溶劑。凈化方法的選擇：按照標(biāo)準(zhǔn)方法中,，提取液過(guò)弗羅里硅
土柱凈化,，二氯甲烷-丙酮混合溶劑洗脫，BHT回收率極低。
考慮到乙腈提取液雜質(zhì)并不多,，因此放棄固相萃取小柱
凈化的方法,，采用分散固相萃取的方法凈化，向提取液
中加入C18吸附劑振蕩除雜,，操作簡(jiǎn)單,，目標(biāo)物無(wú)損失。

線性關(guān)系及測(cè)定低限：準(zhǔn)確移取適量抗氧化劑混合標(biāo)準(zhǔn)
中間液,，分別用正己烷稀釋配制得到濃度為0.1,、0.5、1,、2,、
5 mg/L 的標(biāo)準(zhǔn)工作液，供氣相色譜質(zhì)譜測(cè)定,。以測(cè)定峰面
積為縱坐標(biāo),，對(duì)應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)
曲線如圖 3,。方法檢出限以 3 倍信噪比計(jì)算得到,，本方法
測(cè)定飼料中的 3 種抗氧化劑的檢出限為1mg/kg。

回收率及精密度實(shí)驗(yàn)：用標(biāo)準(zhǔn)添加法,，在飼料樣品中,，添
加抗氧化劑混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，做加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn),，按上述方法
進(jìn)行提取、凈化和測(cè)定,，飼料樣品添加濃度為 3mg/kg 和
30mg/kg兩個(gè)水平,，各做3個(gè)平行，樣品,、添加譜圖見(jiàn)圖4,，
結(jié)果見(jiàn)表 1。

結(jié)論
飼料中的抗氧化劑經(jīng)乙腈提取,，分散固相萃取的方法
凈化,，采用賽默飛世爾新型氣相色譜儀進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)
果表明該方法操作簡(jiǎn)單,，提取效率高,，回收率和重現(xiàn)
性均能滿(mǎn)足實(shí)驗(yàn)室日常檢測(cè)的要求。