紫外可見分光光度計簡介1852年,比爾(Beer)參考了布給爾(Bouguer)1729年和朗伯(Lambert)在1760年所發(fā)表的文章,,提出了分光光度的基本定律,,即液層厚度相等時,顏色的強度與呈色溶液的濃度成比例,,從而奠定了分光光度法的理論基礎(chǔ),,這就是的比爾朗伯定律。1854年,,杜包斯克(Duboscq)和奈斯勒(Nessler)等人將此理論應用于定量分析化學領(lǐng)域,,并且設計了*臺比色計,。到1918年,,美國國家標準局制成了*臺紫外可見分光光度計。此后,紫外可見分光光度計經(jīng)不斷改進,,又出現(xiàn)自動記錄,、自動打印、數(shù)字顯示,、微機控制等各種類型的儀器,,使光度法的靈敏度和準確度也不斷提高,其應用范圍也不斷擴大,。
]從儀器理論上講,,各種紫外可見分光光度計,都是根據(jù)比耳定律設計的,;而比耳定律研究的是在平行光,、單色光的條件下,物質(zhì)對光的吸收,。但是,,紫外可見分光光度計的單色器不可能得到真正的單色光。并且,,單色器系統(tǒng)不同,,它產(chǎn)生的單色光的純度(光譜帶寬)也不同,并且光通過物質(zhì)時,,也不可能是真正的平行光,。因此,嚴格地說,,實際工作中,,任何紫外可見分光光度計,都不可能真正滿足比耳定律,。所以,,紫外可見分光光度計都是針對近似平行光、近似單色光的條件設計的,。所以,,就看誰設計、制造儀器zui能滿足或接近比耳定律(或產(chǎn)生的比耳定律的偏離zui?。?,誰的儀器到了使用者手里,由于非平行光或非單色光產(chǎn)生的分析誤差zui小,,誰的儀器就(當然還有雜散光,、噪聲、穩(wěn)定性等要求),。這就是從儀器學理論,,去看紫外可見分光光度計的設計,、制造誤差的zui根本、zui本質(zhì)的問題,;也是使用者從儀器學理論去看紫外可見分光光度計的分析誤差的zui根本,、zui本質(zhì)的問題
紫外可見分光光度計主要應用
1檢定物質(zhì)
根據(jù)吸收光譜圖上的一些特征吸收,特別是zui大吸收波長雖ax和摩爾吸收系數(shù)是檢定物質(zhì)的常用物理參數(shù),。這在藥物分析上就有著很廣泛的應用,。在國內(nèi)外的藥典中,已將眾多的藥物紫外吸收光譜的zui大吸收波長和吸收系數(shù)載入其中,,為藥物分析提供了很好的手段,。
2與標準物及標準圖譜對照
將分析樣品和標準樣品以相同濃度配制在同一溶劑中,在同一條件下分別測定紫外可見吸收光譜,。若兩者是同一物質(zhì),,則兩者的光譜圖應*一致。如果沒有標樣,,也可以和現(xiàn)成的標準譜圖對照進行比較,。這種方法要求儀器準確,精密度高,,且測定條件要相同,。
3比較zui大吸收波長吸收系數(shù)的一致性
4純度檢驗
5推測化合物的分子結(jié)構(gòu)
6氫鍵強度的測定
實驗證明,不同的極性溶劑產(chǎn)生氫鍵的強度也不同,,這可以利用紫外光譜來判斷化合物在不同溶劑中氫鍵強度,,以確定選擇哪一種溶劑。
7絡合物組成及穩(wěn)定常數(shù)的測定
8反應動力學研究
9在有機分析中的應用
有機分析是一門研究有機化合物的分離,、鑒別及組成結(jié)構(gòu)測定的科學,,它是在有機化學和分析化學的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的綜合性學科。
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