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生物素連接酶(Biotin Ligase)介紹

來源:上海通善生物科技有限公司   2013年06月17日 10:11  

 上海通善生物科技有限公司提供zui的

生物素連接酶(Biotin Ligase)

產(chǎn)品簡介

生物素連接酶(Biotin Ligase, BirA, EC 6.3.4.15)是大腸桿菌BirA基因編碼的雙功能蛋白質(zhì),,能識別蛋白質(zhì)分子的特異序列(BirA Substrate Peptide),,使蛋白質(zhì)生物素化。該酶帶有6×His標簽,,剪切反應完畢后可通過Ni-NTA(產(chǎn)品貨號:PAN001)去除,。

來源

重組蛋白質(zhì)(E.coli)

活力單位定義

在30℃,30分鐘內(nèi),,將1 pmol 蛋白質(zhì)或者多肽(融合BSP序列)生物素化所需要的酶量定義為一個活力單位,。

純度

純度 > 95%,沒有檢測到其他蛋白酶活力,。

應用

生物素標記融合BSP的蛋白質(zhì),。

儲存條件

冰袋運輸;分裝保存,,避免反復凍融,;長期保存-20℃,短期可在4℃保存數(shù)星期,。

反應體系

組分 體積(μl) 終濃度
10X buffer A 2.5 1X
10X buffer B 2.5 1X
Biotin Ligase(1kU/μL) 1.5 45 U/μl
蛋白或者多肽底物 (1 nmol) 18.5 40 μM
30℃,,溫浴30分鐘。

注意事項

 

  1. 不同的BSP序列,,生物素化反應所需要的時間可能會有不同,。
  2. 反應底物量比較大的時候,,可以同時放大反應體系?;蛘叩鞍?多肽的濃度加大一倍,,補加2.5ul的D-Biotin。
  3. 底物濃度低的時候,,需要孵育的時間要延長,。
  4. 需要較低的溫度孵育時候,反應時間要加長
  5. 氯化鈉(>100mM),甘油(>5%),硫酸銨(>50mM)等常用緩沖液成分會抑制酶的活力,。所以底物盡量保存在低鹽的溶液中,。

 

產(chǎn)品規(guī)格

貨號 規(guī)格 包裝規(guī)格
Biotin Ligase 10X buffer A 10X buffer B D-Biotin
RPE004-100 100 kU 100 μl 200 μl 200 μl 200 μl
RPE004-500 500 kU 500 μl 1 ml 1 ml 1 ml

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