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高速逆流色譜儀的優(yōu)勢
高速逆流色譜（high-speed countercurrent chromatography,，簡稱HSCCC） 是一種較新型的液—液分配色譜,由美國國立健康研究院（National Institute of Health, U.S.A.）Ito博土zui先研制開發(fā)后由北京市新技術(shù)應(yīng)用研究所在國內(nèi)開展研發(fā)和推廣工作,。其原理是基于樣品在旋轉(zhuǎn)螺旋管內(nèi)的互不混溶的兩相溶劑間分配不同而獲得分離，因而無須任何固體載體或支撐體,，能達(dá)到在短時(shí)間內(nèi)實(shí)現(xiàn)分離和制備,，并且可以達(dá)到幾千個(gè)理論塔板數(shù)。與其他柱色譜相比較,，它克服了固定相載體帶來的樣品吸附,、損失,、污染和峰形施尾等缺點(diǎn)[3]。目前此項(xiàng)技術(shù)已被應(yīng)用于生化,、生物工程,、醫(yī)藥、天然產(chǎn)物化學(xué),、有機(jī)合成,、環(huán)境分析、食品,、地質(zhì),、材料等領(lǐng)域[5]。我國是繼美國,、日本之后zui早開展逆流色譜應(yīng)用的國家,，俄羅斯、法國,、英國,、瑞士等國也都開展了此項(xiàng)研究。美國FDA及世界衛(wèi)生組織（WHO）都引用此項(xiàng)技術(shù)作為抗生素成分的分離檢定,，90年代以來,，高速逆流色譜被廣泛地應(yīng)用于天然藥物成分的分離制備和分析檢定中。
1. 高速逆流色譜儀原理及特點(diǎn)
HSCCC利用了一種特殊的流體動力學(xué)（單向流體動力學(xué)平衡）現(xiàn)象,。具體表現(xiàn)為一根100多米長的螺旋空管,，注入互不相溶的兩相溶劑中的一相作為固定相，然后作行星運(yùn)動,；同時(shí)不斷注入另一相（流動相）,，由于行星運(yùn)動產(chǎn)生的離心力場使得固定相保留在螺旋管內(nèi)，流動相則不斷穿透固定相,；這樣兩相溶劑在螺旋管中實(shí)現(xiàn)的接觸,、混合,、分配和傳遞,。由于樣品中各組分在兩相中的分配比不同，因而能使樣品中各組分得到分離,。
2. HSCCC的優(yōu)點(diǎn)
HSCCC主要具有以下幾個(gè)方面的優(yōu)點(diǎn),。
2.1 應(yīng)用范圍廣，適應(yīng)性好,。由于溶劑系統(tǒng)的組成與配比可以是無限多的,，因而從理論上講HSCCC適用于任何極性范圍的樣品的分離，所以在分離天然化合物方面具有其獨(dú)到之處,。并因不需固體載體,，而消除了氣液色譜中由于使用載體而帶來的吸附現(xiàn)象,，特別適用于分離極性物質(zhì)和其它具有生物活性的物質(zhì)。
2.2 操作簡便,，容易掌握,。分離過程中對樣品的前處理要求低，僅需一般的粗提物即可進(jìn)行HSCCC的制備分離或分析,。
2.3 回收率高,。由于沒有固體載體，不存在吸附,、降解和污染,，理論上樣品的回收率可達(dá)100％。在實(shí)驗(yàn)中只要調(diào)整好分離條件,，一般都有很高的回收率,。
2.4 重現(xiàn)性好。如果樣品不具有較強(qiáng)的表面活性作用,，酸堿性也不強(qiáng),，那么多次進(jìn)樣，其分離過程穩(wěn)定性都保持很好,、峰的保留相對標(biāo)準(zhǔn)偏差也小于2%,，重現(xiàn)性相當(dāng)好。
2.5 分離效率高,，分離量較大,。由于其與一般色譜的分離方式不同，能實(shí)現(xiàn)梯度操作和反相操作,、亦能進(jìn)行重復(fù)進(jìn)樣,，使其特別適用于制備性分離，產(chǎn)品純度高,。研究結(jié)果表明:一臺普通的高速逆流色譜儀一次進(jìn)樣可達(dá)幾十毫升,，一次可分離近10g的樣品。因此,，在80年代后期被廣泛地應(yīng)用于植物化學(xué)成分的分離制備研究
北京艾美林科技有限公司
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