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peprotech細胞因子使用注意事項

來源:上海力敏實業(yè)有限公司    2014年04月18日 15:04  
上海力敏實業(yè)有限公司為你詳細介紹 peprotech細胞因子使用注意事項:
peprotech細胞因子中不含載體蛋白(CarrierProtein)或其他添加劑(如A,、HAS或蔗糖等),,并且通常以zui少量的鹽來進行凍干處理,,因此微量的peprotech細胞因子在凍干過程中會沉積于管內(nèi),,形成很薄或不可見的蛋白層,。所以我們建議在收到產(chǎn)品后,,務必在開蓋前先離心,,使粘在管蓋或管壁上的蛋白聚集于管底(此時能否見到白色沉淀均屬正?,F(xiàn)象),。

1.離心:高速離心(10,000rpm)20-30秒,或低速離心(2,000rpm)5分鐘,。

2.溶解(Recotitution):用去離子水或其它緩沖液(根據(jù)說明書要求進行選擇)溶解至說明書要求的濃度(一般為0.1-1.0mg/mL,,如10ug的產(chǎn)品,需用10uL-100uL的去離子水或緩沖液溶解),。溶解時不可振蕩,,避免因化學鍵的斷裂造成蛋白失活,可加入適當?shù)娜軇┹p搖并靜置一段時間,,待細胞因子*溶解后使用,。溶劑的選擇:

1)要求用去離子水溶解的產(chǎn)品,務必不可用鹽溶液,,避免過高的鹽濃度造成蛋白不可逆的析出,;

2)要求用鹽溶液溶解的產(chǎn)品,請依照說明書上的濃度,,同樣也是為了避免過高的鹽濃度,。

3.分裝和貯存(AliquotandStorage):蛋白溶解后可根據(jù)自己的實驗需要進一步稀釋成工作液,稀釋可用RPMI1640,、DMEM或等溶液,,其中含有5-10%的FCS(小牛或胎牛血清)或0.5%的A(牛血清白蛋白)來穩(wěn)定蛋白,。工作液在4℃可保存1周,,如需長期保存,則需分裝凍存于-20℃(注意:不可凍存于-80℃),。分裝時每管中工作液的體積是一次實驗的用量,,以實現(xiàn)每次實驗用完一只工作液,避免反復凍融引起蛋白活性的降低peprotech細胞因子中不含載體蛋白(CarrierProtein)或其他添加劑(如A,、HAS或蔗糖等),,并且通常以zui少量的鹽來進行凍干處理,,因此微量的細胞因子在凍干過程中會沉積于管內(nèi),形成很薄或不可見的蛋白層,。
以上就是關于peprotech細胞因子的使用注意事項,,希望對你有所幫助。

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