目的：應(yīng)用血管生成抗體芯片技術(shù)探討麥冬多糖MDG-1對(duì)體外培養(yǎng)的人微血管內(nèi)皮細(xì)胞 （HMEC-1） 瘦素表達(dá)的影響。

方法：使用血管生成抗體芯片技術(shù)檢測不同濃度MDG-1處理后人微血管內(nèi)皮細(xì)胞中多種生長因子的變化情況,，確定與其治療冠心病和糖尿病作用相關(guān)的生長因子,；然后利用RT-PCR方法檢測MDG-1對(duì)瘦素mRNA表達(dá)的影響。結(jié)果：抗體芯片結(jié)果顯示MDG-1對(duì)多種生長因子都有調(diào)節(jié)作用,，其中0.2,、1、10 mmol/L MDG-1對(duì)瘦素蛋白表達(dá)均有明顯的抑制作用,，RT-PCR結(jié)果也表明MDG-1可以抑制瘦素mRNA表達(dá),。

 MDG-1可以顯著抑制人微血管內(nèi)皮細(xì)胞瘦素mRNA和蛋白的表達(dá)，MDG-1治療冠心病和糖尿病作用可能與調(diào)節(jié)瘦素表達(dá)有關(guān),。

瘦素 （1eptin） 又稱“消脂素”，是肥胖基因 （obese gene） 的產(chǎn)物,，是由脂肪組織分泌的一種蛋白質(zhì)激素,，通過與其受體結(jié)合發(fā)揮抑制食欲、減少能量攝入,、增加能量消耗,、抑制脂肪合成、調(diào)節(jié)機(jī)體脂肪沉積的作用,，Zhang[1]等于1994年首先闡明其基因,、分子結(jié)構(gòu)及生理作用。近年來的研究發(fā)現(xiàn),，瘦素與冠心病,、2型糖尿病、肥胖,、脂肪肝等多種生理病理過程密切相關(guān)[2],。

麥冬為百合科沿階草屬植物麥冬Ophiopogon japonicus （Thunb.） Ker-Gawl.干燥塊根，是常用滋陰中藥,，具有養(yǎng)陰生津,，潤肺清心的功能，臨床用于冠心病、心絞痛,、糖尿病的治療取得一定療效,。麥冬多糖 （MDG-1） 為從麥冬中分離純化得到的均一分子量β-D-果聚糖[3]，前期藥理學(xué)研究表明,，MDG-1具有抗心肌缺血損傷的作用[4],，并對(duì)治療糖尿病一定的效果。血管生成抗體芯片技術(shù)是近幾年國外快速發(fā)展并逐漸成熟起來的生物技術(shù)[5, 6],，可以快速而準(zhǔn)確地檢測樣本中多種生長因子的表達(dá)情況,，國內(nèi)還未見該技術(shù)的應(yīng)用報(bào)道。在本研究中,，借助血管生成抗體芯片技術(shù)的優(yōu)勢,，我們對(duì)多種生長因子基因在MDG-1處理后人微血管內(nèi)皮細(xì)胞中的表達(dá)情況進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)瘦素可能是與MDG-1治療糖尿病和冠心病作用相關(guān)的生長因子,；而后又利用RT-PCR方法檢測瘦素mRNA表達(dá)的影響,，為進(jìn)一步研究MDG-1作用機(jī)制提供依據(jù)。

細(xì)胞因子檢測是判斷機(jī)體功能的一個(gè)重要指標(biāo),，在疾病的診斷,、療效判斷及監(jiān)測方面有重要意義，研究細(xì)胞因子也有助于闡明分子水平的調(diào)節(jié)機(jī)制,。傳統(tǒng)的細(xì)胞因子蛋白表達(dá)水平檢測方法存在許多缺點(diǎn),，如敏感度不夠高、一次僅能檢測單個(gè)或幾個(gè)蛋白,。近幾年隨著生物技術(shù)的快速發(fā)展并逐漸成熟起來,，抗體芯片技術(shù)成為解決上述技術(shù)缺點(diǎn)的典型代表。芯片的設(shè)計(jì)基于雙抗體夾心法原理,，使得抗體芯片具有靈敏度高,、特異性好、重復(fù)性佳,、準(zhǔn)確性高,、樣品用量少的優(yōu)點(diǎn)，大多數(shù)蛋白的檢測靈敏度可達(dá)pg水平,，且檢測蛋白表達(dá)水平勝過RNA水平,，可以快速而準(zhǔn)確地檢測樣本中多種生長因子的表達(dá)情況，從而確定待測樣本中有關(guān)因子的表達(dá)變化,，具有非常廣闊的應(yīng)用前景,。

瘦素介導(dǎo)了代謝、內(nèi)分泌及與肥胖有關(guān)的心血管疾病的發(fā)生,。近年來,，研究發(fā)現(xiàn)瘦素與冠心病發(fā)生相關(guān)的機(jī)制可能與其促進(jìn)血栓形成，調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)，誘導(dǎo)氧化應(yīng)激,，增加交感神經(jīng)興奮性,，引起內(nèi)皮功能紊亂等作用有關(guān)。高瘦素血癥與冠心病的發(fā)病密切相關(guān),，瘦素水平可能是冠心病的一個(gè)新的危險(xiǎn)因素[9],。

瘦素還與胰島素抵抗的發(fā)生關(guān)系密切[10]。胰島素抵抗（IR）是2型糖尿病的重要特征之一,，IR是糖耐量減退或糖尿病,、高胰島素血癥、高血壓,、肥胖,、高脂血癥等的共同發(fā)病基礎(chǔ)。瘦素缺乏和高瘦素血癥均可導(dǎo)致IR,。由于瘦素抵抗,，瘦素不能抑制胰島素分泌，導(dǎo)致高胰島素血癥,。一方面,，瘦素持續(xù)升高，使瘦素作用于下丘腦的受體解離,，使瘦素產(chǎn)生飽感及能量消耗的作用減弱,，脂肪－胰島素軸失調(diào)；另一方面,，瘦素不能抑制胰島素分泌,，出現(xiàn)高胰島素血癥，后者進(jìn)一步促進(jìn)脂肪合成增加,，脂肪組織合成及分泌瘦素增加，結(jié)果是瘦素與胰島素的雙向調(diào)節(jié)作用被破壞,，形成惡性循環(huán),。高胰島素血癥的后果是促進(jìn)脂肪合成，形成肥胖,，zui終導(dǎo)致胰島素敏感性下降,，發(fā)生糖尿病。

近十多年來糖化學(xué),、糖生物學(xué)的研究方興未艾,。人們發(fā)現(xiàn)糖類參與了生命現(xiàn)象中細(xì)胞的各種活動(dòng)，具有多種多樣的生物學(xué)功能,。目前植物多糖的生物活性研究報(bào)道日益增多,。前期實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)麥冬多糖MDG-1具有抗心肌缺血損傷和治療糖尿病的作用。本研究表明，MDG-1對(duì)多種生長因子都有調(diào)節(jié)作用,，其中對(duì)瘦素mRNA和蛋白的表達(dá)均有明顯的抑制作用,，說明MDG-1治療冠心病和糖尿病作用機(jī)理可能同調(diào)節(jié)瘦素通路有關(guān)。這一結(jié)果是對(duì)其以往藥理研究成果的重要補(bǔ)充,，為其臨床應(yīng)用提供了有利依據(jù),。對(duì)其他同MDG-1作用相關(guān)的生長因子的研究也將進(jìn)一步展開。