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極妙的選擇方法:我們來為抗體做一個對比

來源:上海滬鼎進口生物試劑銷售網(wǎng)    2014年04月01日 10:54  

    我公司所供應(yīng)的抗體試劑質(zhì)量給您的保證,而且價格合理,。許多朋友們在抗體的選擇上做一個很大的糾結(jié)呀,,今天上海滬鼎來給朋友們推薦一個極妙的選擇方法:我們來為抗體做一個對比。 
免疫印跡和免疫沉淀
    對免疫印跡和免疫沉淀而言,,可用方法本身來檢測反應(yīng)的特異性和相對強度,,因為結(jié)合的抗原已被SDS-PAGE分離,從而能可靠地顯示抗體識別抗原基團,,并且很容易相互比較抗體,。因此.在比較和選擇*抗體時.免疫印跡和免疫沉淀是zui簡單的測試方法。

免疫親和純化
    對用于免疫親和純化的不同抗體來說,,有幾個關(guān)鍵步驟可用于獲取有效來源的抗原,。總的來講,,免疫親和純化依靠單抗,,因為單克隆抗體相互作用的單個位點在洗脫時比多克隆抗體更容易破壞,但是抗肽抗體的使用是一個例外。
    對不同來源免疫親和純化抗體的檢測,,zui容易且*的*步方法是用免疫沉淀,,這可用于模擬抗體結(jié)合在溶液中天然來源的抗原。在溶液中可有效結(jié)合絕大部分抗原,,并且在免疫沉淀蛋白的SDS—PAGE中所顯示的背景區(qū)帶較低的抗體,,可對其做進一步的評價,包括確定適當(dāng)?shù)南疵摋l件,。
免疫染色
    用于培養(yǎng)細(xì)胞或組織染色的抗體選擇比較困難,,如上所述,,一般不采用免疫染色方法檢測抗原的特異性,,相比而言,在免疫染色之前,,可選用的抗體用于免疫沉淀和免疫印跡的染色,。沒有背景區(qū)帶表明背景問題很小,隨后需要仔細(xì)設(shè)計抗原對照,。
    商業(yè)抗體的比較  各公司出售的抗體并不是對所有的方法均適用,。一些商業(yè)廠家經(jīng)常生產(chǎn)和銷售一些特征不明的抗體,對購買的試劑應(yīng)在各自實驗室重新滴定,。不能單憑公司的宣傳而隨意應(yīng)用所購買的抗體,。在購買某一商業(yè)抗體之前應(yīng)核對說明書,如果抗體不像廣告宣傳的那樣,,可以申訴,,讓供應(yīng)商知道他們的產(chǎn)品不是所希望的,如是守信譽的供應(yīng)商應(yīng)幫助解決因抗體質(zhì)量造成的問題,,并提供所要求的抗體或在某些方面做些補償,。
    購買抗體時應(yīng)計算實驗所需要的抗體用量,對于有些方法如免疫親和純化,,不可能提供所需要的抗體量,,因此需要尋找其他抗體來源。許多雜交瘤細(xì)胞株可以從美國或歐洲某些動物細(xì)胞培養(yǎng)中心購買獲得,,通過實驗室培養(yǎng),,制備大量實驗所需的抗體。

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