光學顯微鏡是一個精密儀器,,大家平時在使用的適合可能會問到一些關于顯微鏡的調試或保養(yǎng)的一個方法,今天為大家?guī)砀@?,完整的介紹下我們使用顯微鏡的一些調試方法和注意的事項。
光學顯微鏡的調試方法:
一:照明光源燈室在顯微外的初步調整
① 首先將燈室的外殼打開,,壓彈簧夾子將鹵素燈泡裝入插座中,,安裝時避免手指直接接觸燈泡(可用柔軟的布或紙隔住),,以免燈泡上留有指紋等臟物,,影響燈泡的使用壽命。
②把燈室擺在桌面上,,接通電源后,,用的螺絲刀調節(jié)燈的調焦旋鈕孔(標有“←→”),使燈絲投影在1-2m外的墻上,,將燈絲成像調至清晰,;然后調節(jié)燈的高低位置調節(jié)絲孔(標有“──”),使燈絲位置高低適當,;再調節(jié)燈的左右位置調節(jié)螺絲孔(標有“──”),,使燈絲左右位置合適,。
二:光源發(fā)光體(燈絲)在顯微鏡內位置的檢驗和校正 目的是為了把發(fā)光體的像端端正正地調入物鏡的視域范圍內,從光源的角度去確保顯微鏡的視域受到充分而均勻的照明,,這是調整庫勒照明系統(tǒng)的前提條件,。需要的基本工具:對中望遠鏡購置顯微鏡時已配備。
① 拔掉燈庫內的毛玻璃套筒,,把燈室裝回顯微鏡上
②選用10×物鏡,,開亮光源程序找樣品并調焦清晰,再換用40×物鏡把樣品調焦清晰(40×物鏡可以看清燈絲的全貌),;
③把聚光鏡的孔徑光闌和視場光闌均開到zui大,;
④拔掉其中一個目鏡,換上對中望遠鏡,,抓住白色部分,,另一手伸縮黑色接目鏡,就可在視野中看到燈絲像,;
⑤如燈絲位置不合適,,調“──”孔,把燈絲像沿水平方向調好,,調“──”孔,,把絲像沿垂直方向調好,直至將燈絲像調至剛好充滿物鏡孔徑的光圓像,;
⑥調整完畢后,,將毛玻璃套筒插回原位,拔掉對中望遠鏡,,換回目鏡作下一步調整,。以上所述照明光源燈室在顯微鏡外的調整和光源發(fā)光體在顯微鏡內位置的校驗,只需在顯微鏡初次安裝調試及更換燈泡時進行,,平時使用顯微鏡時不能隨意亂調亂動,。萬一調亂時,可按上述步驟調回原狀,。
三:庫勒照明(Kohler)系統(tǒng)的正確調整 顯微鏡的正確調試,,主要工作之一是照明光路系統(tǒng)的調整,而其中的關鍵是庫勒照明系統(tǒng)的調整,。對于每一位使用顯微鏡的人員,,特別是作顯微照像的人員來說,應該對庫勒照明系統(tǒng)的原理及其調整步驟有一定的了解和掌握,,才能充分發(fā)揮顯微鏡應有的功能,,拍出來的照片才能在效果上比較一致而又完善。庫勒照明系統(tǒng)的原理簡單來說就是:光源發(fā)光體上任意一點發(fā)出的光,,可以照明顯微鏡的視域范圍,,而光源發(fā)光體上每一點所發(fā)出的光匯集起來,,在顯微鏡的視域中就實現(xiàn)了非常充分而又均勻的照明。調整庫勒照明系統(tǒng)的目的,,是為了使所觀察的視域能獲得均勻而又充分的照明,防止雜散光對照像系統(tǒng)造成影響或干擾,,以免照像時在底片形成灰霧,。高調整庫勒照明系統(tǒng)的必要部件:視場光闌、可進行合軸調整的聚光鏡系統(tǒng),。
① 選用10×物鏡和10×目鏡
② 把聚光鏡前端透鏡擺進光路中,,孔徑光闌調至適中的位置上(不大不小),,再把聚光鏡升到zui頂?shù)奈恢蒙?,聚光鏡轉盤調至明視野“J”位置
