組織培養(yǎng)配方研制
組織培養(yǎng)配方的研制是組培技術(shù)的關(guān)鍵,但受材料,經(jīng)驗等因素的影響,實際生產(chǎn)中配方研究的方法千差萬別,,但總體來說還是有章可循的,簡單介紹一些常用方法,以供參考。1、配方的研制方向
1,、去分化----誘導(dǎo)形成原球莖,、愈傷組織、
2,、再分化芽----原球莖形成植株,、不定芽形成植株、胚狀體,、珠莖,、花芽,、葉、鱗片母體組織直接產(chǎn)生小植株,、無菌短枝扦插腋芽萌發(fā)
3,、芽苗伸長---小苗拔高,成為幼苗,。
4,、再分化根--- 愈傷、莖部直接生根
激素一般配比規(guī)律Skoog和Miller等所提出的生長素和激動素比例決定根和芽分化的觀點,,曾被大量的試驗結(jié)果所證明 ,。因此二者的濃度和比例非常重要,其合適的配比就是常說的配方,。狹義的配方,,如:MS +BA2+NAA0。2廣義的配方,,如:B5 +BA2+NAA0.2+糖5g+活性碳10%+200C+瓊脂6g1,。去分化:生長素低;細(xì)胞分裂素高
2,。再分化:細(xì)胞分裂素高,;生長素低
3。莖伸長:赤霉素調(diào)節(jié)4,。生根:生長素高,;細(xì)胞分裂素低
1.參閱外來配方:簡單實用,節(jié)省時間,,較為準(zhǔn)確,,效益突出。2.原配方的改造:如蘋果棗組培快繁
原分化培養(yǎng)基:MS+6 -BA4.0+NAA0.3
篩選分化培養(yǎng)基進(jìn)行試驗:以原配方BA4.0,、NAA0.3為參照,,設(shè)計4次重復(fù),兩兩組合,則有16種配方組合,,從中篩選BA,、NAA*組合。
6 -BA----2.0,、3.0,、4.0、6.0 mg/L
NAA-----0.05,、0.1,、0.3、0.5 mg/L
3.新配方的研制3.1*設(shè)計(適合因素少,,水平少的試驗)正交設(shè)計
正交試驗設(shè)計法----它是以概率它是以概率論數(shù)理統(tǒng)計論數(shù)理統(tǒng)計,、專業(yè)技術(shù)知識和實踐經(jīng)驗為基礎(chǔ),充分利用標(biāo)準(zhǔn)化的正交表來安排試驗方案,,并對試驗結(jié)果進(jìn)行計算分析,zui終達(dá)到減少試驗次數(shù),,縮短試驗周期,,迅速找到優(yōu)化方案的一種科學(xué)計算方法。
我國從我國從20世紀(jì)世紀(jì)50年代開始,,以中國科學(xué)院數(shù)學(xué)研究所為基礎(chǔ)深入研究這門科學(xué),,并應(yīng)用到工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中去,得到了廣泛推廣成績顯著,。正交法之所以受到人們的關(guān)注正交法之所以受到人們的關(guān)注,。
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