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細胞培養(yǎng)中常見的污染情況總結如下:
常見的污染如下：
1,、細菌：細菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細沙狀,，根據(jù)感染細菌的不同，可有不同的外形,，培養(yǎng)液一般會渾濁變黃,，對細胞生長影響明顯。
仔細檢查一下器皿的滅菌情況,，是否在高壓滅菌時放氣時間足夠,，壓力足夠！尤其是和儲存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品,，連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲存液污染,，一定要注意！下次使用前檢查一下培養(yǎng)液是否存在渾濁的現(xiàn)象,！
可在培養(yǎng)液中加相應的抗生素處理,。
2,、霉菌：培養(yǎng)液是清亮的,，倒置顯微鏡下無雜質，37度孵箱培養(yǎng)2-3天,，仍清亮,，但出現(xiàn)絮狀雜質，鏡下可見呈細絲狀的團狀漂浮物,，可看到明顯的菌絲,，細胞仍可生長，但時間長之后,，細胞的活力狀態(tài)變差,，
用硫酸銅溶液擦拭CO2孵箱內(nèi)，再把水盤里也加上飽和量的硫酸銅,?；蛘咴谂囵B(yǎng)箱的托盤加入飽和的消毒磷酸氫二鈉高鹽液體,可以防止霉菌污染。CO2孵箱被霉菌污染后,，可把所有細胞暫時轉移,，采用過氧乙酸擦洗孵箱（包括隔板,，箱壁）。并把過氧乙酸放置在孵箱內(nèi)一個小時,，使其蒸汽彌漫,。待過氧乙酸的氣味消散后，再移入細胞,。孵箱應定期清潔（2月左右）,，尤其在多雨的季節(jié)。
其它培養(yǎng)箱清洗方法是：用84液擦洗－清水擦洗－75%酒精擦洗－紫外燈照,。
預防霉菌污染,，可在培養(yǎng)基里加3u/ml的兩性霉素或制霉菌素或放線菌素D或雙抗；但細胞一旦污染,，很難挽救,，制霉菌素或放線菌素D或雙抗都于事無補，建議舍棄該污染細胞,。,，將環(huán)境*消毒，如果所有細胞都污染,，可能是系統(tǒng)污染,，檢查一下培養(yǎng)基和器材，如果只是個別污染,，可能是操作問題,，就要注意操作
3、支原體：黑色的,，好象多為多形,，培養(yǎng)液一般培養(yǎng)液一般會渾濁，原體感染,，國內(nèi)血清很多都沒有做支原體陰性檢測,，而支原體是牛血清中zui常見的微生物之一。而且它不能用過濾的辦法除去,。支原體感染細胞以后,，細胞病變不很明顯，只是慢慢死去,。
用泰樂菌素,，獸用支原體病的藥，但可用于細胞培養(yǎng),，無任何不良反應,。Sigma公司的使用時用50ug/ml Tylosin培養(yǎng)液培養(yǎng)6天或連續(xù)傳兩代即可清除支原體污染。如果作為常用的抗生素的話, 建議用8ug/ml的濃度,。
4,、黑蛟蟲：可以穿透濾膜,，也可以通過空氣傳播，低倍下為黑色點狀,，高倍下可看見黑色的小蟲游來游去,，培養(yǎng)液也是不渾的，一般不會太影響,，細胞還是可以用的,。常常是細胞生長狀態(tài)良好，且觀測到的運動物無明顯增多,，且培養(yǎng)液顏色,、透明度無明顯變化，可在同一批號的血清養(yǎng)的細胞中發(fā)現(xiàn)類似現(xiàn)象,。對細胞生長狀態(tài)不會有明顯影響,，在細胞增殖旺盛之后會自然消失，除更換血清外無須特殊處理,。建議如果細胞有可能是此種污染的話,，可以增加細胞的種板密度，以提高細胞的生存率,。
5,、真菌：一般培養(yǎng)液清亮，不變色,，鏡下有絲狀物,，有些真菌開始很像死細胞碎片，只是它很多很多的小塊很清楚,，象珊瑚狀,，不象細胞碎片分不清，慢慢的會長出很細的黑色絲狀物,。真菌生長的比較慢,，不象細菌那么容易被發(fā)現(xiàn)，但是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細胞就被污染了,，也很難救活了。
6,、原蟲：培養(yǎng)液可輕微渾濁,，顯微鏡下那些細小的點狀物數(shù)量非常多，輕微活動,，細胞雖然可以生長但繁殖速度卻明顯減慢,，而且細胞狀態(tài)不好，邊緣不清楚,，細胞不透亮,。他們與細胞可共生但會與細胞爭奪營養(yǎng),。這種共生是非常普遍的，但他們的數(shù)量小,，細胞站優(yōu)勢所以不會影響到細胞的正常生長,，只有當他們到達一定的數(shù)量時就會影響到細胞的生長，zui終形成惡性循環(huán),。
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