色譜柱可分為填充柱和開管柱兩大類,。液相色譜通常均采用填充柱,。
色譜柱的分離效果取決于所選擇的固定相,以及色譜柱的制備和操作條件,。
色譜是一種分離分析手段,,分離是核心,因此擔(dān)負(fù)分離作用的色譜柱是色譜系統(tǒng)的心臟,。對色譜柱的要求是柱效高,、選擇性好,分析速度快等,。用于HPLC的各種微粒填料如多孔硅膠以及以硅膠為基質(zhì)的鍵合相,、氧化鋁、有機(jī)聚合物微球(包括離子交換樹脂),、多孔碳等,,其粒度一般為3,5,7,10μm等,柱效理論值可達(dá)5~16萬/米。對于一般的分析只需5000塔板數(shù)的柱效,;對于同系物分析,,只要500即可;對于較難分離物質(zhì)對則可采用高達(dá)2萬的柱子,,因此一般10~30cm左右的柱長就能滿足復(fù)雜混合物分析的需要,。
柱效受柱內(nèi)外因素影響,為使色譜柱達(dá)到佳效率,,除柱外死體積要小外,,還要有合理的柱結(jié)構(gòu)(盡可能減少填充床以外的死體積)及裝填技術(shù)。即使的裝填技術(shù),,在柱中心部位和沿管壁部位的填充情況總是不一樣的,,靠近管壁的部位比較疏松,易產(chǎn)生溝流,,流速較快,,影響沖洗劑的流形,使譜帶加寬,,這就是管壁效應(yīng),。這種管壁區(qū)大約是從管壁向內(nèi)算起30倍粒徑的厚度。在一般的液相色譜系統(tǒng)中,,柱外效應(yīng)對柱效的影響遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于管壁效應(yīng),。
色譜柱的分類
常見的分配柱填料:碳十八柱(ODS/C18)、碳八柱(MOS/C8),、碳六柱(Hexyl/C6),、 碳四柱(Butyl/C4)、碳一柱(Methyl/C1),、陰離子交換柱(SAX),、 陽離子交換柱(SCX)、苯基柱(Phenyl),、氨基柱(Amino/NH2),、 氰基柱(Cyano/CN/Nitrile)
常見的吸附柱填料:硅膠柱
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