生物顯微鏡和體視顯微鏡的使用對于一名生物醫(yī)學(xué)工作者來說,電子顯微鏡是我們當(dāng)今進(jìn)行理論及臨床研究中*的重要工具.為了充分發(fā)揮它的功效,,必須學(xué)會(huì)正確使用.除了掌握必要的電鏡基本知識以外,,在工作中還應(yīng)注意下列環(huán)節(jié)。
1.保證透射電鏡各部分的對中
所謂對中的標(biāo)準(zhǔn)就是要做到:
(一)當(dāng)放大倍數(shù)改變時(shí),,視場的中心不會(huì)丟失;
(二)當(dāng)改變物樣上的照明條件時(shí),照明束不會(huì)失去均勻性或偏離中心;
(三)對圖像進(jìn)行調(diào)焦時(shí),它不致偏離中J心;
(四)當(dāng)功能開關(guān)從一種模式轉(zhuǎn)換到另一種模式時(shí),,生物顯微鏡和體視顯微鏡的使用物樣上的照明情況不受影響。要保證以上各點(diǎn),,首先電鏡本身的設(shè)計(jì)制造當(dāng)然應(yīng)該是精良的,。生物顯微鏡和體視顯微鏡的使用其次對用戶來說,在每次使用前必須將儀器調(diào)整到*狀況,。
電鏡的對中包括:
*,電子槍,、聚光鏡以及中間鏡、投影鏡等相對于物鏡的對中,。因?yàn)橐慌_(tái)電鏡出廠時(shí)已保證物鏡光軸與電鏡的機(jī)械軸*重合,,所以可把物鏡作為對中時(shí)的參考標(biāo)準(zhǔn)。
第二,,電鏡各級配備的電子束偏轉(zhuǎn)系統(tǒng)要對中合軸,。
第三,各級可動(dòng)光闌(包括聚光鏡,、物鏡,、中間鏡的光闌)也要對中。誠然,,生物顯微鏡和體視顯微鏡的使用一般情況下各實(shí)驗(yàn)室都有專門技術(shù)人員負(fù)責(zé)對電鏡的基本調(diào)整,,以提供必要的工作條件.但是在使用過程中,有些對中情況不可避免地會(huì)遭到破壞或改變,,因此研究人員必須能及時(shí)發(fā)現(xiàn)問題,,生物顯微鏡和體視顯微鏡的使用并學(xué)會(huì)隨時(shí)加以調(diào)整。
2.特別重視各級透鏡尤其是物鏡的消像散
用低放大倍數(shù)檢查射到熒光屏的光斑時(shí),,如發(fā)現(xiàn)光斑偏離圓形,。這說明存在聚光鏡的像散.在高放大倍數(shù)時(shí)它會(huì)導(dǎo)致zui大亮度的損失,并形成不對稱的照明孔徑角而影響成像質(zhì)量因此在調(diào)對中的同時(shí),,應(yīng)該對聚光鏡消像散.
用低放大倍數(shù)檢查射到熒光屏的光斑時(shí),,如發(fā)現(xiàn)光斑偏離圓形。這說明存在聚光鏡的像散.在高放大倍數(shù)時(shí)它會(huì)導(dǎo)致zui大亮度的損失,,生物顯微鏡和體視顯微鏡的使用并形成不對稱的照明孔徑角而影響成像質(zhì)童,。因此在調(diào)對中的同時(shí),應(yīng)該對聚光鏡消像散.
物鏡的消像散更為重要,。尼康顯微鏡由于像散的存在,,不僅不能得到清晰的圖像,,而且在高放大倍數(shù)的圖像中往往會(huì)出現(xiàn)一些細(xì)節(jié)假象。消像散的有效方法是在樣品支持膜上找到一個(gè)小孔,,先將物鏡調(diào)于小量過焦?fàn)顟B(tài),,生物顯微鏡和體視顯微鏡的使用再調(diào)節(jié)消像散器使膜孔周圍出現(xiàn)的黑邊達(dá)到處處寬度均勻。zui后再將物鏡調(diào)回至正聚焦.從事高分辨工作的科技工作者必須自己學(xué)會(huì)消像散,。
3.學(xué)會(huì)正確選擇各項(xiàng)工作參盈和工作模式:
電鏡中有許多參t是可供選擇的,,例如電子槍的加速電壓、聚光鏡決定的基本束斑尺度,、各級透鏡的可動(dòng)光闌孔徑等.電鏡工作者可根據(jù)實(shí)驗(yàn)樣品的厚度,、化學(xué)組成、原始襯度特性以及耐幅照程度等自由選用上述各物理量,。
電鏡本身還可用于不同工作模式,,如常規(guī)成像、低倍查樣,、選區(qū)成像,、選區(qū)衍射及高分辨衍射等。如果加上X射線能譜儀,、電子能量損失譜儀,、掃描顯示單元等附件,,則它的工作模式將更多,。使用者可根據(jù)自己的工作目的和要求加以選用,可兼而用之,,也可在工作的不同階段重點(diǎn)使用不同模式,。當(dāng)代電鏡的重要特點(diǎn)就在于其多功能性,它集形態(tài),、光密顯微鏡結(jié)構(gòu)和成分等分析于一體,。因此我們應(yīng)該密切注意科學(xué)技術(shù)發(fā)展的新趨勢,斷拓寬自己的科技視野,,充分利用當(dāng)代各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)方法,。
4.認(rèn)真對待圖像記錄工作,力求能有高質(zhì)量的圖片到手:
可以說電鏡工作的成果幾乎全部體現(xiàn)在所獲得的圖片上.因此在保證顯微鏡價(jià)格*工作條件的前提下,,電鏡工作者要十分重視圖像的拍攝,,包括調(diào)焦、選擇放大倍數(shù),、調(diào)節(jié)襯度和曝光量等,,還要防止照相過程中可能遇到的機(jī)械振動(dòng)和樣品漂移等。筆者認(rèn)為電鏡工作者應(yīng)該親自從事底片的沖擴(kuò),,以保證獲得應(yīng)有的實(shí)驗(yàn)成果,。
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