大多數(shù)科研客戶在取血清或者是上清的時候,，都需要離心,！那咱們就來著重討論一下差速離心法和速率區(qū)帶離心法,，這兩種詳細(xì)方法的介紹,！

   （一）差速離心法

　　它利用不同的粒子在離心力場中沉降的差別,，在同一離心條件下,，沉降速度不同，通過不斷增加相對離心力,，使一個非均勻混合液內(nèi)的大小,、形狀不同的粒子分部沉淀。操作過程中一般是在離心后用傾倒的辦法把上清液與沉淀分開,，然后將上清液加高轉(zhuǎn)速離心,，分離出第二部分沉淀，如此往復(fù)加高轉(zhuǎn)速,，逐級分離出所需要的物質(zhì),。

　　差速離心的分辨率不高，沉淀系數(shù)在同一個數(shù)量級內(nèi)的各種粒子不容易分開,，常用于其他分離手段之前的粗制品提取,。

　　（二）速率區(qū)帶離心法

　　速率區(qū)帶離心法是在離心前于離心管內(nèi)先裝入密度梯度介質(zhì)（如蔗糖,、甘油,、KBr、CsCl等）,，待分離的樣品鋪在梯度液的頂部,、離心管底部或梯度層中間，同梯度液一起離心。離心后在近旋轉(zhuǎn)軸處（X 1 ）的介質(zhì)密度zui小,，離旋轉(zhuǎn)軸zui遠(yuǎn)處（X 2 ）介質(zhì)的密度zui大,，但zui大介質(zhì)密度必須小于樣品中粒子的zui小密度，即ρ P ＞ρ m ,。這種方法是根據(jù)分離的粒子在梯度液中沉降速度的不同,，使具有不同沉降速度的粒子處于不同的密度梯度層內(nèi)分成一系列區(qū)帶，達(dá)到彼此分離的目的,。梯度液在離心過程中以及離心完畢后,，取樣時起著支持介質(zhì)和穩(wěn)定劑的作用，避免因機械振動而引起已分層的粒子再混合,。

　　由于ρ P ＞ρ m 可知S＞0,，因此該離心法的離心時間要嚴(yán)格控制，既有足夠的時間使各種粒子在介質(zhì)梯度中形成區(qū)帶,，又要控制在任一粒子達(dá)到沉淀前,。如果離心時間過長，所有的樣品可全部到達(dá)離心管底部,；離心時間不足,，樣品還沒有分離。由于此法是一種不*的沉降,，沉降受物質(zhì)本身大小的影響較大，一般是應(yīng)用在物質(zhì)大小相異而密度相同的情況,。常用的梯度液有Ficoll,、Percoll及蔗糖。

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