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如何判斷顯微鏡物鏡的優(yōu)劣

來源:上海澤途機(jī)電設(shè)備有限公司   2013年08月27日 16:34  

  顯微鏡光學(xué)系統(tǒng)的主要構(gòu)件是顯微鏡物鏡和目鏡,其任務(wù)是放大,并獲得清晰的圖像,,市場上顯微鏡物鏡種類很多,,究竟如何判斷物鏡的優(yōu)劣呢,?首先,,我們先來認(rèn)識下物鏡,。

一.物鏡的類型
      顯微鏡物鏡的優(yōu)劣直接影響顯微鏡成象的質(zhì)量,這與象差的校正有關(guān),因此,物鏡是根據(jù)象差校正的程度分類的.在*透鏡成象的象差分晰中已知:對映象質(zhì)量影響zui大的是球面差,、色差和象場彎曲,,前二項對映象*部分的清晰度有很大影響,,而彎場彎曲對攝影邊緣部分有極大影響,。
      這里,就常用的幾種物鏡特性說明如下,。
  ●消色差及平面消色差物鏡
     這兩種物鏡球差色差的校僅為黃,、綠、二個波區(qū),,仍然存在其他波區(qū)的球差和色差,,因而映象不有得到各色彩間的真實關(guān)系,當(dāng)焦點變動時可以看到殘余的色差,。但一般低倍放大時影響不大,。鑒于其黃綠波區(qū)校正較佳,使用時宜以黃綠光作為照明光源,,或在入色,、紅色濾光片,以免顯著暴露未校正的色差,。
     消色左物鏡常與福根目鏡或校正目鏡相配合,,用于低倍、中倍放大,。因其結(jié)構(gòu)較為簡單,,映象*部分象差大致可以校正,,價格又低,故應(yīng)用較多,。一般臺式顯微鏡物鏡多屬此類,。
     平面消色差物鏡對象場彎曲作了進(jìn)一步校正,因此投象平直,,使視域邊緣與中心能同時清晰成象,。所以適于金相顯微鏡攝影。
    ●復(fù)消色差物鏡及平面復(fù)消色差物鏡
    復(fù)消色差物鏡是由多組透鏡組合而成的,。色差的校正實際上等于可風(fēng)光的全部波區(qū),,但部分放大率色差仍然存在。當(dāng)其與福根目鏡或其它簡單組合目鏡配用時,,這些殘存的色差會使映像邊緣略帶色彩,。因此,需要與補(bǔ)償型目鏡配合使用,。復(fù)消色差物鏡對于光源無任何限制,,白光照明也可得到良好的效果。若加入藍(lán)色或黃色濾光片效果更佳,。它是顯微鏡中*良的一種物鏡,。
    平面消色差物鏡除進(jìn)一步作象彎曲的校正外,其它象差校正程度與復(fù)消色物鏡相同,。使用復(fù)消色差物鏡造象的平坦程度不如消色差物鏡,,而平面復(fù)消色段物鏡可使映象清晰、平坦,、進(jìn)一步提高成象質(zhì)量,。
    ●半復(fù)消色差物鏡
    顯微鏡就象差校正程度而言,半復(fù)消色差物鏡介于消色差與復(fù)消色差物鏡之間,,但其它光學(xué)性質(zhì)都與復(fù)消色差物鏡接近,。其售價較低廉,常用來替代復(fù)消色差物鏡,,使用時能與補(bǔ)償型目鏡相配合,。
    此外,尚有特殊用途的高溫反射物鏡,,折反型物鏡,、紫外線物鏡等,都在各顯微鏡中有專述,。
二.顯微鏡物鏡的性質(zhì)
    ●物鏡的數(shù)值孔徑
    顯微鏡物鏡的數(shù)值孔徑表征物鏡的聚光能力,,是物鏡的重要性質(zhì)之一,增強(qiáng)物鏡的聚光能力可提高物鏡的鑒別率。
    數(shù)值孔徑通常以符號“N.A.”表示(即Numerical Aperture),。根據(jù)理論的推導(dǎo)得出:
N.A.=n.sinu
式中    n──物鏡與觀察之間介質(zhì)的折射率,;
            u──物鏡的孔徑半角
    因此,有兩個提高數(shù)字孔徑的途徑:
    ●增大透鏡的直徑或減少物鏡的焦距,,以增大孔徑半角u。此法因?qū)е孪蟛钤龃蠹爸圃炖щy,,實際上sinu的zui大值只能達(dá)到0.95
    ●增加物鏡與觀察之間的折射率n,。是介質(zhì)對物鏡數(shù)值孔徑影響示意圖。當(dāng)光線沿光軸方向射向觀察物時,,自物體S處發(fā)出的反射光除沿SO方向反射外,,尚有(S1 S1′)(S2,S2′)等衍射光,。(a)是以空氣為介質(zhì)(又稱干系物鏡)的情況,,只有(S1 S1′)內(nèi)的衍射光可以通過物鏡,(S1 S1′)以外的衍射光如(S2,,S2′)均不能通過物鏡,。(b)是物鏡與觀察之間以松柏油或其它油為介質(zhì)(又稱油浸物鏡)時,由于折射率n增加,,使衍射光的角度變狹,,致使(S2,S2′)甚至(S3,,S′3)內(nèi)的衍射光均可通過物鏡,。因而使物鏡通過盡可能多的衍射光束,利于鑒別組織細(xì)節(jié),。
