學(xué)做實(shí)驗(yàn)的方法初步入門(mén)-迷你離心機(jī)技術(shù)文章
學(xué)做實(shí)驗(yàn)的方法初步入門(mén)-迷你離心機(jī)技術(shù)文章
實(shí)驗(yàn)方法:學(xué)做實(shí)驗(yàn)兩者方法有所不同,,大概分為兩種方法:向別人學(xué)習(xí)和自學(xué),。下面分別介紹一下吧
基本操作和基礎(chǔ)知識(shí)
在開(kāi)始學(xué)做實(shí)驗(yàn)的時(shí)候,,有人指導(dǎo),。做實(shí)驗(yàn)的內(nèi)容,,大概分為基本操作和具體實(shí)驗(yàn)的操作,?;静僮魇蔷唧w實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ),,例如:怎樣量取容積,,怎樣測(cè)量和調(diào)節(jié)PH值,怎樣清洗實(shí)驗(yàn)室器皿,,無(wú)菌操作技術(shù),,怎樣使用pipette,怎樣配置溶液,怎樣autoclave(高壓蒸汽滅菌)等,。學(xué)做實(shí)驗(yàn)的時(shí)候,,應(yīng)該先學(xué)zui基本的操作,再學(xué)具體的實(shí)驗(yàn),。這些基本操作具有至關(guān)重要的作用,,它直接決定了實(shí)驗(yàn)的成功率。
可以推薦幾本基本關(guān)于實(shí)驗(yàn)操作的書(shū),。*本書(shū)是《分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室工作手冊(cè)》(英文名At the bench: a laboratory navigator),。這本書(shū)是生物醫(yī)學(xué)研究生的入門(mén)書(shū)籍,建議精讀三遍以上,。本書(shū)中譯本大約300多頁(yè),,相對(duì)于將要介紹的其它幾本書(shū)籍要薄很多。它介紹了怎樣在實(shí)驗(yàn)室與他人相處,,怎樣建立實(shí)驗(yàn)室,,怎樣寫(xiě)實(shí)驗(yàn)記錄,實(shí)驗(yàn)室的基本操作如試劑的配置,、儲(chǔ)藏和處理,,無(wú)菌技術(shù),細(xì)胞培養(yǎng),,離心,,測(cè)PH值,電泳,,顯微鏡的使用等,。總而言之,,本書(shū)基本上囊括了生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室日常遇到的問(wèn)題和所有的基本操作,,是生物醫(yī)學(xué)研究生的入門(mén)書(shū)籍。
第二本書(shū)是《分子克隆》(英文名Molecular cloning: a laboratory manual),,本書(shū)被譽(yù)為分子生物學(xué)的圣經(jīng),,幾乎每一個(gè)生物實(shí)驗(yàn)室都有一本。本書(shū)介紹了分子生物學(xué)常用實(shí)驗(yàn)技術(shù)的基本原理和許多protocol,。目前已經(jīng)出版到第三版,。*版出版于 1982年,第二版出版于1989年,,第三版出版于2001年,。書(shū)中提供的protocol很經(jīng)典,但是有些目前已經(jīng)改進(jìn)了,。這本書(shū)很厚,,第三版英文版有2000多頁(yè),,所以幾乎不可能也沒(méi)有必要精讀所有章節(jié),,只要閱讀自己正在做的實(shí)驗(yàn)的相關(guān)內(nèi)容就可以了,。
《Current Protocols in Essential Laboratory Techniques》這本書(shū)從怎樣量取體積,稱(chēng)取重量,,測(cè)量PH值,,測(cè)量濃度等zui基本的操作說(shuō)起,講到配置溶液,,細(xì)胞培養(yǎng),,PCR,樣本的準(zhǔn)備,,層析,,電泳,印跡實(shí)驗(yàn),,顯微鏡,,酶促反應(yīng)(PCR等)。這本書(shū)共有737頁(yè),,講的是每天做實(shí)驗(yàn)都要遇到的問(wèn)題,,詳盡系統(tǒng)卻又簡(jiǎn)明易懂。對(duì)于希望學(xué)好做實(shí)驗(yàn)的人而言,,本書(shū)必須仔細(xì)閱讀,,對(duì)于希望成為實(shí)驗(yàn)高手的人而言,本書(shū)更應(yīng)該精讀,。Current Protocol是Wiley出版社出版的一個(gè)實(shí)驗(yàn)室手冊(cè)叢書(shū),,是生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)經(jīng)典叢書(shū)之一,目前有16本,,包括:Neuroscience, Molecular biology, Microbiology, Immunology, Toxicology, Cell biology等,。
以上三本書(shū)各有特點(diǎn)?!禔t the bench: a laboratory navigator》為科普性質(zhì),,是對(duì)實(shí)驗(yàn)室基礎(chǔ)技術(shù)的粗略介紹,《Current Protocols in Essential Laboratory Techniques》是對(duì)實(shí)驗(yàn)室基礎(chǔ)技術(shù)的詳細(xì)介紹,,而《Molecular Cloning》則是對(duì)具體實(shí)驗(yàn)的詳細(xì)介紹,。按照“柿子先撿軟的捏”的原則,建議先通讀《At the bench: a laboratory navigator》,,再通讀《Current Protocols in Essential Laboratory Techniques》1,2,3,5,9章及正在學(xué)習(xí)的具體實(shí)驗(yàn)的相關(guān)章節(jié),,加上閱讀《Molecular Cloning》正在學(xué)習(xí)的具體實(shí)驗(yàn)的相關(guān)章節(jié)。通讀的時(shí)候,,標(biāo)出重點(diǎn)及自己的知識(shí)盲點(diǎn),,以后多復(fù)習(xí)重點(diǎn)和知識(shí)盲點(diǎn)幾遍直至了然于胸。
