色譜柱的日常維護方法：

一,、去除樣品和流動相中的固體顆粒
樣品和流動相中含有的固體顆粒物質(zhì)會堵塞色譜柱篩板,，篩板被堵住不僅會引起柱壓的升高，而且也會引起柱效下降,，因為篩板的堵塞會引起液流不均,，導(dǎo)致色譜峰型拖尾、變寬,，從而使柱效下降,。因此，建議使用超純水和色譜純試劑,，在分析樣品前對樣品進(jìn)行針筒過濾,，流動相過0.45μm濾膜。

二,、流動相的pH應(yīng)在使用的范圍內(nèi)
由于填料中存在Si-C和Si-O鍵,，流動相超過其pH范圍將會導(dǎo)致硅膠基質(zhì)流失和鍵合相碳鏈斷裂，使柱效下降,，使用壽命變短,。由于流動相的pH 控制不當(dāng)而對色譜柱造成的損害，通常很難使色譜柱恢復(fù),，因此必須認(rèn)真對待,，嚴(yán)格控制流動相的pH值,。

三、使用保護柱或在線過濾器
樣品和流動相經(jīng)過濾后并不能*消除固體顆粒物質(zhì),，因為泵的磨損,、密封圈和管路的老化也會產(chǎn)生固體顆粒物質(zhì)，這些固體顆粒被流動相帶入色譜柱,，堵塞篩板,，導(dǎo)致柱壓升高、柱效下降,。保護柱和在線過濾器上都有篩板,，其孔徑與色譜柱孔徑相同，因此可以阻止固體顆粒物質(zhì)到達(dá)色譜柱,，有效防止色譜柱篩板的堵塞,。由于柱壓升高在分析故障中占很大比例，因此,，除對樣品和流動相進(jìn)行過濾外,，建議您在色譜柱進(jìn)樣端加上保護柱或在線過濾器。
如果確認(rèn)色譜柱柱壓升高是由于進(jìn)樣端篩板被堵引起的,，可選擇以下方式進(jìn)行補救：
1,、先在色譜柱前加上保護柱或在線過濾器，然后用甲醇,、水=20/80ml/min反向沖色譜柱180min,。
2、先在色譜柱進(jìn)樣端加上保護柱或在線過濾器,，然后反向使用,。

四、正確使用緩沖鹽
緩沖鹽通常易溶于水,，難溶于有機溶劑,，因此緩沖鹽使用不當(dāng)會使其析出，堵塞填料基質(zhì)上的微孔和顆粒間的空隙,，使填料板結(jié),，柱壓上升；同時阻礙了基質(zhì)上鍵合的碳鏈自由舒展,，使色譜柱的保留能力下降,，柱效降低。緩沖鹽析出后,，去除非常困難,，因此，正確的使用緩沖鹽對延長色譜柱使用壽命非常重要,。
正確使用緩沖鹽的目的是防止緩沖鹽析出,，因此正確使用緩沖鹽的方法可歸結(jié)為一句話：使用前要過濾,，使用后要沖洗。具體方法如下：
1,、等度條件：使用緩沖鹽前和使用后需用過渡流動相以1.0ml/min流速沖洗60min,；使用后去除緩沖鹽的另一個方法是用過渡流動相以0.2ml/min流速沖洗色譜柱。
2,、梯度條件：用含有緩沖鹽的流動相跑梯度之前,，用與初始流動相組成相同的過渡流動相以1.0ml/min流速沖洗60min，再用該過渡流動相以1.0ml/min沖洗色譜柱120min,。含緩沖鹽流動相的梯度設(shè)定應(yīng)盡量平緩,，以避免梯度過程中緩沖鹽析出。
注意：過渡流動相是指有機相和水相的組成與分析流動相相同,，區(qū)別只是過渡流動相不含緩沖鹽,。
3、緩沖鹽析出的補救方法：
1）方案1：用甲醇/20/80以1.0ml/min流速35攝氏度條件下反向沖洗色譜柱120min
2）方案2：用甲醇/水=20/80以0.2ml/min流速反向沖洗色譜柱,。

五,、防止強保留物質(zhì)在色譜柱上存留
強保留物質(zhì)和大分子化合物在色譜柱中累積，對樣品中的化合物產(chǎn)生額外的保留行為,，不僅引起峰型變寬,、拖尾，使柱效下降,，同時也會引起保留時間的變化,，累積到一定程度時還會導(dǎo)致柱壓升高。由于強保留物質(zhì)和大分子化合物對色譜分離的影響是一個累積效應(yīng),，需要一定的時間才會體現(xiàn)出來，但對許多藥品特別是復(fù)雜樣品而言,，很難判斷其是否是含有強保留物質(zhì),，因此要防止強保留物質(zhì)的累積，需要在每天的日常維護中用純甲醇或乙氰清洗色譜柱,。 clin-lab.com
清洗方法：
1,、未使用緩沖鹽：每天分析完成后，先用上述方法除去緩沖鹽,，然后再用甲醇或乙氰反向沖洗色譜柱60min,。
2、使用過緩沖鹽：分析完成后,，先用上述方法除去緩沖鹽,，然后在用純甲醇或乙氰反向沖洗色譜柱60min
3、補救方法：
水——乙氰——氯仿（或異丙醇）——乙氰——水
每一步以1.0ml/min流速反向沖洗色譜柱60min,。
 

日常維護注意事項：

（1）流動相的PH值應(yīng)有使用范圍內(nèi)
由于流動相的PH 控制不當(dāng)而對色譜柱造成的損害,，通常很難是色譜柱恢復(fù),，因此必須認(rèn)真對待，嚴(yán)格控制流動相的PH值,。

（2）去除樣品和流動相中的固體顆粒
樣品和流動相中含有的固體顆粒物質(zhì)會堵塞色譜柱篩板,，篩板被堵住不僅會引起柱壓的升高，而且也會引起柱效下降,，因為篩板的堵塞會引起液流不均,，導(dǎo)致色譜峰型拖尾、變寬,，從而使柱效下降,。因此，建議使用超純水和色譜純試劑,，在分析樣品前對樣品進(jìn)行針筒過濾,，流動相過0.45μm濾膜。

（3）使用保護柱或在線過濾器
樣品和流動相經(jīng)過濾后并不能*消除固體顆粒物質(zhì),，因為泵的磨損,、密封圈和管路的老化也會產(chǎn)生固體顆粒物質(zhì)，這些固體顆粒被流動相帶入色譜柱,，堵塞篩板,，導(dǎo)致柱壓升高、柱效下降,。保護柱和在線過濾器上都有篩板,，其孔徑與色譜柱孔徑相同，因此可以阻止固體顆粒物質(zhì)到達(dá)色譜柱,，有效防止色譜柱篩板的堵塞,。由于柱壓升高在分析故障中占很大 比例，因此,，除對樣品和流動相進(jìn)行過濾外,，建議您在色譜柱進(jìn)樣端加上保護柱或在線過濾器。