1852年,，比爾(Beer)參考了布給爾(Bouguer)1729年和朗伯(Lambert)在1760年所發(fā)表的文章,，提出了分光光度的基本定律,，即液層厚度相等時,，顏色的強度與呈色溶液的濃度成比例,，從而奠定了分光光度法的理論基礎，這就是的比爾朗伯定律,。1854年,，杜包斯克(Duboscq)和奈斯勒(Nessler)等人將此理論應用于定量分析化學領域，并且設計了*臺比色計,。到1918年,，美國國家標準局制成了*臺紫外可見分光光度計。此后,，紫外可見分光光度計經(jīng)不斷改進,，又出現(xiàn)自動記錄、自動打印,、數(shù)字顯示,、微機控制等各種類型的儀器，使光度法的靈敏度和準確度也不斷 提高,，其應用范圍也不斷擴大,。 
　　紫外可見分光光度計法從問世以來，在應用方面有了很大的發(fā)展,，尤其是在相關(guān)學科發(fā)展的基礎上,，促使分光光度計儀器的不斷創(chuàng)新，功能更加齊全,，使得光度法的應用更拓寬了范圍,。 
　　1.原理
　　物質(zhì)的吸收光譜本質(zhì)上就是物質(zhì)中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長的光能量， 相應地發(fā)生了分子振動能級躍遷和電子能級躍遷的結(jié)果,。由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子 ,、原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu)，其吸收光能量的情況也就不會相同,，因此,，每種物質(zhì)就有其 *的、固定的吸收光譜曲線,，可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度的高低判別或 測 定該物質(zhì)的含量,，這就是分光光度定性和定量分析的基礎。分光光度分析就是根據(jù)物質(zhì)的吸 收光譜研究物質(zhì)的成分,、結(jié)構(gòu)和物質(zhì)間相互作用的有效手段,。
　　紫外可見分光光度法的定量分析基礎是朗伯-比爾(Lambert-Beer)定律。即物質(zhì)在一定濃度 的吸光度與它的吸收介質(zhì)的厚度呈正比
　　2 應用 
　　2.1 檢定物質(zhì) 
　　根據(jù)吸收光譜圖上的一些特征吸收,，特別是zui大吸收波長雖ax和摩爾吸收系數(shù)是檢定物質(zhì)的常用物理參數(shù),。這在藥物分析上就有著很廣泛的應用。在國內(nèi)外的藥典中,，已將眾多的藥物紫外吸收光譜的zui大吸收波長和吸收系數(shù)載入其中,，為藥物分析提供了很好的手段,。 
　　2.2 與標準物及標準圖譜對照 
　　將分析樣品和標準樣品以相同濃度配制在同一溶劑中，在同一條件下分別測定紫外可見吸收光譜,。若兩者是同一物質(zhì),，則兩者的光譜圖應*一致。如果沒有標樣,，也可以和現(xiàn)成的標 準譜圖對照進行比較,。這種方法要求儀器準確，精密度高,，且測定條件要相同,。 
　　2.3 比較zui大吸收波長吸收系數(shù)的一致性 
　　2.4 純度檢驗 
　　2.5 推測化合物的分子結(jié)構(gòu) 
　　2.6 氫鍵強度的測定 
　　實驗證明，不同的極性溶劑產(chǎn)生氫鍵的強度也不同,，這可以利用紫外光譜來判斷化合物在不 同溶劑中氫鍵強度,，以確定選擇哪一種溶劑 。 
　　2.7 絡合物組成及穩(wěn)定常數(shù)的測定 
　　2.8 反應動力學研究 
　　2.9 在有機分析中的應用 
　　有機分析是一門研究有機化合物的分離,、鑒別及組成結(jié)構(gòu)測定的科學,，它是在有機化學和分析化學的基礎上發(fā)展起來的綜合性學科。