    在相同介質(zhì)中,,波長短的光源將有較大的折射率。同理,,也將有較多的衍射光束進(jìn)入物鏡,。
    一般高倍顯微鏡物鏡常設(shè)計為油鏡。油鏡是按某一介質(zhì)特別設(shè)計的,,因此應(yīng)按介質(zhì)使用,。zui常用的介質(zhì)是松柏油(n=1.515),其zui大數(shù)值孔徑N.A=1.40,;用a-壹代溴萘為介質(zhì),,n=1.658,zui高數(shù)值孔徑可達(dá)1.60,。
    ●物鏡的鑒別率及顯微鏡的有效放大倍數(shù)
    顯微鏡物鏡的鑒別率是指物鏡具有將兩個物點清晰分辨的zui大能力,,以兩個物點能清晰分辨的zui小距離d的倒數(shù)表示。d愈小,表示物鏡的鑒別率愈高,。
    要明白鑒別率可以有一定的限度,,這就要用光通過透鏡后產(chǎn)生衍射現(xiàn)象來解釋。物體通過光學(xué)儀器成象時,,每一物點對應(yīng)有一象點,,但由于光的衍射,物點的象不再是一個幾何點,,而是有一定大小的衍射亮斑,。靠近的兩個物點所成的象一兩個亮斑如果互相重疊,,則導(dǎo)致這兩個物點分辨不清,,從而限制了光學(xué)系統(tǒng)的分辨本領(lǐng)一分辨率。顯然,,象面上衍射圖象*亮斑半徑愈大,,系統(tǒng)的分辨本領(lǐng)愈小。
    如何確定物鏡的極限分辨率,,這可由物點A1,、A2通過透鏡后的衍射進(jìn)行分析。A1′,、A2′為物點A1,、A2的衍射圖象,呈同心環(huán)狀,。中心的光線強(qiáng)度zui大,,衍射環(huán)的光強(qiáng)度隨環(huán)直徑的增加而逐漸減弱。
    瑞利(Rayleigh)提出一個推測(又稱瑞利準(zhǔn)則):認(rèn)為當(dāng)A1′衍射花樣的*極小值正好落在A2′衍射花樣的極大值時,,A1,、A2是可以分辨的,將此時定出的兩物點距離A1,、A2作為光學(xué)統(tǒng)的分辨極限,。θ0稱為極限分辨角。不言而喻,,當(dāng)θ>θ0時是*可分辨的,,θ<θ0時是不可分辨的。
    由圓孔衍射理論得到:θ0=1.22λ / D
    式中λ──入射光波長,;
    D──入射光的zui大允許孔徑(透鏡直徑),。
    因為θ0很小,所以由圖2-4得:
                                                               d′≈θ0=1.22λS / D
    顯微鏡物鏡在設(shè)計時,,總是使它滿足阿貝正弦條件的,,即
                                                              ndsinu=n′d′sinu′
式中n和n′為物,、象所在空間的折射率,成象總是在空氣介質(zhì)中,,故n′=1,;u各u′分別為光線在物、象空間共軛點上的孔徑角,;d和d′分別為物點,、象點中心斑的間距。
    考慮到顯微鏡中入射光并非都是平行光,,有傾斜光線,,對上式系數(shù)作適當(dāng)?shù)男拚允街衝sinu就是物鏡的數(shù)值孔徑,,因此,上式或者寫:d=0.5λ  /N.A
    因此表明:物鏡的數(shù)值孔徑愈大,,入射光的波長愈短,,則物鏡的分辨能力愈高。在可見光中,,觀察時常用黃綠光(λ ≈4400A),,則可使分辨能力提高25%左右。
    對于光學(xué)金相顯微鏡,,若用藍(lán)色光,,采用油浸物鏡,那么物鏡的zui大分辨能力約為1600A,。
    金相顯微鏡的鑒別率zui高只能達(dá)到物鏡的鑒別率,,故物鏡的鑒別率又可稱為顯微鏡的鑒別率。因為目鏡是不能進(jìn)一步增大整個光學(xué)系統(tǒng)鑒別率的,,它zui多不過是用來保證物鏡鑒別率的充分利用,。若想進(jìn)一步提高顯微鏡的鑒別率應(yīng)采用更短波長的電子波,這就是電子顯微鏡,。
    在顯微鏡中保證物鏡的鑒別率充分利用時所對應(yīng)的顯微鏡的放大倍數(shù),,稱為顯微鏡的有效放大倍數(shù)。有效放大倍數(shù)可由以下關(guān)系推出:人眼在明視距離(250mm)處的分辨能力為0.15~0.30,,因此,,需將物鏡鑒別的距離d經(jīng)顯微鏡放大后成0.15~0.30mm方能被人眼分辨。若以M表示顯微鏡的放大倍數(shù),,則
d.m=0.15~0.30
