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（一）操作室厭氧環(huán)境形成
1）按使用要求放置好必要的配件和器具,，并向操作室內放入兩個五毒塑料袋,。
2）混合氣瓶,、氮氣瓶輸入壓力調整,，調節(jié)減壓閥,，使輸入壓力為0.1Mpa
3）打開設備后配，電源開關后,，按控制牌上的總電源鍵,，使設備通電。
4）操作室放入1000g鈀粒（密封）和500g干燥劑,，并放入美蘭指示條,。
5）關緊取樣室內外門，并抽真空校驗,。（按控制面牌上真空泵鍵,，按一下開，再按一下關）
6）操作室內*次置換（氮氣置換）：
（1）先用橡皮管插入操作室內進氣口,，另一個插入塑料袋,。
（2）接通氮氣進氣路，打開操作室氮氣控制閥,，使兩只塑料袋充足氮氣后,，關閉電磁閥，然后扎緊袋口,。
（3）把乳膠手套套在觀察板法蘭圈上并扎緊
（4）把塑料袋內氮氣漸漸的放于操作室內,，至全部防除
7）操作室第二次置換（氮氣置換）重復一次沖氮過程，取樣室先抽真空,，并注意隨時按排氣閥關閉排氣,。
8）操作室第三次置換（混合氣體置換） （混合氣體配比為H2 1/85% H2 1/10% H2 1/10% CO2/15%）
（1）調換氣路打開操作室混合氣閥進氣，沖氣時取樣室先抽真空,，并注意隨時按排氣閥關閉排氣,。
（2）混合氣充滿塑料袋后,，關閉電磁閥，并打開混合氣限流閥,，使混合氣經過穩(wěn)流器,、流量計、調整流量計,，流量為每分鐘10毫升左右,。
（3）把塑料袋內混合氣漸漸排于操作室內。
（4）通過三次換氣后,，操作室內氣體含氧量已處于極為量狀態(tài)
9）操作室內打開鈀粒除氧劑,，接通除氧催化器電源進行催化除氧，并在厭氧指示條反應區(qū)上滴一點潔凈水,，1-2小時后,，觀察其變色情況，反應部分深藍色變?yōu)闇\藍為操作室內達到厭氧環(huán)境,。
注：1指示條可反復使用,，2 不可接觸蘭色反應區(qū)3包春在密封管內，防止在干燥處,。10紫外線滅菌燈,，室內進行滅菌處理，滅菌時間自定,。
（二）菌種的置入和培養(yǎng)
1）檢查取樣室內門并關緊之,。
2）打開取樣室外門，將菌種放入取樣室后即關上外們,。
3）取樣室充氮置換三次過程,，先抽真空度500毫米汞柱（66Kpa）以上停，然后打開取樣室氧氣閥進氣,，使指針回復零位,，關掉閥。取樣室充氮置換三次過程結束,。
4）如選定真空度較低就需要增加置換的次數(shù),。
5）取樣室外門開啟、關緊后,，再抽低真空度100毫米汞柱（13Kpa）檢驗,。
6）厭氧培養(yǎng)箱需要長期連續(xù)使用的條件
（1）每天在操作室內放入美蘭指示條觀察，如不能正常就必須重新?lián)Q氣,。
（2）要長期連續(xù)輸入微量的混合氣體,。使補進的氮氣能和微量的氮結合通過催化吸收，保證了室內厭氧狀態(tài)，補入混合氣流量選定為每分鐘10毫升左右,。
（3）.連續(xù)培養(yǎng)運行一天,，更換一次除氧劑和干燥劑。（換下的除氧劑和干燥劑可放在200℃干燥箱內,，干燥2－3小時可使其復原）
7）接種棒滅菌器的應用：
（1）隨時用鎳烙電熱絲使電極短路而變赤熱以進行殺菌（接種棒）,。
（2）熔蠟處可直接放上試管封蠟口旋轉熔蠟。
8）操作室理的培養(yǎng)箱理的培養(yǎng)箱內的溫度可任意選擇和控制,。
（三）注意事項
1．儀表盡可能地安裝于空氣清靜,，溫度變化較小的地方。
2．開機前應全面熟悉和了解各組成配套儀器,、儀表的說明書,、掌握正確的使用方法。
3．培養(yǎng)物放入必須是在操作室內達到厭氧環(huán)境后放入,。
4．如發(fā)生故障（停氣等原因）操作室內仍可保持12小時厭氧狀態(tài),。（超過12小時則根據(jù)需要把培養(yǎng)物取出另作處理）。
5．經常注意氣路有無漏氣現(xiàn)象,。
6．調換氣瓶時,，注意要扎緊氣管，避免流入含氧氣體
7．真空泵按要求使用,，定期檢查加油。
8．停止使用,，關閉總電源鍵,，及設備后部的電源開關
（四）常見故障及處理
| 現(xiàn)象 | 原理 | 處理 |
| 1、無電源 | 1,、插頭未插或短線 | 1,、插好插頭 |
| 2、熔斷器開路 | 2,、更換同型號熔絲管 | |
| 3,、電源開關壞 | 3、更換電源開關 | |
| 2,、培養(yǎng)箱不開蓋 | 1,、設定溫度低 | 1、調整設定溫度 |
| 2,、探頭壞 | 2,、更探頭 | |
| 3、操作室,、取樣室漏氣 | 1,、密封不好 | 1、用肥皂水校漏后用704密封 |
| 2,、年久橡皮圈老化 | 2,、更換橡皮圈 | |
| 4,、氣路不通 | 1,、氣閥壞 | 1,、更換氣閥 |
| 2,、皮管漏氣或脫落 | 2,、更換皮管 | |
| 3,、氣瓶氣用完 | 3,、更換氣體 | |
| 5,、燈不亮 | 1,、起輝器或燈不亮 | 1,、更換起輝器或燈管 |
| 2,、整流器燒壞 | 2、更換整流器 |
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