人胸腺白血病抗原(TLa)elisa試劑盒使用說明書
操作步驟
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,,在*,、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,,然后在*,、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,,混勻,;然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,,再在第三,、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻,;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,,再在第五,、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻,;混勻后從第五,、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,,再在第七,、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七,、第八孔中分別取50μl加到第九,、第十孔中,,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉,。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,,濃度分別為1800ng/L,1200ng/L ,,600ng/L,,300ng/L, 150ng/L),。
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔,。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動(dòng)混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘,。
4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用,。
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,,甩干,,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,,如此重復(fù)5次,,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,,空白孔除外,。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5,。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,,輕輕震蕩混勻,,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色),。
11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行,。
【人胸腺白血病抗原(TLa)elisa試劑盒】注意事項(xiàng):
1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2. 濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3. 各步加樣均應(yīng)使用加樣器,,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),,如標(biāo)本數(shù)量多,,推薦使用排槍加樣。
4. 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,,做復(fù)孔,。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,,計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5),。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染,。
6. 底物請(qǐng)避光保存,。
7. 嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8. 所有樣品,,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理,。
9. 本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異,,以英文說明書為準(zhǔn),。
試劑盒性能:
1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.95以上。
2.批內(nèi)與批見應(yīng)分別小于9%和11%
檢測(cè)范圍:
0.2IU/L - 6IU/L
Elisa kit規(guī)格:48孔配置/96孔配置
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液:1.5ml×1瓶
酶標(biāo)試劑:3 ml×1瓶(48)/6 ml×1瓶(96)
【人胸腺白血病抗原(TLa)elisa試劑盒】本試劑僅供研究使用
計(jì)算:
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),,OD值為縱坐標(biāo),,在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度,;再乘以稀釋倍數(shù),;或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,,計(jì)算出樣品濃度,,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度,。
試劑盒組成:
封板膜:2片(48)/2片(96)
說明書:1份
密封袋:1個(gè)
標(biāo)準(zhǔn)品: 2700ng/L 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃保存
酶標(biāo)包被板: 1×48 1×96 2-8℃保存
樣品稀釋液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
顯色劑A液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
顯色劑B液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
終止液: 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存
濃縮洗滌液:(20ml×20倍)×1瓶 (20ml×30倍)×1瓶 2-8℃保存
上海江萊生物科技有限公司現(xiàn)貨供應(yīng):醫(yī)藥中間體,、生物試劑、抗體,、ELISA試劑盒,、抗體,、培養(yǎng)基等試劑產(chǎn)品的研發(fā)、銷售,。質(zhì)量品牌保證,,價(jià)格公正,售前,、售中,、售后免費(fèi)技術(shù)指導(dǎo)。咨詢,!
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