科捷提供《色譜分析法》

——氣相色譜分析法 廣東

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下面是色譜分析法基本原理的簡介：

色譜法,，又稱層析法,。根據(jù)其分離原理，有吸附色譜,、分配色譜,、離子交換色譜與排阻色譜等方法。其中重點介紹氣相色譜分析法
吸附色譜是利用吸附劑對被分離物質(zhì)的吸附能力不同,，用溶劑或氣體洗脫,，以使組分分離。常用的吸附劑有氧化鋁,、硅膠,、聚酰胺等有吸附活性的物質(zhì)。

分配色譜是利用溶液中被分離物質(zhì)在兩相中分配系數(shù)不同,，以使組分分離,。其中一相為液體，涂布或使之鍵合在固體載體上,，稱固定相,；另一相為液體或氣體，稱流動相。常用的載體有硅膠,、硅藻土,、硅鎂型吸附劑與纖維素粉等。

　氣相色譜法

　氣相色譜法是在以適當(dāng)?shù)墓潭ㄏ嘧龀傻闹軆?nèi),，利用氣體（載氣）作為移動相,，使試樣（氣體、液體或固體）在氣體狀態(tài)下展開,，在色譜柱內(nèi)分離后,，各種成分先后進(jìn)入檢測器，用記錄儀記錄色譜譜圖,。 在對裝置進(jìn)行調(diào)試后,，按各單體的規(guī)定條件調(diào)整柱管、檢測器,、溫度和載氣流量,。進(jìn)樣口溫度一般應(yīng)高于柱溫30-50度。如用火焰電離檢測器,，其溫度應(yīng)等于或高于柱溫,，但不得低于100度，以免水汽凝結(jié),。色譜上分析成分的峰的位置,，以滯留時間（從注入試樣液到出現(xiàn)成分zui高峰的時間）和滯留容量（滯留時間×載氣流量）來表示。這些在一定條件下,，就能反應(yīng)出物質(zhì)所具有特殊值,，并據(jù)此確定試樣成分。
根據(jù)色譜上出現(xiàn)的物質(zhì)成分的峰面積或峰高進(jìn)行定量,。峰面積可用面積測定儀測定,，按半寬度法求得（即以峰1/2處的峰寬×峰高求得）。峰高的測定方法是從峰高的頂點向記錄紙橫座標(biāo)準(zhǔn)垂線,，找出此垂線與峰的兩下端聯(lián)結(jié)線的交點,，即以此交點至峰頂點的距離長度為峰高。

　定量方法可分以下三種：

　1,、內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)法 取標(biāo)準(zhǔn)被測成分,，按依次增加或減少的已知階段量，各自分別加入各單體所規(guī)定的定量內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中,，調(diào)制標(biāo)準(zhǔn)溶液。分別取此標(biāo)準(zhǔn)液的一定量注入色譜柱,，根據(jù)色譜圖取標(biāo)準(zhǔn)被測成分的峰面積和峰高和內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的峰面積和峰高的比例為縱座標(biāo),，取標(biāo)準(zhǔn)被測成分量和內(nèi)標(biāo)物質(zhì)量之比，或標(biāo)準(zhǔn)被測成分量為橫坐標(biāo)，制成標(biāo)準(zhǔn)曲線,。

　然后按單體中所規(guī)定的方法調(diào)制試樣液,。在調(diào)制試樣液時，預(yù)先加入與調(diào)制標(biāo)準(zhǔn)液時等量的內(nèi)標(biāo)物質(zhì),。然后按制作標(biāo)準(zhǔn)曲線時的同樣條件下得出的色譜,，求出被測成分的峰面積或峰高和內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的峰積或峰高之比，再按標(biāo)準(zhǔn)曲線求出被測成分的含量,。

　所用的內(nèi)標(biāo)物質(zhì),，應(yīng)采用其峰面積的位置與被測成分的峰的位置盡可能接近并與被測成分以外的峰位置*分離的穩(wěn)定的物質(zhì)。

　2,、標(biāo)準(zhǔn)曲線法 取標(biāo)準(zhǔn)被測成分 按依次增加或減少階段法,，各自調(diào)制成標(biāo)準(zhǔn)液，注入一定量后,，按色譜圖取標(biāo)準(zhǔn)被測成分的峰面積或峰高為縱座標(biāo),，而以標(biāo)準(zhǔn)被測成分的含量為橫坐標(biāo)，制成標(biāo)準(zhǔn)曲線,。然后按單體中所規(guī)定的方法制備試樣液,。取試樣液按制標(biāo)準(zhǔn)曲線時相同的條件作出色譜，求出被測成分的峰面積和峰高,，再按標(biāo)準(zhǔn)曲線求出被測成分的含量,。 3、峰面積百分率法 以色譜中所得各種成分的峰面積的總和為100,，按各成分的峰面積總和之比,，求出各成分的組成比率。
氣液色譜法

　這時所指的氣液色譜法,，主要用于各種香料物質(zhì)的分析,，基本條件和參數(shù)主要依照美國精油協(xié)會（EOA）于1979年所建議的方法。其基本原理,、操作,、標(biāo)準(zhǔn)狀態(tài)等均與上述氣相色譜法相同。
1,、柱 用304號合金所制不銹鋼管,，長3m，內(nèi)徑2.16-2.57mm,，外徑3.18mm,。底物：極性柱為聚乙二醇20M（Carbowax 20M）,分子量約2萬；非極性柱為氣相色譜級甲基硅氧烷（SE-30）,，或二甲基硅氧烷（OV-1或OV-101）,。底物濃度：重量的105,。固體載體：10目或20目熔融煅燒過的硅藻土，經(jīng)硅烷化和酸洗后,，其自由傾落密度為0.2g/cm3,，zui小120目，zui大80目,。裝填密度每cm3應(yīng)大于0.24g,。
2、載氣 氦,。zui低流量為每分鐘25-50ml,。

分析狀態(tài)

　極性柱：起始溫度，zui低75度,；zui終溫度,，zui高225度。升溫速度,，每分鐘2-8度,。
　非極性柱：起始溫度，zui低75度,；zui終溫度,，不超過275度；升溫速度,，每分鐘2-8度,。
　進(jìn)樣溫度：225-250度。試樣量：0.1-1ul,。
　檢測器：用熱導(dǎo)池,。檢測器的操作條件應(yīng)維持恒定。

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