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生物素連接酶(Biotin Ligase)
產(chǎn)品簡介
生物素連接酶(Biotin Ligase, BirA, EC 6.3.4.15)是大腸桿菌BirA基因編碼的雙功能蛋白質(zhì),,能識別蛋白質(zhì)分子的特異序列(BirA Substrate Peptide),,使蛋白質(zhì)生物素化。該酶帶有6×His標簽,,剪切反應完畢后可通過Ni-NTA(產(chǎn)品貨號:PAN001)去除,。
來源
重組蛋白質(zhì)(E.coli)
活力單位定義
在30℃,30分鐘內(nèi),,將1 pmol 蛋白質(zhì)或者多肽(融合BSP序列)生物素化所需要的酶量定義為一個活力單位,。
純度
純度 > 95%,沒有檢測到其他蛋白酶活力,。
應用
生物素標記融合BSP的蛋白質(zhì),。
儲存條件
冰袋運輸;分裝保存,,避免反復凍融,;長期保存-20℃,短期可在4℃保存數(shù)星期,。
反應體系
組分 | 體積(μl) | 終濃度 |
---|---|---|
10X buffer A | 2.5 | 1X |
10X buffer B | 2.5 | 1X |
Biotin Ligase(1kU/μL) | 1.5 | 45 U/μl |
蛋白或者多肽底物 (1 nmol) | 18.5 | 40 μM |
注意事項
- 不同的BSP序列,,生物素化反應所需要的時間可能會有不同,。
- 反應底物量比較大的時候,,可以同時放大反應體系?;蛘叩鞍?多肽的濃度加大一倍,,補加2.5ul的D-Biotin。
- 底物濃度低的時候,,需要孵育的時間要延長,。
- 需要較低的溫度孵育時候,反應時間要加長
- 氯化鈉(>100mM),甘油(>5%),硫酸銨(>50mM)等常用緩沖液成分會抑制酶的活力,。所以底物盡量保存在低鹽的溶液中,。
產(chǎn)品規(guī)格
貨號 | 規(guī)格 | 包裝規(guī)格 | |||
---|---|---|---|---|---|
Biotin Ligase | 10X buffer A | 10X buffer B | D-Biotin | ||
RPE004-100 | 100 kU | 100 μl | 200 μl | 200 μl | 200 μl |
RPE004-500 | 500 kU | 500 μl | 1 ml | 1 ml | 1 ml |
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