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所需儀器：XL03RH型控溫離心機(jī)（低速冷凍離心機(jī),，可使用24*15ml離心管,，水平轉(zhuǎn)子）,；抽血注射器（大小與抽血體積相一致）
試劑：Optiprep,；Tricine-緩沖鹽溶液（TBS,僅小鼠血）0.85%（質(zhì)量濃度）NaCl,，10mmol/L Tricine-NaOH（ph = 7.4）,。
方法：樣品收集
1） 收集人外周血,，用EDTA（1mmol/L）或檸檬酸鹽（3.8%，質(zhì)量濃度）抗凝（為了避免對(duì)結(jié)果的影響,，避免使用肝素）,。
2） 用CO2麻醉大鼠，收集血液（約10ml）,，把血液收集到含有1ml 3.8%（質(zhì)量濃度）檸檬酸鹽的10ml注射器里,。
3） 用CO2麻醉小鼠，收集血液,，把血液收集到含有0.1ml 3.8%（質(zhì)量濃度）檸檬酸鹽的2ml注射器里,。
細(xì)胞的分級(jí)分離
1） 取1.25ml（用于人血）或1.26ml（用于大鼠血）Optiprep與10ml的血液輕輕混血（反復(fù)顛倒）。對(duì)于小鼠血液（0.5~1.0ml）,，5.0ml TBS與1.5ml Optiprep混合,，然后取該混合液5ml與小鼠血液混合。
2） 在頂上鋪少量生理鹽水（0.5ml）,，它可以防止單核細(xì)胞在空氣/介質(zhì)分界面形成區(qū)帶,，也避免細(xì)胞在血漿/離心管壁交匯處堆積。
3） 在20℃,、1000~1200g離心30分鐘
4） 用吸管收集彎月面的細(xì)胞,，除去距沉淀2cm以上的所有上清液,。
說明：大多數(shù)細(xì)胞在血漿/生理鹽水分界面處的區(qū)帶里,，但10%~15%在沉淀上面的血漿里。
湖南湘立研制生產(chǎn)的幾款醫(yī)用離心機(jī)可以用來進(jìn)行細(xì)胞分離,，如DL5M/TDL5M兩種型號(hào)的低速冷凍離心機(jī)可用來進(jìn)行干細(xì)胞實(shí)驗(yàn),。XL03RH型控溫離心機(jī)（低速冷凍離心機(jī)）可用來進(jìn)行溫度敏感型人體細(xì)胞分離,。
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