鈀碳加氫催化劑性狀:黑色微粒,。為附有鈀的活性炭,。耐硫化氫腐蝕。氫氟酸,、高氯酸,、磷酸、醋酸常溫下不腐蝕鈀,但鹽酸,、硫酸,、氫溴酸可輕微腐蝕鈀。硝酸,、氯化鐵,、次氯酸鹽和濕的鹵素會快速腐蝕鈀
鈀碳加氫催化劑常用生化試劑作用:
1、蛋白酶K:能水解消化蛋白質(zhì),,特別是與DNA結(jié)合的組蛋白,,在尿素和SDS中穩(wěn)定。一般工作濃度是50—100μg/ml,,推薦反應(yīng)緩沖液:50mM Tris-HCl (pH7.5),10mM CaCl2,。
2、SDS:十二烷基硫酸鈉,,溶解細胞膜上的脂類與蛋白質(zhì),,因而溶解膜蛋白而破壞細胞膜,并解離細胞中的核蛋白,,SDS 還能與蛋白質(zhì)結(jié)合而沉淀。
3,、IPTG:異丙基-β-D-硫代半乳糖苷,, 常用于藍白斑篩選及IPTG誘導(dǎo)的細菌內(nèi)的蛋白表達等。IPTG和乳糖的結(jié)構(gòu)相似,,所以它和乳糖一樣,,可以與乳糖操縱元的阻遏蛋白結(jié)合,使阻遏蛋白的空間構(gòu)像變化,,四聚體解聚成單體,,失去與操縱子特異性結(jié)合的能力,從而解除了阻遏蛋白的作用,,使其后的基因得以轉(zhuǎn)錄合成利用乳糖的酶類,。與乳糖不同的是,IPTG不被 β-半乳糖苷酶水解,。常與X-GAL一起用于藍白斑篩選,。作用*的誘導(dǎo)劑,不被細菌代謝而十分穩(wěn)定,。
4,、X-gal:5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷,是IPTG的顯色試劑,,在IPTG的催化下顯藍色,。常跟IPTG一起用與藍白斑篩選。
5、G418:一種抗生素,,對幾乎所有的細胞都有毒性,,是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染zui常用的選擇試劑。當neo基因被整合進真核細胞基因組合適的地方后,,則能啟動neo基因編碼的序列轉(zhuǎn)錄為mRNA,,從而獲得抗性產(chǎn)物氨基糖苷磷酸轉(zhuǎn)移酶的表達,使細胞獲得抗性而能在含有G418的選擇性培養(yǎng)基中生長,。G418的這一選擇特性 ,,已在基因轉(zhuǎn)移、基因敲除,、抗性篩選以及轉(zhuǎn)基因動物等方面得以廣泛應(yīng)用,。
6、DMSO:二甲基亞砜,。實驗室常用于作液體層析溶劑,,同時用作測試物質(zhì)紫外消光值上時用作參照物。能溶于所有烷烴和烯烴,。
7,、曲拉通X-100:TritonX-100,用的細胞裂解液成分之一,,在保護蛋白活性方面有一定作用,, 能力介于NP40和SDS之間,偏向于NP40,。
8,、NP-40:很溫和的去垢劑,1%濃度的基本可以破壞掉胞膜,,而對核膜破壞的作用弱,,結(jié)合特定的buffer可以獲得胞漿蛋白。
9,、BSA:牛血清白蛋白,, 主要起維持滲透壓作用、PH緩沖作用,、載體作用和營養(yǎng)作用,。在動物細胞無血清培養(yǎng)中,添加白蛋白可起到生理和機械保護作用和載體作用,。常用于蛋白定量中的內(nèi)參和抗體稀釋液,。
10、甲酰胺: 甲酰胺被用作凝膠電泳中RNA的穩(wěn)定劑,,也用于穩(wěn)定毛細管電泳中的變性單股DNA,。
11、TEMED:四甲基乙二胺。促凝劑,。在中性及堿性pH條件下,,加入TEMED可加速凝膠聚合。
12,、巰基乙醇:一種強還原劑,。可還原蛋白二硫鍵,,從而使蛋白保持溶解狀態(tài),,有利于與SDS的結(jié)合。使蛋白解離成單個亞基,。
13,、甲叉雙丙烯酰胺:N,N'-甲叉雙丙烯酰胺,,別名MBA,,又叫亞甲基雙丙烯酰胺,次甲基雙丙烯酰胺,,N,,N'-甲撐雙丙烯酰胺。作交聯(lián)劑與丙烯酰胺聚合而制備聚丙烯酰胺凝膠,。
14,、過硫酸銨:過硫酸銨(APS)的作用主要是提供自由基,然后在促凝劑TEMED的作用下使丙烯酰胺及甲叉丙烯酰胺聚合,。
15、B27:一種添加劑,,用于神經(jīng)肝細胞培養(yǎng),,被認為具有抑制膠質(zhì)細胞生長的作用。
16,、DTT:二硫蘇糖醇,,常用還原劑,既有抗氧化作用,。它能保護酶分子上的還原性基團,,維持還原性環(huán)境,穩(wěn)定酶的活性,。又是一種蛋白質(zhì)變性劑,,破壞二硫鍵,濃度不同,,起到的作用也不同,。
17、弗氏不*佐劑和弗氏*佐劑:弗氏*佐劑是一種油包水的乳濁液,含結(jié)核分枝桿菌的細胞壁成分,。佐劑活性來自于油滴中免疫原的持續(xù)釋放,,并刺激局部免疫反應(yīng)。弗氏不*佐劑用于初次免疫刺激,。為了減少副作用,,不含結(jié)核分枝桿菌成分的弗氏不*佐劑用于加強弗氏*佐劑是一種油包水的乳濁液,能夠非常有效的誘導(dǎo)產(chǎn)生高滴度的抗體,。弗氏*佐劑含結(jié)核分枝桿菌的細胞壁成分,,可以加強對抗原的抗體反應(yīng)。佐劑活性來自于油滴中免疫原的持續(xù)釋放,,并刺激局部免疫反應(yīng),。
18、吐溫 20:Tween-20 ,,常用的非離子去垢劑,。
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