色氨酸檢測(cè)方法

一,、標(biāo)準(zhǔn)溶液的配置

　　準(zhǔn)確稱(chēng)取色氨酸標(biāo)準(zhǔn)樣品0.0204g,，用0.1mol/L氫氧化鈉水溶解并定容至50mL,，則色氨酸濃度為2μmol/mL,，即20.42mg/100mL,。

二,、5mol/L的氫氧化鈉的配置方法：

　　準(zhǔn)確稱(chēng)取200g氫氧化鈉,，用水溶解并定容至1L,。

二,、前處理方法

1、水解：準(zhǔn)確稱(chēng)量0.3-0.5g樣品于水解管中,，加入5mol/L氫氧化鈉10mL,，放置30分鐘以上后再封口，放入145℃烘箱中4小時(shí),，取出放涼后,，直接用漏斗轉(zhuǎn)入50mL容量瓶中，用6mol/L鹽酸中和到中性,，用水定容,，取適量過(guò)0.45μm的濾膜用于衍生。

2,、衍生：a,、準(zhǔn)確吸取10ul過(guò)濾好的樣液注入小試管中。

         b,、將小試管放入真空瓶中,，在真空泵上抽濾20分鐘，抽濾好后用鑷子取出小試管,，看小試管中還有沒(méi)有未抽干的樣液,。

         c、往抽干的小試管中注入20ul衍生緩沖液放在混勻器上混勻2分鐘,，混勻好后再在小試管中注入20ul衍生試劑,，再放在混勻器上混勻2分鐘。

         d,、用封口膠將混勻好的小試管封口,。（封口時(shí)要注意不能有漏的地方）。

         e,、將封好口的小試管放入60℃的烘箱里烘30分鐘,。

         f,、將烘好的小試管上的封口膠取掉，用移液槍準(zhǔn)確移取160ul的平衡緩沖液注入小試管中,，在混勻器上混勻2分鐘就可以進(jìn)樣了,。

注意事項(xiàng)：

1、 樣品加完氫氧化鈉后,，要放置30分鐘以上再封口,，防止在烘箱中進(jìn)行水解反應(yīng)時(shí)爆炸。

2,、 從水解管中轉(zhuǎn)入容量瓶時(shí),，直接轉(zhuǎn)移，不用濾紙過(guò)濾,，因?yàn)閴A對(duì)濾紙有腐蝕性,。

3、 注意檢查小試管有沒(méi)有抽干時(shí)一定不要倒置,，防止有為抽干的樣液損失,。

4、 封口時(shí)一定要封嚴(yán),。

除氨基酸分析方法包外海需要如下：

需要準(zhǔn)備的試劑：

色氨酸標(biāo)準(zhǔn)品,，氫氧化鈉，鹽酸

需要準(zhǔn)備的耗材：

0.45μm的濾膜,，50mL容量瓶,，移液器槍頭200ul，封口膜,，

需要的儀器：

天平,，烘箱，移液器200ul