透析即用半透膜(透析袋)將大分子蛋白質(zhì)分離出來,。在生物大分子制備過程中除去鹽,、少量有機溶劑、生物小分子雜質(zhì)和濃縮樣品,,透析法zui簡便,。
技術(shù)指標(biāo):MWCO(截留分子量),單位:Diatoms ,。
透析時,,小于MWCO的分子在透析膜二邊溶液濃度差產(chǎn)生的擴散壓作用下滲過透析膜,其速度與濃度梯度,、膜面積及溫度成正比,。欲快速透析可采用直徑較小的透析袋以增加膜面積。常用溫度:4℃,,升溫,、更換袋外透析液或用磁力攪拌器,,均能提高透析速度。
使 用 須 知
1某些化學(xué)物質(zhì)會破壞透析袋微孔且不可逆轉(zhuǎn),。計有:
烴,、鹵化烴、醇,、酮,、酯、胺,、丙酮,、二氧雜環(huán)乙烷、環(huán)已烷等,。
酸(甲酸,、乙酸、稀強酸如5%HCI),,10%苯酚,,30%雙氧水。
甲醇,、乙醇:濃度小于5%時,,透析功能在,而MWCO變化,。
2蛋白質(zhì)吸附量,,小于1ug/克,(以透析袋干重計),。
正常使用PH值5-9(可重復(fù)使用),。
極限使用PH值2-12(一次性使用)。
3前處理:煮沸5分鐘后用蒸餾水60℃洗沖2分鐘,,置4℃蒸餾水中待用,。
長期保存液:0。05%-0,。1%疊氮鈉,,1mMEDTA或50%甘油,溫度(4℃),,使用前以蒸餾水洗凈,。
4即用型透析袋毋須前處理,使用前用蒸餾水洗凈即可,。
5透析袋裝液時應(yīng)留1/3-1/2空間,,以防透析過程中,袋外的水和緩沖液過量進入袋內(nèi)將袋漲破(含鹽量高的蛋白質(zhì)溶液透析隔夜時,,體積增加50%系正常情況),。
6使用時須戴手套,。
7透析效果檢查用 1%氯化鋇 檢查硫酸銨、硫酸鈉
1%硝酸銀 檢查氯化鈉,、氯化鉀[/size]
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