北京慧德易教您怎樣選擇色譜柱
現(xiàn)代液相色譜中,分離效果好壞很大程度上取決于色譜填料的選擇,。但是色譜填料的選擇范圍很寬,,要做合適的選擇,,必須對此有一定的認識和了解。
1.硅膠基質填料
(1)正相色譜
由于硅膠表面的硅羥基(SiOH)或其他極性基團極性較強,因此,,分離的次序是依據(jù)樣品中各組份的極性大小,,即極性較弱的組份zui先被沖洗出色譜柱。
(2)反相色譜反相色譜用的填料常是以硅膠為基質表面鍵合有極性相對較弱的官能團的鍵合相,。
反相色譜所使用的流動相極性較強,通常為水,、緩沖液與甲醇,、乙腈等的混合物。
樣品流出色譜的順序是極性較強的組份zui先被沖洗出,,而極性弱的組份會在色譜柱上有更強的保留,。
常用的反相填料有:C18(ODS)、C8(MOS),、C4(butyl),、C6H5(Phenyl)等。
2.聚合物填料
聚合物填料多為聚苯乙烯-二乙烯基苯或聚甲基丙烯酸酯等,,其主要優(yōu)點是在pH值為1~14均可使用,。
相對于硅膠基質的C18填料,這類填料具有更強的疏水性;大孔的聚合物填料對蛋白質等樣品的分離非常有效,。
3.其它無機填料
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