色氨酸檢測方法

一,、標(biāo)準(zhǔn)溶液的配置

　　準(zhǔn)確稱取色氨酸標(biāo)準(zhǔn)樣品0.0204g，用0.1mol/L氫氧化鈉水溶解并定容至50mL,，則色氨酸濃度為2μmol/mL,，即20.42mg/100mL。

二,、5mol/L的氫氧化鈉的配置方法：

　　準(zhǔn)確稱取200g氫氧化鈉,，用水溶解并定容至1L。

二,、前處理方法

1,、水解：準(zhǔn)確稱量0.3-0.5g樣品于水解管中，加入5mol/L氫氧化鈉10mL,，放置30分鐘以上后再封口,，放入145℃烘箱中4小時(shí)，取出放涼后，直接用漏斗轉(zhuǎn)入50mL容量瓶中,，用6mol/L鹽酸中和到中性,，用水定容，取適量過0.45μm的濾膜用于衍生,。

2,、衍生：a、準(zhǔn)確吸取10ul過濾好的樣液注入小試管中,。

         b,、將小試管放入真空瓶中，在真空泵上抽濾20分鐘,，抽濾好后用鑷子取出小試管,，看小試管中還有沒有未抽干的樣液。

         c,、往抽干的小試管中注入20ul衍生緩沖液放在混勻器上混勻2分鐘,，混勻好后再在小試管中注入20ul衍生試劑，再放在混勻器上混勻2分鐘,。

         d,、用封口膠將混勻好的小試管封口。（封口時(shí)要注意不能有漏的地方）,。

         e,、將封好口的小試管放入60℃的烘箱里烘30分鐘。

         f,、將烘好的小試管上的封口膠取掉,，用移液槍準(zhǔn)確移取160ul的平衡緩沖液注入小試管中，在混勻器上混勻2分鐘就可以進(jìn)樣了,。

注意事項(xiàng)：

1,、 樣品加完氫氧化鈉后，要放置30分鐘以上再封口,，防止在烘箱中進(jìn)行水解反應(yīng)時(shí)爆炸,。

2、 從水解管中轉(zhuǎn)入容量瓶時(shí),，直接轉(zhuǎn)移,，不用濾紙過濾，因?yàn)閴A對(duì)濾紙有腐蝕性,。

3,、 注意檢查小試管有沒有抽干時(shí)一定不要倒置，防止有為抽干的樣液損失,。

4,、 封口時(shí)一定要封嚴(yán),。

除氨基酸分析方法包外海需要如下：

需要準(zhǔn)備的試劑：

色氨酸標(biāo)準(zhǔn)品，氫氧化鈉,，鹽酸

需要準(zhǔn)備的耗材：

0.45μm的濾膜,，50mL容量瓶，移液器槍頭200ul,，封口膜,，

需要的儀器：

天平，烘箱,，移液器200ul