（1）波長(zhǎng)校正：使用光電比色計(jì)或分光光度計(jì),，在更換光源燈,、重新安裝,、搬運(yùn)或檢驗(yàn)后,，以及儀器工作不正常時(shí),，都要進(jìn)行波長(zhǎng)校正,。就是正常工作的儀器,，每隔一個(gè)月也要檢查一次波長(zhǎng),，必要時(shí)進(jìn)行校正,，這樣才能保證波長(zhǎng)讀數(shù)與通過(guò)樣品的波長(zhǎng)符合，保證儀器的zui大靈敏度,。方法常用譜釹濾光片校正法,，適用于721型儀可見(jiàn)光區(qū)的波長(zhǎng)校正，常以585nm或529nm處的吸收峰或T%為標(biāo)準(zhǔn),。鑒于721型儀器的出射光波長(zhǎng)較寬,，不易將573nm和585nm的兩峰或兩谷分開(kāi)，校正時(shí)易產(chǎn)生誤差,，故推薦用529nm處的峰或谷為標(biāo)準(zhǔn)來(lái)進(jìn)行波長(zhǎng)校正,。校正時(shí)，將儀器按要求預(yù)熱,。要求電源電壓穩(wěn)定,。波長(zhǎng)度盤(pán)置580nm處，T%調(diào)至zui大,，在比色杯處放一白紙條,，觀察是否有光強(qiáng)均勻、邊沿?zé)o光暈或雜光的光斑,，如不符合要求,，可調(diào)節(jié)燈泡位置使其符合要求，是為波長(zhǎng)校正的粗調(diào),。再把靈敏度扭置于“1”（zui低檔）,，波長(zhǎng)度盤(pán)對(duì)準(zhǔn)529nm，電表機(jī)械零點(diǎn)為零,，在光路空缺時(shí)調(diào)T%為100%T,，并反復(fù)查零點(diǎn)和100%T穩(wěn)定情況。將譜釹濾光片插進(jìn)光路,，慢慢旋轉(zhuǎn)波長(zhǎng)度盤(pán),，找到透光率zui低的一點(diǎn)（向左右微旋波長(zhǎng)度盤(pán)時(shí)，該點(diǎn)透光率值均增加）,，這一點(diǎn)即為波長(zhǎng)529nm,。檢查波長(zhǎng)度盤(pán)的指示值是不是529nm，如指示值為534nm，此時(shí)波長(zhǎng)工誤差為5nm,，超出規(guī)定（±1nm）必須進(jìn)行調(diào)整,。

　　調(diào)整方法：將波長(zhǎng)度盤(pán)對(duì)準(zhǔn)529nm，從光路取出譜釹濾光片,，光路空缺時(shí)調(diào)電表指針到100%T,，再將譜釹濾光片插進(jìn)光路。打開(kāi)儀器左側(cè)小蓋板,，找到波長(zhǎng)校正螺絲（3個(gè)中左側(cè)柄長(zhǎng)的一個(gè)）,；反時(shí)針?lè)较蛭⑽⒄{(diào)節(jié)（負(fù)誤差時(shí)順時(shí)針?lè)较颍闺姳碇羔樀闹甘綯%為zui低,。反復(fù)檢查波長(zhǎng)誤差情況,，直到符合儀器技術(shù)指標(biāo)為止。蓋好左側(cè)小蓋板,，校正結(jié)束,。

　　有些儀器如島津UV-260型雙光束分光光度計(jì)，可使用氫燈或置譜釹濾光片于測(cè)定比色槽內(nèi),，編進(jìn)濾工掃描程序后,，儀器即可自動(dòng)地在一定波長(zhǎng)范圍內(nèi)進(jìn)行波長(zhǎng)校正。分光光度儀的光學(xué)系統(tǒng)密封在一個(gè)單元組件內(nèi),，若發(fā)生故障,，波長(zhǎng)不準(zhǔn)，常須請(qǐng)制造商派專(zhuān)人修理,。其它尚有譜線(xiàn)校正法,、干涉濾光片校正法和有色溶液校正法等，可參考有關(guān)資料,。

　?。?）線(xiàn)性檢查：線(xiàn)性檢查包括儀器線(xiàn)性及測(cè)定方法線(xiàn)性?xún)蓚€(gè)方面的檢查,。線(xiàn)性誤差表現(xiàn)為溶液的濃度與吸光度不成線(xiàn)性關(guān)系,，出現(xiàn)正偏離或負(fù)偏離的現(xiàn)象。這種偏離,，按比耳定律的現(xiàn)象來(lái)自?xún)蓚€(gè)方面：一是溶液本身不符合比耳定律,，這種現(xiàn)象叫做化學(xué)偏離；二是儀器本身各種因素的影響,，使吸光度測(cè)定值與濃度之間不成線(xiàn)性關(guān)系,，這種現(xiàn)象叫儀器偏離。此處研究的是后者,。儀器偏離的因素很多,，如雜光、有限帶寬,、檢測(cè)器噪聲,、環(huán)境條件變化,、波長(zhǎng)的變動(dòng)、比色杯的誤差,、輻射光的非平行性,、檢測(cè)器本身的非線(xiàn)性等。

