（一）多克隆抗體的概念 
抗原刺激機(jī)體，產(chǎn)生免疫學(xué)反應(yīng),，由機(jī)體的漿細(xì)胞合成并分泌的與抗原有特異性結(jié)合能力的一組球蛋白，這就是免疫球蛋白，這種與抗原有特異性結(jié)合能力的免疫球蛋白就是抗體,。 
抗原通常是由多個(gè)抗原決定簇組成的，由一種抗原決定簇刺激機(jī)體,，由一個(gè)B淋巴細(xì)胞接受該抗原所產(chǎn)生的抗體稱(chēng)之為單克隆抗體（Monclone antibody）,。由多種抗原決定簇刺激機(jī)體，相應(yīng)地就產(chǎn)生各種各樣的單克隆抗體,，這些單克隆抗體混雜在一起就是多克隆抗體,，機(jī)體內(nèi)所產(chǎn)生的抗體就是多克隆抗體；除了抗原決定簇的多樣性以外,，同樣一類(lèi)抗原決定簇,，也可刺激機(jī)體產(chǎn)生IgG、IgM,、IgA,、IgE和IgD等五類(lèi)抗體。 
（二）免疫動(dòng)物 
供免疫用的動(dòng)物主要是哺乳動(dòng)物和禽類(lèi),，常選擇家兔,、綿羊、山羊,、馬,、騾和豚鼠及小鼠等。動(dòng)物的選擇常根據(jù)抗體的用途和量來(lái)決定,，也與抗原的性質(zhì)有關(guān),。如要獲得大量的抗體，多采用大動(dòng)物,；如要是獲得直接標(biāo)記診斷的抗體,，則直接采用本動(dòng)物；如要獲得間接的標(biāo)記診斷用抗體,，則必須用異源動(dòng)物制備抗體,；如果難以獲得的抗原，且抗體的需要量少,，則可以采用純系小鼠制備,；一般實(shí)驗(yàn)室采用的抗體,，多用兔和羊制備,。 
免疫用的動(dòng)物選擇適齡的健康雄性動(dòng)物，雌性動(dòng)物特別是妊娠動(dòng)物用于制備免疫抗體則非常不合適,，有時(shí)甚至不產(chǎn)生抗體,。由于對(duì)免疫應(yīng)答的個(gè)別差異,，免疫時(shí)應(yīng)同時(shí)選用數(shù)只動(dòng)物進(jìn)行免疫,。 
抗原是多種多樣的，而且千差萬(wàn)別,。就其化學(xué)成分而言,，有蛋白質(zhì)抗原、類(lèi)脂抗原,、多糖類(lèi)抗原和核酸抗原等。就抗原性而言,，有*抗原和不*抗原,。為了獲得較好的抗血清，是選用蛋白質(zhì)抗原,，如要制備用于篩選細(xì)菌表達(dá)的cdna文庫(kù)或免疫印跡的抗血清,，選用可降解的蛋白質(zhì)抗原。不同的抗原,，其免疫原性的強(qiáng)弱均不相同,，這種免疫原性的強(qiáng)弱取決于抗原的分子量、化學(xué)活性基團(tuán),、立體結(jié)構(gòu),、物理形狀和彌散速度等。 
抗原的免疫劑量是依照給予動(dòng)物的種類(lèi),、免疫周期以及所要求的抗體特性等不同而不同,。劑量過(guò)低，不能引起足夠強(qiáng)的免疫刺激,，免疫劑量過(guò)多,，有可能引起免疫耐受。在一定的范圍內(nèi),，抗體的效價(jià)是隨注射劑量的增加而增高,。蛋白質(zhì)抗原的免疫劑量比多糖類(lèi)抗原寬。一般而言,，小鼠的免疫劑量為50μg～400μg/次,，大鼠為100μg～1 000μg/次，兔為200μg～1 000μg/次,。加強(qiáng)計(jì)量為劑量的1/5～2/5,。 
免疫劑量與注射途徑有關(guān)，一般而言,，靜脈注射劑量大于皮下注射,，而皮下注射又比掌內(nèi)和跖內(nèi)皮下注射劑量大，也可采用淋巴結(jié)內(nèi)注射法,。加佐劑比不加佐劑的注射劑量要小,，對(duì)家兔而言,，采用弗氏*佐劑，則需注射0.5mg～1mg/kg./次,，如采用弗氏不*佐劑則注射劑量應(yīng)大10倍以上,。如要制備高度特異性的抗血清,可選用低劑量抗原短程免疫法。如需要獲得價(jià)的抗血清,，宜采用大劑量長(zhǎng)程免疫法,。免疫周期長(zhǎng)者，可少量多次,。免疫周期短者,，應(yīng)大量少次。 
兩次注射的間隔時(shí)間應(yīng)長(zhǎng)短適宜,太短起不到再次反應(yīng)的效果,，太長(zhǎng)則失去了前一次激發(fā)的敏感作用,。一般間隔時(shí)間應(yīng)為5~7天，加佐劑者應(yīng)為2周左右,。 
注射的Ig純度高,，則一般不易引起過(guò)敏反應(yīng)，如注射血清,，即使是少量,，在再次免疫時(shí)，極易引起過(guò)敏反應(yīng),，所以一定要采取措施,。 
（四）佐劑的應(yīng)用 
對(duì)可溶性抗原而言，為了增強(qiáng)其免疫原性或改變免疫反應(yīng)的類(lèi)型,、節(jié)約抗原等目的,，常采用加佐劑的方法以刺激機(jī)體產(chǎn)生較強(qiáng)的免疫應(yīng)答。 
1．佐劑的類(lèi)型 目前實(shí)踐中常應(yīng)用的佐劑有氫氧化鋁膠,、明礬,、弗氏佐劑、脂質(zhì)體和石蠟油等,。也有采用結(jié)合桿菌等分枝桿菌,、白喉?xiàng)U菌以及細(xì)小棒狀桿菌等。 
⑴ 弗氏不*佐劑（incomplete Freund’s adjuvant,IFA） 
羊毛脂 1 份 
石蠟油 5 份 
混合,，高壓滅菌后保存,。用時(shí)加熱融化，冷卻至50℃左右,，加抗原進(jìn)行乳化處理,。 
⑵ 弗氏*佐劑（complete Freund’s adjuvant,CFA） 
弗氏不*佐劑 10ml 
卡介苗 10mg～200mg