M=0.15~0.30 / d=(0.15~0.30)(N.A.) / 0.5λ =0.3~0.6 N.A. / λ
此時的放大倍數(shù)即為顯微鏡的有效放大倍數(shù),,通常以M有效表示。因此
M有效=0.3~0.6N.A. / λ
由此可知:顯微鏡的有效放大倍數(shù)由物鏡的數(shù)值孔徑及入射光波長決定,。已知有效放大倍數(shù)就可以正確選擇物鏡和目鏡的配合,,以充分發(fā)揮物鏡的鑒別能力而又不致造成虛放大,。
    例如:選用N.A.=0.65的32×物鏡,
                    當(dāng)λ=5500A時,,
                                               M有效=(500~1000)N.A.=325~650×
因此,,應(yīng)選擇10~20倍的目鏡配用。如果目鏡的倍數(shù)低于10倍,,未充分發(fā)揮物鏡的鑒別能力,;如果目鏡的倍數(shù)高于20倍,將會造成虛放大,,仍不能顯示物鏡鑒別率的微細(xì)結(jié)構(gòu),。
    ●垂直鑒別率
    垂直鑒別率又稱景深,定義為在固定相點的情況下,,成象面沿軸向移動仍能保持圖象清晰的范圍,。表征物鏡對應(yīng)位于不同平面上目的物細(xì)節(jié)能否清晰成象的一個性質(zhì),垂直鑒別率的大小由滿意成象的平面的兩個極限位置(位于聚焦平面之前和之后)間的距離來量度,。
    如果人跟分辨能力為0.15~0.30mm,,n為目的物所在介質(zhì)的折射率,(N.A.)為物鏡的數(shù)值孔徑,,M為顯微鏡的放大倍數(shù),,則垂直鑒別率h可由下式求出:
h=n / (N.A.).M ×(0.15~0.30)mm
由上式可知:如果要求較大的垂直鑒別率,選用數(shù)值孔徑小的物鏡,,或減少孔徑光闌以縮小物鏡的工作孔徑,,這樣就不可避免降低了顯微鏡的分辨能力。這兩個矛盾因素,,只能被具體情況決定取舍,。
    ●物鏡的放大率
    由*章顯微鏡放大原理中可知:物鏡的放大率M=△/F物,這表明,,在確定了物鏡的焦距(F物)以后,,放大率隨顯微鏡的光學(xué)鏡筒長(△)而變化。只有確定了光學(xué)顯微鏡筒長△以后,,物鏡的放大率才有意義,。因此,物鏡的放大率是按設(shè)計的光學(xué)鏡筒長來標(biāo)定的,,必須在的鏡筒長度上使用,,否則其放大倍數(shù)將改變。
    ●顯微鏡鏡筒長度
物鏡的像差是依據(jù)一定位置的映象來校正的,。如是以光學(xué)鏡筒長為△時校正的透鏡成象情況:G(綠光)R(紅光)均成象于O′處,,沒有象差:(a)(c)分別為鏡筒短于及長于原設(shè)計時的情況,使象差復(fù)又呈現(xiàn),。因此,,物鏡一定要在規(guī)定的機(jī)械鏡筒長度的距離,,對的一套光學(xué)儀器是固定不變的。一般顯微鏡的機(jī)械鏡筒長度多數(shù)為160mm,,170mm,,190mm,此外,,金相顯微鏡在攝影時,,由于放大倍率不同,映象投射距離變動成象,,物鏡的象差均已校正,。
三.顯微鏡物鏡的性能標(biāo)志
    物鏡的主要性能已標(biāo)注在物鏡的外殼上,內(nèi)容包括:
    ●物鏡類型
      國產(chǎn)物鏡標(biāo)有物鏡類別的漢語拼音字頭,,如平面消色差物鏡標(biāo)“PC”
      西歐各國產(chǎn)物鏡多標(biāo)有物鏡類別的英文名稱或字頭,,如平面消色差物鏡標(biāo)以“Plana—pchromatic或PI”,消色差物鏡標(biāo)以“Achromatic”復(fù)消色差物鏡標(biāo)有“Apochromatic”
    ●放大倍數(shù)
      如標(biāo)以15×,,20×,,32×,40×等分別表示其放大倍數(shù)為15倍,,20倍。32倍,,40倍,。
    ●顯微鏡數(shù)值孔徑
      物鏡數(shù)值孔徑的數(shù)值均有直接標(biāo)注,如0.30,,0.65,,0.95等分別表示物鏡的數(shù)值孔徑為0.30,0.65,,0.95
    ●適用的機(jī)械鏡筒長度
      如標(biāo)有170mm,,190mm,∞/0分別表示物鏡適用的機(jī)械筒長度為170mm,,190mm,,無限長。
    ●油浸物鏡
      凡油浸物鏡均有特別標(biāo)志,,刻以HI,,oil,國產(chǎn)物鏡刻以“油”或漢語拼

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