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通善知道之血清介紹及常見問題

來源:上海通善生物科技有限公司   2013年06月26日 09:10  

 上海通善生物科技有限公司提供各種血清

 血清類別

   胎牛血清,、透析型胎牛血清,、天然低IGG胎牛血清,、干細胞培養(yǎng)胎牛血清,、特殊用途胎牛血清,、活性炭/葡萄糖處理胎牛血清、胎牛血清替代物,、小牛血清,、新生牛血清、加強型小牛血清,、補鐵小牛血清,、血清、供體血清,、血清,、血清、血清,、血清,、其他動物血清、合成血清替代品,。
血清主要成分
  血清是由血漿去除纖維蛋白原而形成的一種很復(fù)雜的混合物,,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,,且血清組成及含量常隨供血動物的性別,、年齡生理條件和營養(yǎng)條件不同而異,。血清是血漿中不含纖維蛋白原的膠狀液體,具有維持血液的正常粘度,、酸堿度、滲透壓等作用,。它主要由水和各種化學(xué)成分組成,這些化學(xué)成分包括白蛋白,、α1、α2,、β,、γ-球蛋白,甘油三酯,總膽固醇,谷丙轉(zhuǎn)氨酶等。血清中含有各種血漿蛋白,、多肽,、脂肪碳水化合物,、生長因子,、激素,、無機物等,這些物質(zhì)對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的,。對血清的成分和作用的研究雖有很大進展,,但仍存在一些問題。主要是: 
  *:血清的成份可能有幾百種之多,,目前對其準(zhǔn)確的成份,、含量及其作用機制仍不清楚,尤其是對其中一些多肽類生長因子,、激素和脂類等尚未充分認識,,這給研究工作帶來許多困難; 
  第二:血清都是批量生產(chǎn),,各批量之間差異很大,,因此,要保證每批血清的相似性極為困難,,從而使實驗的標(biāo)準(zhǔn)化和連續(xù)性受到限制,; 
第三:不能排除血清中含有易變物質(zhì),這被認為是“瓶中惡化”的原因之一,。
血清鑒別方法
血清
  血液凝固析出的淡黃色透明液體,。如將血液自血管內(nèi)抽出,放入試管中,,不加抗凝劑,,則凝血反應(yīng)被激活,血液迅速凝固,,形成膠凍,。凝血塊收縮,其周圍所析出之淡黃色透明液體即為血清,,也可于凝血后經(jīng)離心取得,。在凝血過程中,纖維蛋白原轉(zhuǎn)變成纖維蛋白塊,,所以血清中無纖維蛋白原,,這一點是與血漿zui大的區(qū)別。而在凝血反應(yīng)中,,血小板釋放出許多物質(zhì),,各凝血因子也都發(fā)生了變化。這些成分都留在血清中并繼續(xù)發(fā)生變化,,如凝血酶原變成凝血酶,,并隨血清存放時間逐漸減少以至消失。這些也都是與血漿區(qū)別之處,。但大量未參加凝血反應(yīng)的物質(zhì)則與血漿基本相同,。為避免抗凝劑的干擾,,血液中許多化學(xué)成分的分析,都以血清為樣品,。 
血漿
血液成分
    血漿是血液的液體成分,血細胞懸濁于其中,。人體含有2750-3300毫升血漿,,約占血液總體積的55%。血漿的絕大部分是水(體積的90%),,其中溶解的物質(zhì)主要是血漿蛋白,,還包括葡萄糖、無機鹽離子,、激素以及二氧化碳,。血漿的主要功能是運載血細胞,同時也是運輸分泌產(chǎn)物的主要媒介,。
    將新鮮血液離心,,使血細胞沉降,上層淡黃色清液即是血漿,。血漿與血清的區(qū)別是血清中不含纖維蛋白原等凝血因子,。 
       