怎樣向別人學(xué)做實(shí)驗(yàn)
如果有人教做實(shí)驗(yàn),學(xué)習(xí)效率會(huì)高很多,。無(wú)論是向老師還是向師兄師姐學(xué)習(xí),,都需要注意別人的時(shí)間是寶貴的,所以盡可能一兩次學(xué)會(huì),。因此,,在學(xué)習(xí)之前,先問(wèn)清楚需要學(xué)習(xí)的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容,,自己先通過(guò)閱讀書(shū)籍,,查閱網(wǎng)絡(luò)資料對(duì)該實(shí)驗(yàn)的原理和基本操作有一個(gè)大概的了解。好記性不如爛筆頭,,在學(xué)習(xí)的時(shí)候,,要帶上紙筆做記錄。遇到不懂的地方,,不要因?yàn)橛X(jué)得不禮貌而將疑問(wèn)存于心中,,而應(yīng)該詢問(wèn)清楚。實(shí)驗(yàn)的精髓不是一份簡(jiǎn)單的Protocol,,而是實(shí)驗(yàn)的“心法”:關(guān)鍵步驟,,注意事項(xiàng),常見(jiàn)問(wèn)題和解決方法,。做任何一個(gè)實(shí)驗(yàn),,必須清楚關(guān)鍵步驟、注意事項(xiàng),、常見(jiàn)問(wèn)題和解決方法,。要清楚一個(gè)試劑的作用是什么,加多或者少加會(huì)有什么后果,;一個(gè)步驟的目的是什么,,時(shí)間太長(zhǎng)或者太短會(huì)怎樣等。在學(xué)習(xí)的時(shí)候,,如果沒(méi)有教這些“心法”,,自己應(yīng)該主動(dòng)請(qǐng)教,并記錄下來(lái),。
一開(kāi)始學(xué)做實(shí)驗(yàn)的時(shí)候,,分三步走:老師示范,自己做老師看,,自己獨(dú)立做,。認(rèn)真的態(tài)度常常使別人樂(lè)于教你,如果自己無(wú)所謂,,則別人會(huì)覺(jué)得教你是在浪費(fèi)時(shí)間,。在開(kāi)始學(xué)做一個(gè)實(shí)驗(yàn)的時(shí)候,,及時(shí)、詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)記錄是非常必要的,,如果實(shí)驗(yàn)失敗,,這些記錄是分析失敗原因的重要依據(jù)。做完實(shí)驗(yàn)之后,,要總結(jié)經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn),,記錄下來(lái),,并定期復(fù)習(xí)這些經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn),。總之,,學(xué)做實(shí)驗(yàn),,遵循的步驟是:1。 預(yù)習(xí),。2,。觀摩,記錄,。3,。自己操作。4,??偨Y(jié)和復(fù)習(xí)。*次實(shí)驗(yàn)就成功,,常常不是一件好事,,因?yàn)榭赡軆H僅是運(yùn)氣好。多次失敗后的成功才是掌握了實(shí)驗(yàn)的可靠指標(biāo),。好的實(shí)驗(yàn)室常常有成熟的Protocol,,不好的實(shí)驗(yàn)室,Protocol可能并不完善,,需要自己摸索和調(diào)整,。
怎樣自學(xué)做實(shí)驗(yàn)
不是每一個(gè)實(shí)驗(yàn)都有人教,需要自學(xué)的情況很常見(jiàn),。自學(xué)做實(shí)驗(yàn),,必須在掌握了實(shí)驗(yàn)的基本操作的基礎(chǔ)上進(jìn)行。自學(xué)實(shí)驗(yàn),,關(guān)鍵是要找到可行的protocol,,并清楚實(shí)驗(yàn)原理,關(guān)鍵步驟,,常見(jiàn)問(wèn)題和解決方法,。 我一般采取的程序是:首先用搜索引擎檢索實(shí)驗(yàn)原理,,常見(jiàn)問(wèn)題,注意事項(xiàng)等,。把網(wǎng)上許多文章拷貝下來(lái),,仔細(xì)閱讀,找出重點(diǎn),,總結(jié)成簡(jiǎn)化版,。然后,找一個(gè)好的protocol,。Protocol可以從檢索,,從書(shū)籍中找到,從別人的文獻(xiàn)中找,,或者從生物公司的上找,。這些方法下面分別介紹。找到不同的protocol進(jìn)行比較,,分析為什么不同,。通過(guò)比較,可以加深對(duì)實(shí)驗(yàn)的理解,。
如果系里或者認(rèn)識(shí)的人有正在學(xué)習(xí)的實(shí)驗(yàn)的專(zhuān)家,,向?qū)<艺?qǐng)教,可以節(jié)約不少時(shí)間,。有時(shí)候,,一個(gè)小小的細(xì)節(jié)問(wèn)題就可以浪費(fèi)許多時(shí)間。
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