BD biocoat 基質(zhì)膠和細胞檢測系統(tǒng)

產(chǎn)品貨號：354230  354234  356230  356231  356234  356235  356237      

儲存和運輸：-20℃儲存，干冰運輸,。

操作指南：

BD采用技術,，從富含胞外基質(zhì)蛋白的EHS小鼠腫瘤中分離出BD Matrigel 基底膜基質(zhì),，其主要成分由層粘連蛋白，IV型膠原,，巢蛋白,，硫酸肝素糖蛋白等組成，還包含生長因子和基質(zhì)金屬蛋白酶等,。BD Matrigel 基底膜基質(zhì)在室溫條件下,，聚合形成具有生物學活性的三維基質(zhì)，模擬體內(nèi)細胞基底膜的結構,、組成,、物理特性和功能，有利于體外細胞的培養(yǎng)和分化,，以及對細胞形態(tài),、生化功能、遷移,、侵染和基因表達的研究,。

BD Matrigel 基底膜基質(zhì)形成的三維培養(yǎng)機制，可促進上皮細胞,、肝細胞,、Sertoli細胞、黑色素瘤細胞,、血管內(nèi)皮細胞,、甲狀腺細胞及毛囊細胞等的貼壁與分化。同時，Matrigel 還能影響乳腺上皮細胞的蛋白表達,，支持外周神經(jīng)的新生和牛輸卵管上皮細胞的分化,，高濃度的Matrigel 適用于研究體內(nèi)血管生成和腫瘤細胞遷移及腫瘤模型的建立等。

Matrigel 基質(zhì)會有色差變化（淡黃色到深紅色）,，是由于酚紅和碳酸氫鹽與CO2作用引起的,。但是與5%CO2平衡后色差即會減少。凍融后,，輕輕搖晃試劑瓶使Matrigel分散均勻,。所有操作均需在無菌環(huán)境中進行。試劑瓶瓶蓋可用70%乙醇擦拭,，并自然干燥,。應使用預冷的移液器以保證Matrigel呈勻漿狀。細胞可在0.5mm厚度的Matrigel基質(zhì)層表面生長,，也可在1mm厚度的Matrigel三維基質(zhì)內(nèi)生長,。過度稀釋的Matrigel會形成非膠質(zhì)的蛋白層，也可以用于細胞貼壁,，但不能用于細胞的分化研究,。

注意：

1.可將凍融后的Matrigel分裝在多個小管，所有分裝均需用預冷的凍存管,，迅速冷凍并保存,，避免多次凍融。

2.Matrigel在22-35℃溫度環(huán)境下快速成膠,，因此溶解時在4℃冰上過一夜凍融（4℃時會隨著溫度的上升部分成膠）,。所有用品在使用前需置于冰浴，必須使用預冷的移液管,、吸頭及小管操作Matrigel,。成膠后的Matrigel可以在4℃24-48小時后重新呈液態(tài)。

推薦包被與成膠方法：

注意：為了保證Matrigel基質(zhì)膜的成膠性能與穩(wěn)定性,，稀釋濃度不應低于1:3,，可用無血清培養(yǎng)基稀釋，Matrigel成膠后立即使用,。

薄膠成膠方法：

凍融后,，用預冷的移液槍頭混勻Matrigel基質(zhì)成勻漿狀。

將需要使用的培養(yǎng)板置于冰上,，加入濃度為50ul/cm2生長面積的Matrigel基質(zhì),。

在37℃放置30分鐘，即可使用,。

厚膠成膠方法：

凍融后,，用預冷的移液槍頭混勻Matrigel基質(zhì)成勻漿狀,。將需要使用的培養(yǎng)板置于冰浴，將培養(yǎng)的細胞與Matrigel基質(zhì)混合,，用移液槍頭使其懸浮于基質(zhì)中,。加入濃度為150-200ul/cm2生長面積的Matrigel基質(zhì)。在37℃放置30分鐘,，可成膠,。可以加入細胞培養(yǎng)的基質(zhì),，可以是細胞直接生長在膠表面,。

薄層包被方法：

凍融后，用預冷的移液槍頭混勻Matrigel基質(zhì)成勻漿狀,。根據(jù)使用需要,，采用無血清培養(yǎng)基稀釋Matrigel基質(zhì)，根據(jù)實驗需要確定*包被濃度,。將稀釋的Matrigel基質(zhì)包被于所需的培養(yǎng)器皿中,，包被量至少覆蓋整個器皿的生長表面。室溫下孵育1小時,。去除未結合的Matrigel,，用無血清培養(yǎng)基輕輕地沖洗。用BD細胞回收劑（354253）或離散酶（354235）可降解Matrigel基質(zhì),，冰浴7小時候回收得到細胞,。