研究細(xì)胞周期
上海滬峰是由留學(xué)美國多年的資深學(xué)者創(chuàng)辦的一家*企業(yè),,與中國農(nóng)業(yè)大學(xué)、華中農(nóng)業(yè)大學(xué),、哈爾濱獸醫(yī)研究所等多家高校及生物技術(shù)研究機(jī)構(gòu)建立了合作關(guān)系。公司以開發(fā)的動物疾病診斷試劑,、食品安全檢測試劑,、人體疾病診斷試劑、環(huán)境監(jiān)測試劑,、新型酶制劑,、微生物制劑、蛋白質(zhì)產(chǎn)品,、核苷酸產(chǎn)品,、綠色水產(chǎn)藥品、小分子抗原抗體,、基因重組抗原抗體等生物化學(xué)制品為主,,以*的化企業(yè)經(jīng)營理念、雄厚的研發(fā)實力,、規(guī)范化的生產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn),、健全的銷售網(wǎng)絡(luò)、完善的技術(shù)服務(wù)體系和廣闊的國內(nèi)外合作網(wǎng)絡(luò)服務(wù)于,,致力于生物制劑在的產(chǎn)業(yè)化,。
Premo™ FUCCI Cell Cycle Sensor是基于兩個細(xì)胞周期調(diào)控蛋白geminin和Cdt1,它們分別與綠色和紅色熒光蛋白相融合,。Cdt1和geminin蛋白的降解是時間上調(diào)控的,,這樣G1期只存在Cdt1,G1/S期存在兩種蛋白,,而S,、G2和M期只存在geminin。因此,,細(xì)胞核的熒光就從紅色(G1)變成綠色(S,、G2、M),,為監(jiān)控細(xì)胞周期進(jìn)程提供了一種簡單的方法,。
FUCCI系統(tǒng)是基于BacMam 2.0技術(shù),它利用桿狀病毒來實現(xiàn)哺乳動物細(xì)胞的轉(zhuǎn)導(dǎo)和瞬時表達(dá)。BacMam 2.0大大提高了這種基因?qū)肫脚_的效率和實用性,。過去與BacMam 1.0不兼容的細(xì)胞類型(神經(jīng)元),,或轉(zhuǎn)導(dǎo)效果不佳(一些干細(xì)胞、CHO)的細(xì)胞類型,,現(xiàn)在也能通過簡單的一步過程定量轉(zhuǎn)導(dǎo),。BacMam 2.0融合了新元件,大大增強(qiáng)了轉(zhuǎn)導(dǎo)效率和表達(dá)水平,,故性能改善,。
Premo™ FUCCI Cell Cycle Sensor實現(xiàn)了細(xì)胞周期進(jìn)程和細(xì)胞分裂的活細(xì)胞成像,它也與固定和透化處理兼容,。這種細(xì)胞周期傳感器是即用型的,,操作過程也很簡單——只需將Premo™ FUCCI試劑加入您的細(xì)胞,孵育過夜,,并利用熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀觀察即可,。
追蹤DNA合成
Click-iT® EdU assay則是我們常用的BrdU分析的替代。在DNA合成過程中,,核苷類似物EdU(5-乙炔-2’-脫氧尿苷)摻入新生的DNA鏈中,。EdU不是通過抗體檢測,而是基于一個click反應(yīng)——銅催化的疊氮化物和炔烴之間的共價反應(yīng),。EdU核苷中含有炔烴,,而Alexa Fluor或Pacific Blue熒光基團(tuán)上含有疊氮化物。利用成像技術(shù),、流式細(xì)胞術(shù)或高內(nèi)涵分析即可判定群體中S期細(xì)胞的比例,。
Click-iT® EdU標(biāo)記的一個主要優(yōu)勢在于熒光疊氮化物(分子量<~1,000)的體積遠(yuǎn)小于BrdU抗體(分子量~150,000),這樣EdU可在溫和條件下?lián)饺?,保留了抗原完整性,,從而實現(xiàn)了下游的抗體分析。與BrdU檢測需要苛刻條件不同,,Click-iT®檢測試劑只需要標(biāo)準(zhǔn)的固定和透化即可,。
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