上海米青科提供-紫外分光光度計(jì)應(yīng)用與工作原理

紫外分光光度計(jì)簡(jiǎn)述
　　1852年,，比爾（Beer）參考了布給爾（Bouguer）1729年和朗伯（Lambert）在1760年所發(fā)表的文章,，提出了分光光度的基本定律,，即液層厚度相等時(shí)，顏色的強(qiáng)度與呈色溶液的濃度成比例，從而奠定了分光光度法的理論基礎(chǔ),，這就是的朗伯比爾定律,。1854年，杜包斯克（Duboscq）和奈斯勒（Nessler）等人將此理論應(yīng)用于定量分析化學(xué)領(lǐng)域,，并且設(shè)計(jì)了*臺(tái)比色計(jì),。到1918年，美國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)局制成了*臺(tái)紫外可見分光光度計(jì),。此后,，紫外可見分光光度計(jì)經(jīng)不斷改進(jìn)，又出現(xiàn)自動(dòng)記錄,、自動(dòng)打印,、數(shù)字顯示,、微機(jī)控制等各種類型的儀器,，使光度法的靈敏度和準(zhǔn)確度也不斷 提高，其應(yīng)用范圍也不斷擴(kuò)大,。 紫外可見分光光度法從問(wèn)世以來(lái),，在應(yīng)用方面有了很大的發(fā)展，尤其是在相關(guān)學(xué)科發(fā)展的基礎(chǔ)上,，促使分光光度計(jì)儀器的不斷創(chuàng)新,，功能更加齊全，使得光度法的應(yīng)用更拓寬了范圍,。

紫外分光光度計(jì)應(yīng)用
　　 1 檢定物質(zhì)
 　　根據(jù)吸收光譜圖上的一些特征吸收,，特別是zui大吸收波長(zhǎng)雖ax和摩爾吸收系數(shù)是檢定物質(zhì)的常用物理參數(shù)。這在藥物分析上就有著很廣泛的應(yīng)用,。在國(guó)內(nèi)外的藥典中,，已將眾多的藥物紫外吸收光譜的zui大吸收波長(zhǎng)和吸收系數(shù)載入其中，為藥物分析提供了很好的手段,。
 　　2 與標(biāo)準(zhǔn)物及標(biāo)準(zhǔn)圖譜對(duì)照
 　　將分析樣品和標(biāo)準(zhǔn)樣品以相同濃度配制在同一溶劑中,，在同一條件下分別測(cè)定紫外可見吸收光譜。若兩者是同一物質(zhì),，則兩者的光譜圖應(yīng)*一致,。如果沒(méi)有標(biāo)樣，也可以和現(xiàn)成的標(biāo) 準(zhǔn)譜圖對(duì)照進(jìn)行比較,。這種方法要求儀器準(zhǔn)確,，精密度高，且測(cè)定條件要相同,。
 　　3 比較zui大吸收波長(zhǎng)吸收系數(shù)的一致性
 　　4 純度檢驗(yàn)
 　　5 推測(cè)化合物的分子結(jié)構(gòu)
 　　6 氫鍵強(qiáng)度的測(cè)定
 　　實(shí)驗(yàn)證明,，不同的極性溶劑產(chǎn)生氫鍵的強(qiáng)度也不同，這可以利用紫外光譜來(lái)判斷化合物在不 同溶劑中氫鍵強(qiáng)度，以確定選擇哪一種溶劑 ,。
 　　7 絡(luò)合物組成及穩(wěn)定常數(shù)的測(cè)定
 　　8 反應(yīng)動(dòng)力學(xué)研究
 　　9 在有機(jī)分析中的應(yīng)用
 　　有機(jī)分析是一門研究有機(jī)化合物的分離,、鑒別及組成結(jié)構(gòu)測(cè)定的科學(xué)，它是在有機(jī)化學(xué)和分析化學(xué)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的綜合性學(xué)科,。

紫外分光光度計(jì)工作原理
　　物質(zhì)的吸收光譜本質(zhì)上就是物質(zhì)中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長(zhǎng)的光能量,，相應(yīng)地發(fā)生了分子振動(dòng)能級(jí)躍遷和電子能級(jí)躍遷的結(jié)果。由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子,、原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu),，其吸收光能量的情況也就不會(huì)相同。因此,，每種物質(zhì)就有其*的,、固定的吸收光譜曲線，可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長(zhǎng)處的吸光度的高低判別或測(cè)定該物質(zhì)的含量,，這就是分光光度定性和定量分析的基礎(chǔ),。分光光度分析就是根據(jù)物質(zhì)的吸收光譜研究物質(zhì)的成分、結(jié)構(gòu)和物質(zhì)間相互作用的有效手段,。
 　　又因?yàn)樵S多物質(zhì)在紫外-可見光區(qū)有特征吸收峰,，所以可用紫外分光光度法對(duì)這些物質(zhì)分別進(jìn)行測(cè)定（定量分析和定性分析）。紫外分光光度法使用基于朗伯-比耳定律,。 　　朗伯-比耳定律（Lambert－Beer）是光吸收的基本定律,，俗稱光吸收定律，是分光光度法定量分析的依據(jù)和基礎(chǔ),。當(dāng)入射光波長(zhǎng)一定時(shí),，溶液的吸光度A是吸光物質(zhì)的濃度C及吸收介質(zhì)厚度l（吸收光程）的函數(shù)。