做ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)已是輕車(chē)熟路了

    ELISA試劑盒檢測(cè)系統(tǒng)可謂是免疫學(xué)反應(yīng)應(yīng)用到科研出產(chǎn)中zui為敏捷的技術(shù)手段,。自己也為此苦惱過(guò)很長(zhǎng)一段時(shí)間,，跟著自己技術(shù)水平得進(jìn)步,，或多或少地也把握了ELISA試劑盒體系的脾氣,，也是熟能生巧吧,，現(xiàn)在做方陣,，以前檢測(cè)一種抗體用整整一下戰(zhàn)書(shū)還算得暈暈的,，現(xiàn)在給我十個(gè)八個(gè)的從包被到顯色,，一個(gè)工作日基本搞定,。ELISA試劑盒可是在新老手操縱過(guò)程中老是會(huì)泛起或大或小的題目，本人在剛開(kāi)始做ELISA試劑盒時(shí)就面對(duì)良多災(zāi)題,，固然有師兄師姐鋪路,，但仍是經(jīng)常做得烏煙瘴氣，好比說(shuō)花板,，假陽(yáng)性,，全顯色，全部顯色,，顯色比空缺還低,。

    常用封鎖劑有：0.05%-0.5%的BSA；10%的小牛血清或1%明膠,；脫脂奶粉,，比較價(jià)廉，可以高濃度使用（5%－10％）,；還有一些稀有用到的各種動(dòng)物血清（主要為了排除相似蛋白干擾）和酪蛋白等等,。詳細(xì)的試驗(yàn)還要有堅(jiān)固的理論外也要實(shí)踐,，ELISA試劑盒看一下*可不可以應(yīng)用到自己試驗(yàn)當(dāng)中去。但*選用什么,，要依據(jù)試驗(yàn)詳細(xì)來(lái)實(shí)踐,。

    包被原的性質(zhì)很重要，蛋白濃度,，是否降解,，這關(guān)系到你做出的抗體可不可以被其識(shí)別，所以保留抗原很重要,，我做重組蛋白時(shí),，ELISA試劑盒師兄都嚴(yán)格警告我一定要在冰浴下緩慢融化就是這個(gè)道理。封鎖就是讓大量不相關(guān)的蛋白質(zhì)充填這些曠地空閑,，從而排斥ELISA試劑盒后的步驟中干擾物質(zhì)的再吸附,。但有時(shí)因?yàn)镋LISA試劑盒試驗(yàn)的需要，包被原的特殊性也可能采用中性的緩沖溶液來(lái)包,。還有有的包被原可能不是蛋白,，對(duì)于生物素和脂類(lèi)物質(zhì)或小分子物質(zhì)我們要事先對(duì)其改造再加以包被，ELISA試劑盒親和素生物素:先親和素先包被載體,，加入生物素化的DNA,，這種包被方法平均、牢固,，已擴(kuò)大應(yīng)用于各種抗原物質(zhì)的定量ELISA試劑盒測(cè)定,。常用的包被液除了剛才提到的pH9.6碳酸鹽緩沖液，還有pH7.2的磷酸鹽緩沖液和pH7-8的Tris-HCL緩沖液等等,。