sigma弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑說(shuō)明書(shū)
一,、定義:
弗氏佐劑(Freundadjuvant),這是目前zui常用于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的佐劑,,它是將抗原水溶液與油劑(石蠟油或植物油)等量混合,再加乳化劑(羊毛脂或葉吐溫80)制成油包水抗原乳劑,,稱之為不*弗氏佐劑,。如在不*佐劑中加入分枝桿菌(如死卡苗)則稱為*弗氏佐劑。
二,、制備方法:
弗氏佐劑是現(xiàn)在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中zui常用的佐劑,,分為不*弗氏佐劑和*弗氏佐劑。不*弗氏佐劑是液體石蠟與羊毛脂混合而成,,組分比為1~5:1,可根據(jù)需要而定,,通常為2:1,。不*佐劑中加卡介苗(zui終濃度為2~20mg/ml)或死的結(jié)核分枝桿菌,即為*弗氏佐劑(FCA),。一般注射時(shí)用1/2體積FCA加上1/2體積的抗原進(jìn)行乳化,,第二次或第三次注射時(shí)用不*佐劑或不用佐劑。如不加佐劑,,則抗原量增大10-20倍,。
配制方法:按比例將羊毛脂與石蠟油置容器內(nèi),用超聲波使之混勻,,高壓滅菌,,置4℃下保存?zhèn)溆谩?br />
在免疫動(dòng)物前,先將弗氏佐劑與抗原按一定比例混合,,佐劑和抗原體積比一般為1:1,,制備成"油包水"乳狀液。因?yàn)楹琒DS很易促使其乳化成油包水抗原乳化復(fù)合物,,注射入動(dòng)物體內(nèi)時(shí)一定要保持乳化狀態(tài),。抗原用量視抗原分子量不同及免疫原性及免疫動(dòng)物不同而有一定差異,,無(wú)統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)和固定模式,。一般是每兔(約2kg重)或每羊(約20kg重)第1次注射抗原1mg,以后逐次增加抗原量,,zui多每次不超過(guò)3mg,。佐劑與抗原乳化可按如下方法進(jìn)行:
(1)研磨法:先將佐劑加熱并取適量放入無(wú)菌的玻璃研缽內(nèi),待冷卻后再緩緩滴入等體積的抗原溶液,,邊滴邊按同一方向研磨,,滴加抗原的速度要慢。待抗原全部加入后,繼續(xù)研磨一段時(shí)間,,使之成為乳白色粘稠的油包水乳劑,。本法適于制備大量的佐劑抗原,缺點(diǎn)是研缽壁上粘附大量乳劑,,抗原損失較大,。
(2)注射器混合法:將等量的弗氏佐劑和抗原溶液分別吸入兩個(gè)注射器內(nèi),兩注射器之間以一細(xì)膠管相連,,注意排凈空氣,,然后交替推動(dòng)針管,直至形成粘稠的乳劑為止,。本法優(yōu)點(diǎn)是容易做到無(wú)菌操作,,抗原損失少,適用于制備少量的抗原乳劑,。但同時(shí)難以乳化*,,個(gè)別抗原,用塑料注射器根本推不動(dòng),,而用玻璃注射器又有滲漏,。制備好的乳化劑經(jīng)鑒定才能適用。鑒定方法是將乳化劑滴入冷水中,,若保持完整不分散,,成滴狀浮于水面,即乳化*,,為合格的油包水劑,。
(3) 超聲:實(shí)驗(yàn)室條件好點(diǎn)的,比如說(shuō)有超聲破碎儀的,,一定要控制超聲頻率和時(shí)間,,超聲容易激發(fā)一些自由基,對(duì)抗原有未知損害,。乳化方法要根據(jù)抗原和需要而定,。
三、其他免疫佐劑的物質(zhì)
弗氏佐劑也屬于免疫佐劑,。其他免疫佐劑的物質(zhì)有:①微生物及其產(chǎn)物,,常用的微生物有分枝桿菌、短小棒狀桿菌,、百日咳桿菌以及處左蘭氏陰性桿菌的提取物脂多糖,,自分枝桿菌的提取物質(zhì)胞壁酰二肽等。②多聚核苷酸,,如多聚肌苷酸:胞苷酸(poly1:C),多聚腺苷酸(poly1:A:μ)等;,。③無(wú)機(jī)物,如明礬及氫化鋁等。
佐劑的作用機(jī)制尚不*清楚:①它可能增加抗原的表面面積,,易為巨噬細(xì)胞所吞噬,;②延長(zhǎng)抗原在體內(nèi)的存留期,增加與免疫細(xì)胞接觸的機(jī)遇,;③誘發(fā)抗原注射部位及其局部淋巴結(jié)的炎癥反應(yīng),,有利于刺激免疫細(xì)胞的增殖作用。
四,、區(qū)別:
弗氏不*佐劑
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:弗氏*佐劑是一種油包水的乳濁液,,含結(jié)核分枝桿菌的細(xì)胞壁成分。佐劑活性來(lái)自于油滴中免疫原的持續(xù)釋放,,并刺激局部免疫反應(yīng),。弗氏不*佐劑用于初次免疫刺激。為了減少副作用,,不含結(jié)核分枝桿菌成分的弗氏不*佐劑用于加強(qiáng)免疫,。
弗氏*佐劑
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:弗氏*佐劑是一種油包水的乳濁液,能夠非常有效的誘導(dǎo)產(chǎn)生高滴度的抗體,。弗氏*佐劑含結(jié)核分枝桿菌的細(xì)胞壁成分,可以加強(qiáng)對(duì)抗原的抗體反應(yīng),。佐劑活性來(lái)自于油滴中免疫原的持續(xù)釋放,,并刺激局部免疫反應(yīng)。
五,、儲(chǔ)存:
儲(chǔ)存在低溫,,通風(fēng)的區(qū)域。
相關(guān)產(chǎn)品
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