溫育常采用的溫度有43℃、37℃、室溫和4℃等,。37℃是實(shí)驗(yàn)室中常用的保溫溫度，也是大多數(shù)抗原抗體結(jié)合的合適溫度,。在建立ELISA方法作反應(yīng)動(dòng)力學(xué)研究時(shí),，實(shí)驗(yàn)表明，兩次抗原抗體反應(yīng)一般在37℃經(jīng)1～2小時(shí),，產(chǎn)物的生成可達(dá),。為加速反應(yīng)，可提高反應(yīng)的溫度,，有些試驗(yàn)在43℃進(jìn)行,，但不宜采用更高的溫度?？乖贵w反應(yīng)4℃更為*,，在放射免疫測(cè)定中多使反應(yīng)在冰箱中過(guò)夜，以形成zui多的沉淀,。但因所需時(shí)間太長(zhǎng)，在ELISA試劑盒中一般不予采用,。
　　
　　保溫的方式除有的ELISA儀器附有特制的電熱塊外,，一般均采用水浴，可將ELISA試劑盒板置于水浴箱中,，ELISA板底應(yīng)貼著水面,，使溫度迅速平衡。為避免蒸發(fā),，板上應(yīng)加蓋,，也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔，此時(shí)可讓反應(yīng)板漂浮在水面上,。若用保溫箱,，ELISA試劑盒應(yīng)放在濕盒內(nèi)，濕盒要選用傳熱性良好的材料如金屬等,，在盒底墊濕的紗布,，zui后將ELISA板放在濕紗布上。濕盒應(yīng)先放在保溫箱中預(yù)溫至規(guī)定的溫度,，特別是在氣溫較低的時(shí)候更應(yīng)如此,。無(wú)論是水浴還是濕盒溫育，反應(yīng)板均不宜疊放,，以保證各板的溫度都能迅速平衡,。室溫溫育的反應(yīng)，操作時(shí)的室溫應(yīng)嚴(yán)格限制在規(guī)定的范圍內(nèi)，標(biāo)準(zhǔn)室溫溫度是指20～25℃,，但具體操作時(shí)可根據(jù)說(shuō)明書(shū)的要求控制溫育,。室溫溫育時(shí)，ELISA試劑盒只要平置于操作臺(tái)上即可,。應(yīng)注意溫育的溫度和時(shí)間應(yīng)按規(guī)定力求準(zhǔn)確,。為保證這一點(diǎn)，一個(gè)人操作時(shí),，一次不宜多于兩塊板同時(shí)測(cè)定,。
 

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