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欣美生物HIS*BIND的選擇介紹

來(lái)源:上海欣美生物科技有限公司   2013年09月09日 07:00  

各種His.Bind基質(zhì)的產(chǎn)品如何選擇:本文介紹帶Ni NTA瓊脂糖,、無(wú)Ni IDA瓊 脂糖、帶Ni的IDA瓊脂糖預(yù)裝柱,、無(wú)Ni IDA觸須甲?;i的IDA纖維素預(yù)裝筒,、帶Ni的IDA磁性瓊脂糖……等His.Bind基質(zhì)的特點(diǎn)和應(yīng)用,。

His.Bind基質(zhì)選擇指南:與任何純化介質(zhì)一樣,,His.Bind樹(shù)脂在接近結(jié)合載量時(shí)使用,可獲得zui干凈的分離效果

產(chǎn)品 類型 載量 特點(diǎn) 應(yīng)用
Ni-NTA His.Bind 樹(shù)脂 Ni NTA瓊脂糖 5-10 mg/ml

zui小的Ni2+浸出20mM b-ME相容

小到中量,,重力流柱推薦用于真核抽提物
Ni-NTA His.Bind Superflow Ni NTA瓊脂糖 5-10 mg/ml zui小的Ni2+浸出20mM b-ME相容高流速和壓力 小量到生產(chǎn)級(jí)FPLC或重力流柱推薦用于真核抽提物
His.Bind樹(shù)脂 無(wú)Ni IDA瓊 脂糖 8 mg/ml 可重復(fù)使用多次與His.Bind緩沖試劑盒兼容 小到中量重力流柱或批次模式
His.Bind柱(Cloumn) Ni的IDA瓊脂糖預(yù)裝柱 10 mg/次 預(yù)裝柱與His.Bind Quick緩沖試劑盒兼容 方便的純化重力流柱
His .Bind Fractogel(S) 無(wú)Ni IDA觸須甲?;?/span> >10 mg/ml 20-40mM顆粒大小高流速和壓力 小量到生產(chǎn)級(jí)FPLC或重力流柱高分辨率分離
His.Bind Fractogel(M) 無(wú)Ni IDA觸須甲酰化 >10 mg/ml 40-90mM顆粒大高流速和壓力 小量到生產(chǎn)級(jí)FPLC或重力流柱
His.Bind Quick 300筒( Ca rtridge) Ni的IDA纖維素預(yù)裝筒 0.5 mg/次 每端鎖緊接口與His.Bind Quick緩沖試劑盒配合使 用 注射器操作真空多支管操作快速純化
His.Bind Quick 900 筒(Cartridge) Ni的IDA纖維素預(yù)裝筒   2 mg/次 每端鎖緊接口 
His.Bind Quick緩沖試劑盒配合使用

注射器操作
真空多支管操作
快速純化  

His.Bind Quick 柱(Cloumn)   Ni的IDA纖維素預(yù)裝柱   5 mg/次   每端鎖緊接口與His.Bind Quick緩沖試劑盒配合使用 真空多支管操作快速純化多個(gè)樣品

His.Bind 磁化瓊脂糖珠  

Ni的IDA磁性瓊脂糖 5 mg/ml   3m磁性瓊脂糖珠   快速小量純化磁性分離適合高通量操作

His.Bind柱

His.Bind柱預(yù)裝了1.25ml柱床體積的Ni2+結(jié)合His.Bind樹(shù)脂,。頂部和底部的玻璃纖維確保上樣和走柱時(shí)緩沖液均勻流動(dòng)和zui小干擾,。使用BugBuster和Benzonase?核酸酶制備細(xì)菌裂解物可獲得較好效果。

His.Bind和His.Bind快速緩沖液試劑盒

His.Bind緩沖液試劑盒是一套經(jīng)過(guò)測(cè)試和優(yōu)化的緩沖液,,用于IDA His.Bind樹(shù)脂一步法純化蛋白,。包括的溶液可用于10根2.5ml柱的Ni2+結(jié)合、洗滌和洗脫,。除了8X Ni2+結(jié)合緩沖液(樹(shù)脂以Ni2+結(jié)合形式提供),,His.Bind快速緩沖液試劑盒與His.Bind緩沖液試劑盒成分*一樣。

Ni-NTA緩沖液試劑盒

Ni-NTA緩沖液試劑盒提供的一套緩沖液優(yōu)化用于在Ni-NTA His.Bind樹(shù)脂上純化His.Tag融合蛋白,。這些磷酸緩沖液與His.Bind緩沖液試劑盒中的Tris溶液不同,。用戶可以參考操作指南,使用4X濃縮液進(jìn)行結(jié)合,、洗滌和洗脫操作,。

BugBusterTM Ni-NTA His.Bind和His.Bind純化試劑盒

BugBuster蛋白抽提試劑是從大腸桿菌有效抽提可溶性蛋白的即用型溶液(不需要機(jī)械破碎細(xì)菌)。BugBuster Ni-NTA His.Bind和His.Bind純化試劑盒帶有BugBuster試劑(方便制備可溶性細(xì)胞抽提物)以及His.Tag融合蛋白親和純化的相應(yīng)樹(shù)脂,。兩個(gè)試劑盒都包括Benzonase核酸酶,,用于降低粘度并從蛋白制備物中去除核酸。BugBuster His.Bind純化試劑盒還包括層析緩沖液,。

His.Tag/His.Bind技術(shù)可用于純化His.Tag序列中的組氨酸與固定化金屬離子(通常為Ni2+),。zui常用的金屬螯合物包括NTA和IDA,在實(shí)際應(yīng)用中,,這兩種螯合物各有利弊,,因此要優(yōu)化條件,盡量減少非特異結(jié)合蛋白的共純化才能達(dá)到*實(shí)驗(yàn)結(jié)果,。

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