操作步驟 

可能原因 

解決辦法 

選擇試劑

選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。 

加樣

1.血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣,； 
2.手工操作中,，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長（特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)）； 
3.加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外,。 

1.標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后,，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,，采血后必須立即顛倒采血管混合5-10次,，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘,；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中,，若要貯存,，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2.加樣后及時(shí)放入孵箱,。 
3.加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干,。 
4.如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑,。 
5.標(biāo)本較多時(shí),，請分批操作。 

孵育

1.孵育時(shí)未貼封片或加蓋,，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),，吸附于孔壁，難于清洗*,； 
2.孵育時(shí)間人為延長,，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*,。 

1.貼封片或加蓋,； 
2.按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間,。 

洗板

1.采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2.采用半自動洗板機(jī)洗板時(shí),，洗液量不足,，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞,，抽吸不*,；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差,。 
3.反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長,。 

1.保證洗液注滿各孔，洗板針暢通,，洗完板后在吸水紙（選擇干凈,、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2.合理安排,，或多用幾臺洗板機(jī),。 

顯色

1. 顯色劑配制后放置時(shí)間過長或使用過期顯色劑； 
2. 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流,。 

1. 顯色劑盡量在臨用前配制,，堅(jiān)持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用,； 
2. 加樣時(shí)保持顯色劑不外流,； 
3.A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械,。 

終止

加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,，導(dǎo)致假陽性增加。 

加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡,。 

讀板

讀板時(shí)板底不清潔,。 

應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。 

全過程

1.整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 
2.實(shí)現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化,，有效提高檢測質(zhì)量,。