實(shí)驗(yàn)二 測定物質(zhì)含量 （苯酚）

目的：

檢測:苯酚含量   維生素C（吸收峰920nm）

原理：

 根據(jù)A=εbc,，首先作苯酚的紫外吸收光譜，確定λmax,，在λmax下作出苯酚水溶液的標(biāo)準(zhǔn)曲線,，并在相同條件下測得試樣溶液的吸光光度值，確定試樣中苯酚的含量,。

實(shí)驗(yàn)方法：

采用紫外可見近紅外分光光度計(jì)中濃度掃描方式,，按照圖表配置標(biāo)準(zhǔn)苯酚，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線

1．苯的紫外光譜

將1滴苯放入石英比色皿底部,，蓋上蓋子,，以空氣為參比，在λ為230nm~270nm范圍內(nèi)掃描,，作出苯的紫外光譜,，掃描速度為100nm/min。

2．苯酚紫外吸收光譜圖的繪制

取5.00mL苯酚標(biāo)準(zhǔn)溶液（100mg/L）于25mL容量瓶中,，加水定容,，用1cm比色皿,，以純水作參比，在λ為225nm~300nm范圍內(nèi)掃描,，繪制吸收曲線,，確定λmax。

 3．標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作

    用1cm比色皿,，以純水為參比,，在確定的實(shí)驗(yàn)條件下，按濃度由低至高順序依此測量標(biāo)準(zhǔn)系列的吸光度,，作標(biāo)準(zhǔn)曲線,。

取5個25mL容量瓶，分別加入1.25,、2.50,、3.75、5.00,、7.50mL苯酚標(biāo)準(zhǔn)溶液（100mg/L）,，加水定容，在選定的λmax下,，測吸光度,，作出標(biāo)準(zhǔn)曲線。

 4．試樣的測定

在與標(biāo)準(zhǔn)曲線制作相同條件下,，測定試樣溶液的吸光度,，取10mL試液于25mL容量瓶中，加水定容,，測其吸光度,。