1,、原理與應(yīng)用

結(jié)核分枝桿菌對苯胺染料一般不易著色,，若加溫或延長染色時(shí)間使其著色后,，再用3%鹽酸酒精處理也不易脫色，經(jīng)此染色后,，結(jié)核分枝桿菌及其他分枝桿菌呈紅色,，而非抗酸菌和細(xì)胞雜質(zhì)等呈藍(lán)色。

2,、材料

(1)結(jié)核病人痰

(2)抗酸染色液

(3)玻片,、片夾、濾紙片,、竹簽,、空平皿、污物盆,。

3,、方法

(1)取潔凈的竹簽沾取痰中血絲或膿性痰，在清潔無油脂玻片上涂開,。涂抹區(qū)約拇指蓋大,。用過的竹簽放到空平皿內(nèi)待高壓滅菌,。

(2)涂片自然干燥后，用片夾挾住玻片一端,，通過火焰固定,。

(3)涂抹面用濾紙片蓋上，然后往濾紙片上滴加石炭酸復(fù)紅染液,，使濾紙片*被染液浸濕,，持玻片在小火上加溫片刻然后離開火焰，此時(shí)可見到玻片上冒出蒸氣,。待蒸氣消失后再加溫,，如此反復(fù)3～4次,，約5min,，加溫時(shí)隨時(shí)添加染液勿使紙片干涸。

(4)玻片冷卻后,，用接種環(huán)挑去濾紙扔到污物盆內(nèi),，流水沖洗玻片。

(5)滴加3%鹽酸酒精脫色,，至涂抹均勻部位基本沒有紅色再脫下為止,，水洗。

(6)滴加呂氏美藍(lán)染液30sec,，水洗,。

(7)吸干、鏡檢,。

4,、溶液配制

萋－尼(Zichl-Neelsen)抗酸染色液

(1)石炭酸復(fù)紅液：鹼性復(fù)紅4g，溶于95%酒精100ml,，作成飽和溶液,，再取該飽和液10ml與5%石炭酸溶液90ml混勻即成。

(2)3%鹽酸酒精液,。

濃鹽酸3ml加入95%酒精97ml中即成,。

(3)呂(Loeffer)氏美藍(lán)染色液

美藍(lán)2g，溶于95%酒精100ml中,，作成飽和液,。再取該飽和液30ml與0.01%氫氧化鉀水溶液100ml混合均勻即可。