　　儀器線(xiàn)性檢查常用一種在一定波長(zhǎng)及一定濃度范圍內(nèi)確知其服從比耳定律的有色物質(zhì),，配成不同濃度的溶液,，來(lái)檢查儀器本身是否能如實(shí)地反映有色物質(zhì)的濃度變化。這種檢查方法與任何被測(cè)物質(zhì)呈色反應(yīng)等方法學(xué)上的題目無(wú)關(guān),。用測(cè)得的吸光度對(duì)濃度作圖,，在理想情況下應(yīng)是一條直線(xiàn)。常用的方法是用0.8,、1.6,、2.4、4.0mg/L伊文藍(lán)濃度系列來(lái)檢查,，波長(zhǎng)用610nm,。

　　（3）雜光（散光）檢查：在吸光度測(cè)定中,，凡檢測(cè)器感受到的不需要的輻射都稱(chēng)為雜光,。雜光對(duì)吸光度測(cè)定法的正確性有嚴(yán)重的影響，但卻往往被忽視,。雜光的來(lái)源有：①儀器本身的原因,，如單色器的設(shè)計(jì)、光源的光譜分布,、光學(xué)原件的老化程度,、波帶寬度以及儀器內(nèi)部的反射及散射等；②室內(nèi)光線(xiàn)過(guò)強(qiáng)而漏進(jìn)儀器,，儀器暗室蓋不嚴(yán),；③樣品本身的原因，如樣品有無(wú)熒光,、樣品的散射能力強(qiáng)弱等,。

　　雜光檢測(cè)方法：①紫外光區(qū)的雜光監(jiān)測(cè)可用10±0.1g/L的碘化納溶液，在240nm處測(cè)定的吸光度應(yīng)大于2.00,。此外,，也可用12g/L的氯化鉀溶液，在220nm處測(cè)其透光度,，即為雜光量,，一般應(yīng)小于1%T。以上測(cè)定均用石英杯，以蒸餾水校零,。②在可見(jiàn)光區(qū)可使用譜釹濾光片或硫酸鎳法檢查,。先用譜釹濾片校正波長(zhǎng)，然后用黑紙片擋住比色杯光路（進(jìn)口儀器帶有比色杯樣玄色標(biāo)柱）之后調(diào)整0%T,，再用空氣做空缺調(diào)100%T,。插進(jìn)譜釹濾光片，在585nm處測(cè)定,，其測(cè)定值即為雜光水平,。

　　（4）比色杯的質(zhì)量檢查：比色杯一般由玻璃,、石英或熒石制成,，光徑1.0或0.5cm,光線(xiàn)通過(guò)期有一部分光為空氣與玻璃接觸面的反射而損失（4%），另一部分（很少）為玻璃吸收,。比色杯的質(zhì)量除其原料外,，再就是玻璃的厚度均勻，上下一致,，各杯彼此相配,。廠家多以四個(gè)一套供給，且杯口上部外面標(biāo)有箭頭,，箭頭對(duì)光源側(cè)使用,。盡管如此，在使用前還是應(yīng)作質(zhì)量檢查,。常用伊文藍(lán)法：將一定量的2.0mg/L的伊文藍(lán)溶液注進(jìn)比色杯中,，比色杯內(nèi)液面應(yīng)相等。用一個(gè)比色杯作標(biāo)準(zhǔn),，用紅色濾光片（波長(zhǎng)600～610nm）,，用水校零后將此杯的讀數(shù)正確調(diào)至50%T，接著讀取其余杯的透光度,。透光度相差在±0.5%T范圍內(nèi)者為合格,。

　　（5）穩(wěn)定性檢查：檢查方法：將分光光度計(jì)及附件接于0.5kVA以上的可調(diào)變壓器,，先調(diào)電壓為220V,，波長(zhǎng)固定在650nm,，在光路比色杯裝以空缺液,，調(diào)讀數(shù)為90%T處，再將電壓升至230V及降至190V,，觀察透光度的漂移值,。若介于88.5%～91.5%T之間為合格。在電源電壓不變的條件下，在3分鐘內(nèi)其讀數(shù)漂移不應(yīng)超過(guò)標(biāo)尺上限值的±0.5%,。

　?。?）重復(fù)性檢查：在波長(zhǎng)、工作狀態(tài),、電源電壓,、比色杯配套等合格的條件下，進(jìn)行重復(fù)檢查,。在用交流電源供電時(shí),，儀器對(duì)一種溶液重復(fù)測(cè)定的讀數(shù)值差應(yīng)小于或即是標(biāo)尺上限值的1%。試驗(yàn)方法：將分析純重絡(luò)酸鉀于120～150攝氏度烘干2小時(shí),，干燥器中冷卻,。精稱(chēng)509.1mg于1000ml容量瓶中，以蒸餾水溶解并加至刻度,，混勻（此液180mg/L鉻）,。就用液為30、60,、180mg鉻/L,。取波長(zhǎng)440nm，將應(yīng)用液各濃度管連續(xù)測(cè)3～5次,，各濃度管中zui大誤差小于1%T為合格,。

　　（7）靈敏度檢查：將重鉻酸鉀液配制成30和32.5mg鉻/L及120和122.5mg/L鉻的4種應(yīng)用液（濃度差兩組各為2.5mg/L鉻）,。波長(zhǎng)440nm,，以水校零點(diǎn)，將上述應(yīng)用液連續(xù)測(cè)3次吸光度,，兩組2.5mg/L鉻濃度差的吸光度值差都不小于0.01為合格,。

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