ELISA試劑盒但應(yīng)避免反復(fù)凍融

實(shí)驗(yàn)原理：  

  本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人乙酰肝素酶(HPA）水平。用純化的人乙酰肝素酶(HPA）抗體包被微孔板,，制成固相抗體,，往包被單抗的微孔中依次加入乙酰肝素酶(HPA）,，再與HRP標(biāo)記的乙酰肝素酶(HPA）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色,。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的乙酰肝素酶(HPA）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值）,，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人乙酰肝素酶(HPA）濃度,。

ELISA試劑盒回收率是反應(yīng)待測(cè)物在樣品分析過程中的損失的程度，損失越少,，回收率越高,，如果作標(biāo)液1PPM，就是1毫克/升,，而作出標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)為0.99毫克/升,，就是說你的回收率是99％，這個(gè)與真實(shí)成分有密切的關(guān)系,，說明方法的準(zhǔn)確度,。ELISA試劑盒比如水中總無機(jī)氯含量測(cè)定, ELISA試劑盒樣品水中含有無機(jī)氯 20 mg/L, 取 100mL 被測(cè)水樣品, 加入 0.1mL 濃度為 10mg/mL 的含無機(jī)氯標(biāo)準(zhǔn)樣品, 測(cè)定時(shí)忽略體積變化, 如果測(cè)定出樣品中無機(jī)氯為 2.98mg/L, ELISA試劑盒則認(rèn)為回收率為98%。

樣本處理及要求：

1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘,，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細(xì)收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀,，應(yīng)再次離心,。

2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后,，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成,，應(yīng)該再次離心,。

3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細(xì)收集上清,，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心,。胸腹水,、腦脊液參照實(shí)行。

4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集,。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液,，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過反復(fù)凍融,，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清,。保存過程中如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心。

5. 組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后,，稱取重量,。加入一定量的PBS，PH7.4,。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4）,，用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分,。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清,。分裝后一份待檢測(cè),，其余冷凍備用。

6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),，可將標(biāo)本放于-20℃保存,，

雞煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)ELISA試劑盒 
雞B因子(BF)ELISA試劑盒
雞5核苷酸酶(5-NT)ELISA試劑盒 
雞層連蛋白/板層素(LN)ELISA試劑盒 
雞17-酮類固醇(17-KS)ELISA試劑盒
雞N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA試劑盒
雞神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA試劑盒
雞白介素17(IL-17)ELISA試劑盒 
雞1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)ELISA試劑盒 
雞可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA試劑盒
禽腦脊髓炎(AE)ELISA試劑盒
鴨白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒
鴨白介素4(IL-4)ELISA試劑盒
鴨白介素2(IL-2)ELISA試劑盒
鴨子碳酸酐酶(CA)ELISA試劑盒
鴨抗凝血素抗體(aPT1/aPT2)ELISA試劑盒
鴨環(huán)磷酸腺苷(cAMP)ELISA試劑盒
鴨免疫球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒
鴨主要組織相容性復(fù)合體(MHC)ELISA試劑盒 
鴨病毒性腸炎病毒(DEV)ELISA試劑盒
鴨白介素6(IL-6)ELISA試劑盒 
鴨白介素1(IL-1)ELISA試劑盒 
鴨γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒
綿羊磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA試劑盒
綿羊白介素2(IL-2)ELISA試劑盒
綿羊主要組織相容性復(fù)合體(MHC)ELISA試劑盒
綿羊白介素6(IL-6)ELISA試劑盒 
綿羊白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒
綿羊白介素1(IL-1)ELISA試劑盒
綿羊補(bǔ)體片段3b受體(C3bR)ELISA試劑盒
綿羊白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒
猴白介素4(IL-4)ELISA試劑盒
猴白介素2(IL-2)ELISA試劑盒
猴Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)ELISA試劑盒