分光光度計(jì)介紹：

分光光度計(jì)已經(jīng)成為現(xiàn)代分子生物實(shí)驗(yàn)室常規(guī)儀器。常用于核酸,，蛋白定量以及細(xì)菌生長濃度的定量,。分光光度計(jì)就是利用分光光度法對物質(zhì)進(jìn)行定量定性分析的儀器,。該儀器是食品廠,、飲用水廠辦理QS,、HACCP認(rèn)證的*檢驗(yàn)設(shè)備。

分光光度計(jì)原理：

分光光度計(jì)采用一個(gè)可以產(chǎn)生多個(gè)波長的光源,，通過系列分光裝置,，從而產(chǎn)生特定波長的光源，光線透過測試的樣品后,，部分光線被吸收,，計(jì)算樣品的吸光值，從而轉(zhuǎn)化成樣品的濃度,。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比,。

分光光度計(jì)組成：主要由光源、單色器,、樣品室,、檢測器、信號處理器和顯示與存儲系統(tǒng)組成,。

分光光度定義：

分光光度法是通過測定被測物質(zhì)在特定波長處或一定波長范圍內(nèi)光的吸收度,，對該物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析。

常用的波長范圍：

（1）200～400nm的紫外光區(qū)

（2）400～760nm的可見光區(qū)

（3）2.5～25μm（按波數(shù)計(jì)為4000cm<-1>～400cm<-1>）的紅外光區(qū)

所用儀器為紫外分光光度計(jì),、可見光分光光度計(jì)（或比色計(jì)）,、紅外分光光度計(jì)或原子吸收分光光度計(jì)。為保證測量的精密度和準(zhǔn)確度,，所有儀器應(yīng)按照國家計(jì)量檢定規(guī)程或本附錄規(guī)定,，定期進(jìn)行校正檢定。

分光光度計(jì)的重要配件—— 比色杯

比色杯按照材質(zhì)大致分為石英杯,、玻璃杯以及塑料杯,。根據(jù)不同的測量體積，有比色杯和毛細(xì)比色杯等,。一般測試核酸和紫外定量蛋白,，均采用石英杯或者玻璃杯，但是不適合比色法測定,。因?yàn)榉磻?yīng)中的染料（如考馬斯亮蘭）能讓石英和玻璃著色,，所以必須采用一次性的塑料杯。而塑料杯一般不適合用于在紫外范圍內(nèi)測試樣品,。

分光光度計(jì)操作方法：

1.接通電源,，打開儀器開關(guān)，掀開樣品室暗箱蓋,，預(yù)熱10分鐘,。

2.將靈敏度開關(guān)調(diào)至“1”檔（若零點(diǎn)調(diào)節(jié)器調(diào)不到“0”時(shí)，需選用較）,。

3.根據(jù)所需波長轉(zhuǎn)動(dòng)波長選擇鈕,。

4.將空白液及測定液分別倒入比色杯3/4處,，用擦鏡紙擦清外壁，放入樣品室內(nèi),，使空白管對準(zhǔn)光路,。

5.在暗箱蓋開啟狀態(tài)下調(diào)節(jié)零點(diǎn)調(diào)節(jié)器，使讀數(shù)盤指針指向t=0處,。

6.蓋上暗箱蓋,，調(diào)節(jié)“100”調(diào)節(jié)器，使空白管的t=100,，指針穩(wěn)定后逐步拉出樣品滑竿,，分別讀出測定管的光密度值，并記錄,。

7.比色完畢,，關(guān)上電源，取出比色皿洗凈,，樣品室用軟布或軟紙擦凈,。

分光光度計(jì)注意事項(xiàng)：

1．該儀器應(yīng)放在干燥的房間內(nèi)，使用時(shí)放置在堅(jiān)固平穩(wěn)的工作臺上,，室內(nèi)照明不宜太強(qiáng),。熱天時(shí)不能用電扇直接向儀器吹風(fēng)，防止燈泡燈絲發(fā)亮不穩(wěn)定,。

2．使用本儀器前,，使用者應(yīng)該首先了解本儀器的結(jié)構(gòu)和工作原理，以及各個(gè)操縱旋鈕之功能,。在未按通電源之前,，應(yīng)該對儀器的安全性能進(jìn)行檢查，電源接線應(yīng)牢固,，通電也要良好,，各個(gè)調(diào)節(jié)旋鈕的起始位置應(yīng)該正確，然后再按通電源開關(guān),。

3．在儀器尚未接通電源時(shí),，電表指針必須于“0”刻線上，若不是這種情況,，則可以用電表上的校正螺絲進(jìn)行調(diào)節(jié),。