血清主要作用
  ●提供基本營養(yǎng)物質(zhì):氨基酸、維生素,、無機物,、脂類物質(zhì)、核酸衍生物等,,是細胞生長必須的物質(zhì),。 
  ●提供激素和各種生長因子:胰島素、腎上腺皮質(zhì)激素(氫化可di松,、地塞米松),、類固醇激素(雌二醇、睪酮,、孕酮)等,。生長因子如成纖維細胞生長因子、表皮生長因子,、血小板生長因子等,。 
  ●提供結(jié)合蛋白:結(jié)合蛋白作用是攜帶重要地低分子量物質(zhì),如白蛋白攜帶維生素,、脂肪,、以及激素等,轉(zhuǎn)鐵蛋白攜帶鐵,。結(jié)合蛋白在細胞代謝過程中起重要作用,。 
  ●提供促接觸和伸展因子使細胞貼壁免受機械損傷,。 
 ●對培養(yǎng)中的細胞起到某些保護作用:有一些細胞,如內(nèi)皮細胞,、骨髓樣細胞可以釋放蛋白酶,,血清中含有抗蛋白酶成分,起到中和作用,。這種作用是偶然發(fā)現(xiàn)的,,現(xiàn)在則有目的的使用血清來終止胰蛋白酶的消化作用。因為胰蛋白酶已經(jīng)被廣泛用于貼壁細胞的消化傳代,。血清蛋白形成了血清的粘度,,可以保護細胞免受機械損傷,特別是在懸浮培養(yǎng)攪拌時,,粘度起到重要作用,。血清還含有一些微量元素和離子,他們在代謝解毒中起重要作用,,如SeO3,,硒等
血清常見問題
一,、保存血清的方法,?
  血清應(yīng)保存在-5℃至-2O℃。然而,,若存放于4℃時,,請勿超過一個月。若您一次無法用完一瓶,,建議將無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),,再放回冷凍。 
二,、如何解凍血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損,?
  將血清從冷凍箱取出后,先置于2-8℃冰箱使之溶解,,然后在室溫下使之全溶,。但必須注意的是,溶解過程中必須規(guī)則地搖晃均勻,。 
三,、如何避免沉淀物的產(chǎn)生?
  1. 解凍血清時,請按照所建議的逐步解凍法(-2O℃至4℃至室溫),,若血清解凍時改變的溫度太大(如-20℃至37℃),,實驗顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。 
  2. 解凍血清時,請隨時搖晃均勻,,使溫度及成分均一,,減少沉淀發(fā)生 
  3. 請勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,,血清會變得混濁,,同時血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會因此受到損害,而影響血清的質(zhì)量,。 
  4. 血清熱滅活非常容易造成沉淀物增多,,若非必要,可無須做此步驟,。 
  5. 若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,,30分鐘的原則,,并且隨時搖晃均勻。溫度過高,,時間過久或搖晃不均勻,,都會造成沉淀物的增多。 血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),,該如何處理,?欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi),,以400g稍微離心,,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。但不建議以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,,因為它可能會阻塞過濾膜,。 
四、何謂熱滅活?
  一般是以56℃,,30分鐘來處理已解凍的血清,,因為此加熱步驟,可以使補體去活化,,而補體所參與的反應(yīng)有:溶細胞活性,,平滑肌的收縮,肥大細胞和血小板組胺的釋放,,增強吞噬作用,,淋巴細胞、巨噬細胞的趨化和激活,。 
五,、有必要做熱滅活嗎?
  實驗顯示,經(jīng)過正確處理的熱滅活血清,,對大多數(shù)的細胞而言是不需要的,。經(jīng)此處理過的血清對細胞的生長只有微小的促進,,或*沒有任何作用,甚至通常因為高溫處理影響了血清的質(zhì)量,,而造成細胞生長速率的降低,。而經(jīng)過熱處理的血清,沉淀物的形成會顯著的增多,,這些沉淀物在倒立顯微鏡下觀察,,像是"小黑點",常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染,,而把血清放在37℃環(huán)境中,,又會使此沉淀物更增多,使研究者誤認為是微生物的分裂擴增,。 
因此我們建議您,,若非必須,您可以不需要做熱處理這一步,。如此一來,,不但節(jié)省您寶貴的時間,更確保您血清的質(zhì)量!另外,,購買已滅活成品也不失一個捷徑,,請在購買的時候注意詢問廠家是否是已滅活血清。

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