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1.RNA提取的樣品很重要,，包括樣品的質(zhì)量，細(xì)胞數(shù),，雜質(zhì)含量等等,，建議：按照說明書的要求，每毫升TRIzol不超過100mg再低些在50mg左右;樣品的質(zhì)量一定要控制好,；研磨得時間不宜過長,，成粉狀即可，液氮常加（研磨的意義主要是使細(xì)胞與TRIzol的作用更充分,，如有團(tuán)塊挑出取質(zhì)舍量）,；作用時間15分鐘；
2.氯仿抽提,，一定要混勻,，劇烈些沒關(guān)系。但一定要充分作用；
3.異丙醇沉淀,，混勻,，冰上操作會在一定程度上增加RNA產(chǎn)量；
4.75%乙醇清洗一次即可,，速度我一般選擇高速8000g-10000g之間的,，結(jié)果都可；
5.檢樣,，zui主要的是配置的瓊脂糖膠和電泳緩沖液一定要避免RNA酶的污染,，如果有固相RNA酶去除劑，可以用其處理電泳槽5-10后（時間以說明書為準(zhǔn)）,，用高壓后的DEPC水沖洗即可,，方便，呵呵,；
以上是我認(rèn)為在RNA提取過程的體會,，歡迎大家討論，至于反應(yīng)的時間按照說明書調(diào)整,，其實說明書已經(jīng)放的比較寬了,，這個我覺得沒有必要討論。
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