③ 把視場光闌調至zui小(0.1)
④ 載物臺上放上已封片的生物樣品,,開亮光源,,調焦清晰
⑤ 視域中會出現(xiàn)一個局部照明的區(qū)域或亮斑,這是視場光闌的模糊像,,在其中可以清晰地看到樣品的細節(jié),;在它之外是較暗的視域,不一定能把樣品的細節(jié)看得清楚
⑥把聚光鏡微微地向下調,,使視野中的亮斑逐漸收小,,慢慢變成一個清晰的多邊形象,這便是視場光闌的清晰像,;
⑦一般情況下,,多邊形象并不在視域*,需要調整聚光鏡的一對調中螺絲,,把視場光闌多邊形的像調至*位置,;
⑧逐漸開大視場光闌,使多邊形象成為視域的內接多邊形,,進一步核對調中的狀況,,如對中不夠理想,繼續(xù)微微調對中螺絲,;
⑨將視場光闌稍為再微微開大一些,,使它的多邊形象恰好消失在視域的邊緣上,至此,,庫勒照明系統(tǒng)調整完畢,。庫勒照明系統(tǒng)調整好以后,整個視域照明均勻,,拍攝的顯微照片明亮清晰,,反差正常,。在日后使用過程中應特別注意: a. 視場光闌不可任意開大,但可隨物鏡倍數(shù)的增大而將視場光闌收小,,隨物鏡倍數(shù)的減小而開大,; b. 聚光鏡的高低位置不準亂調,否則會破壞已調整好的庫勒照明系統(tǒng),; c. 使用10×以下物鏡時要將聚光鏡前端透鏡擺出光路外,,使用10×或10×以上物鏡時要將前端透鏡擺入光路中; d. 關于物鏡倍數(shù)與視場光闌大小配合問題,,在實際使用過程中,,作為一般觀察不一定要收小或開大視場光闌,但作顯微照相時,,為了避免雜散光線對照相系統(tǒng)的干擾,,以便能拍攝到較完善的照片,則應在使用每一個倍數(shù)的物鏡時,,把視場光闌調節(jié)到正好消失于所觀察的視域邊上,,這是比較繁復的工作,但又非做不可,。較為簡便的方法是把與各個倍數(shù)物鏡相對應的視場光闌事先調整好,,并作好記號,以后使用時根據(jù)記號直接調至相應的位置,。
光學顯微鏡的保養(yǎng)方法:
一:顯微鏡的保存在干燥,、清潔的環(huán)境中,避免灰塵以及化學品玷污,。
二:取送顯微鏡時一定要一手握住彎臂,,另一手托住底座。顯微鏡不能傾斜,,以免目鏡從鏡筒 上端滑 出,。取送顯微鏡時要輕拿輕放。
三:觀察時,,不能隨便移動顯微鏡的位置,。
四:不得任意拆卸顯微鏡上的零件,嚴禁隨意拆卸物鏡鏡頭,,以免損傷轉換器螺口,,或螺口松 動后使低高倍物鏡轉換時不齊焦。
五:保持顯微鏡的干燥,、清潔,,避免灰塵、水及化學試劑的玷污,。
六:轉換物鏡鏡頭時,,不要搬動物鏡鏡頭,,只能轉動轉換器。
七:切勿隨意轉動調焦手輪,。使用微動調焦旋鈕時,,用力要輕,轉動要慢,,轉不動時不要硬 轉,。
八:凡是顯微鏡的光學部分,只能用特殊的擦鏡頭紙擦拭,,不能亂用他物擦拭,更不能用手指 觸摸透 鏡,,以免汗液玷污透鏡,。
九:使用高倍物鏡時,勿用粗動調焦手輪調節(jié)焦距,,以免移動距離過大,,損傷物鏡和玻片。
十:用畢送還前,,必須檢查物鏡鏡頭上是否沾有水或試劑,,如有則要擦拭干凈,并且要把載物 臺擦拭 干凈,,然后將顯微鏡放人箱內,,并注意鎖箱。
十一:必須熟練掌握并嚴格執(zhí)行使用規(guī)程,按照嚴格的流程和說明書來操作顯微鏡,。
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